实验七、酶的特性(唾液淀粉酶性质的研究)

实验七、酶的特性（唾液淀粉酶性质的研究） ［目的要求］ 1、进一步学习和了解酶的性质。 2、学会检查酶的性质的原理和方法。 ［实验原理］ 酶与一般催化剂最主要的区别之一是酶具有高度特异（专一）性，即一种酶只能对一种底物或一类底物（此类底物在结构上通常具有相同的化学键）起催化作用，对其他底物无催化反应。例如，淀粉酶和蔗糖酶虽然都是催化糖苷键的水解，但是淀粉酶只对淀粉起作用，蔗糖酶只水解蔗糖。还原糖产物可用本乃狄试剂鉴定。 通过比较淀粉酶在不同pH、不同温度以及有无抑制剂或激活剂时水解淀粉的差异，说明这些环境因素与酶活性的关系。 温度、PH对淀粉活性影响酶的催化活性受到温度的影响，在一定温度范围内，酶才有活性，且在最适温度下，酶反应速度最大。大多数动物酶的最适温度为37℃-40℃，植物酶的最适温度为50℃-60℃。对温度的稳定性与其存在形式有关，有些的干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显变，但在100℃的溶液中很快地完成失去活性。低温能降低或抑制的活性，但不能使失活。 酶的激活和抑制作用酶是具有高效专一催化活性的蛋白质，其活性常受温度PH及些物质的影响。 某些物质可以增加其活性，称为激活剂；某些物质能降低其活性，称为抑制剂。很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性，而且这种作用常常具有特异性。但要注意的是激活剂和抑制不是绝对的，有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂时却为另一种酶的抑制剂，而在高浓度时则为该酶的激活剂（如NaCl）。 ［实验材料与设备］ 器材：试管和试管架、试管夹、恒温水浴箱、烧杯、冰浴（冰箱）、沸水浴（电磁炉）、移液管。 试剂：0.2%淀粉-0.3% NaCl液、0.1%淀粉、1%淀粉-0.3% NaCl液、1%CuSO4、1%NaCl、1%Na2SO4、2%蔗糖溶液，碘化钾-碘溶液，斑氏试剂。 ［实验步骤］ 一、酶液的提取。 （1）唾液淀粉酶的制备。 二、酶的活性检验 （1） 温度对酶活性的影响。 管 号 1 2 3 0.2%淀粉—NaCl液（ml ） 3.0 3.0 3.0 稀淀粉酶 1.0 1.0 煮沸淀粉酶     1.0 温度处理（10分钟） 37℃ 冰浴 37℃ 温度处理（10分钟）       加KI—I2 2—3d 2—3d 2—3d 结果—反应速度                     摇匀，保持各自温度继续反应，5分钟后每隔1分钟从第2号管吸取1滴反应液于白瓷板上，用碘液检查反应进行情况，直至反应液不再变色（只有碘液的颜色），立即取出所有试管，流水冷却2min，各加1滴碘液，混匀。观察并记录各管反应现象，解释之。 注：*2号管冰浴10分钟后分成二半、一半加碘试剂一半37℃保温10min后加碘试剂。 （2） 激活剂和抑制剂。 管 号 1 2 3 4 0.1%淀粉（ml） 2 2 2 2 1%CuSO4（ml） 1       1%NaCl（ml）   1     1%Na2SO4（ml）     1   蒸馏水       1 稀淀粉酶（ml） 1 1 1 1 保温（37℃）10分钟后 KI—I2 2—3d 现 象                   试说明本实验第3号管的意义，并推出Cl-和Cu2+各是唾液酶的激活剂还是抑制剂？举例说明抑制与变性剂有何异同？ 三、的专一性 管 号 1 2 3 4 淀粉液（ml） 2   2 2 蔗糖液（ml）   2     酶液（ml） 1 1     煮沸的酶液（ml）       1 蒸馏水     1   保温（37℃）15分钟后 Benedict试剂（ml） 1 1 1 1 沸水浴2-3min 现 象                   四、结果处理 讨论 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 ：为何温度的控制是实验成败的关键？ 五、注意事项： 1) 激活剂抑制剂实验中淀粉酶要最后加（为什么？） 2) 加入淀粉时要小心，不要沾到试管壁；另外，摇匀时也不宜用力过猛，使淀粉溶液或淀粉粒过多地沾在试管壁上，这样会影响结果的观察，误差较大。 3) 反应结果如不明显调节保温时间和酶液浓度。 4) 温度结果要先准备好煮沸的酶液和冰浴再加入试剂。冰浴处理10分钟后的那支试管内的溶液要取约一半放在室温继续反应。 琼州学院实验项目卡 生命科学 系  生化 实验室    开设日期___年___月___日 实验项目 酶的特性 面向专业   课程性质 1、必修 2、选修 实验类型 1、还未开设的新实验 2、手段更新的实验 3、已开设过的实验 本实验学时数 3 实验分组概况   所用主要仪器 名 称 型号规格 数量 名 称 型号规格 数量 恒温水浴箱   1       电磁炉   1       试管及试管架 若干       移液管 2ml 若干       冰箱   1       大烧杯 （装冰块） 1       所用主要药品 名 称 纯度级别 数量 名 称 纯度级别 数量 淀粉 0.2%（溶于0.3%氯化钠） 20ml*N Benedict试剂 无水硫酸铜   20ml*N 0.1% 30ml*N 柠檬酸钠   1%（溶于0.3%氯化钠） 20ml*N 无水碳酸钠   氯化钠 1% 40ml*N 碘化钾   200ml 0.3%   碘   硫酸钠 1% 10ml*N       硫酸铜 1% 10ml*N       蔗糖 2% 300ml       其他 新鲜唾液、大量冰块 实验记录                                     实验教师签名______________________ 实验员（管理员）签名______________