实验六影响酶促反应速度的因素
实验六 影响酶促反应速度的因素
【目的】
观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
【原理】
唾液淀粉酶催化淀粉水解,生成一系列水解产物,即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。
在不同温度,不同PH值下,唾液淀粉酶活性不同,催化淀粉水解程度不一,生成的产物也就不同。此外,激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性,影响淀粉的水解。因此可根据在不同反应条件下,溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度,从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
淀粉酶淀粉酶淀粉 麦芽糖+葡萄糖 糊精
II22I2
呈蓝色 无色 蓝色、紫色、红色
【器材】
试管(10mm×100mm)、试管架、电热恒温水浴箱、沸水浴、冰浴、多孔白瓷板、滴管。
【试剂】
1.1%淀粉溶液 同实验五
2. 稀碘溶液
称取碘2g,碘化钾4g,溶于1 000蒸馏水中,置棕色试剂瓶中。
3.缓冲液
(1)pH3.0缓冲液 取0.2mol/LNaHPO溶液205ml,0.1mol/L柠檬酸溶液795ml,24
混合后即成。
(2)pH6.8缓冲液 同实验五
(3)pH8.0缓冲液 取0.2mol/LNaHPO溶液972ml,0.1mol/L柠檬酸溶液28ml,混24
合后即成。
4.1%NaCl溶液
称取氯化钠1g,加蒸馏水至100ml即成。
5.1%CuSO溶液 4
称取结晶硫酸铜1g,加蒸馏水至100ml。
6.1%NaSO溶液 24
称取硫酸钠1g,加蒸馏水至100ml即成。
7.稀释唾液 同实验五。
【操作】
1.温度对酶促反应速度的影响
取3支试管,编号,按下
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
操作:
表3-8 温度对酶促反应的影响
加入物(滴) 1 2 3 pH6.8缓冲液 20 20 20 1%淀粉溶液 10 10 10
置37?水浴5分钟 置沸水浴5分钟 置冰水浴5分钟 稀释唾液 5 5 5
置37?水浴10分钟 置沸水浴10分钟 置冰水浴10分钟 取出,各管加入碘液1滴,摇匀,观察并记录颜色变化。
2.PH对酶促反应速度的影响
取3支试管,编号,按下表操作:
表3-9 pH对酶促反应的影响
加入物(滴) 1 2 3 pH3.0缓冲液 20 , , pH6.8缓冲液 , 20 , pH8.0缓冲液 , , 20 1%淀粉溶液 10 10 10 稀释唾液 5 5 5 摇匀,置37?水浴保温,每隔1分钟从2号管中吸取1滴反应液于白瓷板上,加碘液
1滴检查反应进行情况,直至反应液不与碘液反应时,向各管各加入1滴碘液,摇匀,观
察并记录颜色变化。
3(激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响
取4支试管,编号,按下表操作:
表3-10 激活剂和抑制剂对酶活性的影响
加入物(滴) 1 2 3 4 1%淀粉溶液 10 10 10 10
pH6.8缓冲液 20 20 20 20 1% NaCl溶液 , 10 , 1% CuSO溶液 , , 10 4
1%NaSO , , , 10 24
蒸馏水 10 稀释唾液 5 5 5 5
混匀,置37?水浴中保温10分钟
取出,各管加入碘液各1滴,观察并记录颜色变化。
【结果及分析】
观察各管颜色变化,说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。
【思考题】
1. 何谓最适温度,温度对酶促反应有何影响,激活剂和抑制剂,
PH对酶促反应有何影响 2. 何谓最适pH,
3(何谓激活剂、抑制剂,激活剂、抑制剂对酶促反应速度有何影响,