检验科甲胎蛋白的测定

检验科甲胎蛋白的测定ELISA 测定甲胎蛋白(AFP)操作规程 1、检验目的检测血清AFP主要是用于原发性肝癌、生殖系统肿瘤等恶性肿瘤的诊断或者鉴别诊断,可以动态观察相关疾病的发生发展过程、疗效及预后评估,另外还可作为唐氏综合症、早期胎儿先天性畸形及肝癌高发区的普查指标。 2、方法原理采用ELISA双抗体夹心法,向抗AFP抗体包被的聚苯乙烯反应板微孔加入待检样本,再加酶标记抗AFP抗体,加入酶底物显色,用终止液终止反应,测定吸光度值,测定光密度,查标准曲线,计算待测样本中AFP含量。 3、性能指标此方法快速简便、特...

ELISA 测定甲胎蛋白(AFP)操作规程 1、检验目的检测血清AFP主要是用于原发性肝癌、生殖系统肿瘤等恶性肿瘤的诊断或者鉴别诊断,可以动态观察相关疾病的发生发展过程、疗效及预后评估,另外还可作为唐氏综合症、早期胎儿先天性畸形及肝癌高发区的普查指标。 2、方法原理采用ELISA双抗体夹心法,向抗AFP抗体包被的聚苯乙烯反应板微孔加入待检样本 ,再加酶标记抗AFP抗体,加入酶底物显色,用终止液终止反应,测定吸光度值,测定光密度,查MATCH_ word _1714999148732_0曲线,计算待测样本中AFP含量。 3、性能指标此方法快速简便、特异性强,检测灵敏度0.5ng/ml。 4、操作方法: (1)样品孔加入待测血清50ul。 (2)封板,置37℃孵育20min。 (3)洗版(机洗),选择洗涤5次程序,拍干。 (4)每孔加入酶标抗体血清,置37℃孵育20min。 (5)洗板,选择洗涤5次程序洗板后拍干。 (6)每孔加显色剂A液、B液各一滴,充分混匀,封板,置37℃孵育10min。 (7)用酶标仪读数,数值取波长450nm,先用空白孔校零,然后读取各孔OD值。 5、质控每次试验设阴性、阳性各两孔,并设空白对照1孔,随常规标本一起检测。 6、注意事项: 1.实验前,试剂先平衡至室温。 2.结果判定需在反应终止后10 min内完成。 3.不同批号试剂不能混用。 4.本试剂盒应视为有传染性物质,请按传染病实验室检查规程处理。 7、结果计算: 样品A值≤20 ng/ml 标准品孔A值为阴性。样品A值≥40 ng/ml 标准品孔A值为阳性。样品A值>20 ng/ml且<400 ng/ml 标准品孔A值为弱阳性。 8、正常值:≤20ng/ml。

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