理论塔板数

理论塔板数 色谱的柱效参数之一,用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。 N与柱长成正比，柱越长，N越大。用N表示柱效时应注明柱长，，如果未注明，则表示柱长为1米时的理论塔板数。（一般HPLC柱的N在1000以上。） 若用调整保留时间（tR’）计算理论塔板数，所得值称为有效理论塔板数（N有效或Neff）=16(tR’/W)2 谱线红移 对于宇宙谱线红移，从可能性的角度可能存在三中形成谱线频移的原因，即：距离效应、多普勒效应、康普顿效应，本文从理论上提出鉴别那一种是形成主要原因的方法。 不饱和度 不饱和度又称缺氢指数,即有机物分子中与碳原子数相等的开链烷烃相比较，每减少2个氢原子，则有机物的不饱和度增加1，用Ω表示。 气相色谱法（gas chromatography 简称GC）是色谱法的一种。色谱法中有两个相，一个相是流动相，另一个相是固定相。如果用液体作流动相，就叫液相色谱，用气体作流动相，就叫气相色谱。 气相色谱法由于所用的固定相不同，可以分为两种，用固体吸附剂作固定相的叫气固色谱，用涂有固定液的担体作固定相的叫气液色谱。 按色谱分离原理来分，气相色谱法亦可分为吸附色谱和分配色谱两类，在气固色谱中，固定相为吸附剂，气固色谱属于吸附色谱，气液色谱属于分配色谱。 液相色谱法 liquid chromatography 用液体作为流动相的色谱法 。1903 年俄国化学家M.C.茨维特首先将液相色谱法用于分离叶绿素。 原理和分类 液相色谱法的分离机理是基于混合物中各组分对两相亲和力的差别。根据固定相的不同，液相色谱分为液固色谱、液液色谱和键合相色谱。应用最广的是以硅胶为填料的液固色谱和以微硅胶为基质的键合相色谱。根据固定相的形式，液相色谱法可以分为柱色谱法、纸色谱法及薄层色谱法。按吸附力可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱。近年来，在液相柱色谱系统中加上高压液流系统，使流动相在高压下快速流动，以提高分离效果，因此出现了高效（又称高压）液相色谱法。样品中各组分在两相中分配系数的差异。 中文词条名：火焰离子化检测器(FID) 英文词条名： 有机物在氢火焰中燃烧时生成的离子，在电场作用下产生电信号的器件。 死时间 死体积（dead Volume）,从进样到惰性气体峰出现极大值的时间称为死时间. 所谓惰气指的是与色谱固定相无相互作用的组分，也就是说它能与进样瞬间的载气同时进入检测器。所以惰气出峰时间反映载气流过系统的时间。载气流速一定，此时间不变，故称死时间。 保留时间 色谱用语，英文叫做retention time。被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间，也既从进样开始到出现某组分色谱峰的顶点时为止所经历的时间，称为此组分的保留时间，用tR表示，常以分（min）为时间单位。保留时间是由色谱过程中的热力学因素所决定，在一定的色谱操作条件下，任何一种物质都有一确定的保留时间，有着类似于比移值相同的作用，可作为定性的依据。 保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间，不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间，因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。 保留时间由物质在色谱中的分配系数决定： tR = t0(1 + KVs / Vm) 式中tR表示某物质的保留时间，t0是色谱系统的死时间，即流动相进入色谱柱到流出色谱柱的时间，这个时间由色谱柱的孔隙、流动相的流速等因素决定。K为分配系数，VsVm表示固定相和流动相的体积。这个公式又叫做色谱过程方程，是色谱学最基本的公式之一。 相对保留时间 色谱用语,相邻两组分的分配系数或容量因子之比。α＝＝ （设k2＞k1）。因k＝t'R/t0，则α＝，所以α又称为相对保留时间（《美国药典》）。 离子源 质谱仪的主要组成之一，实现样品离子化的区域。由电离室、离子束的加速场、聚焦透镜等构成。它的作用是使被分析物电离，变成分子离子或碎片离子。 液-液色谱有正相和反相之分。如果采用极性固定相和相对非极性流动相，就称为正相；如果采用相对非极性固定相和极性流动相，则称为反相。由于极性化合物更容易被极性固定相所保留，所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物。相反，反相液-液色谱系统一般可用于分离非极性或弱极性化合物。另外，其他有些色谱如柱色谱也有正反相之分。 在滴定液中插入指示电极和参比电极，通过测量电池电动势在滴定过程中pH或电位的变化来确定终点的方法。如图所示。 滴定终点的确定： 于含有浓度为cx的试液加入浓度为cs的待测物X。随滴定剂的加入，X的浓度渐渐降低(c5, c4, c3, c2, c1)，这相当于在标准加入法中，在样品中加入了一系列不同体积Vs的滴定剂。 以滴定剂体积对(Vs+Vx)10E/S作图，并将直线外延至与Vs 相交于一点，该点即为滴定终点所对应的体积。 可见，Gran 作图法具有几个优点： 1）不须作出整个滴定曲线，只要作四五个点即可通过外推法确定终点； 2）可以克服当溶度积常数大或配合物稳定常数差时，滴定终点不明显、 测量误差大的缺点； 3）如果使用 Gran 作图纸，则不须进行繁杂的指数计算。 先用有机溶剂清洗，再使用稀硝酸浸泡，这是作为卡尔费休滴定传感器的铂电极的清洗方法。 测定有机物水分的时间较长后，Pt电极表面覆盖有机物膜，使得反应钝化，终点延迟，溶液都变成棕红色了，还没有到达终点，此时就需要清洗。 但是如果是精密电导电极，一般是铂黑电极，不是光亮电极，如果发生精度变差，需要从新镀铂，YSI3100， 3200电导率测定仪专有镀铂功能，并且有镀铂的溶液供应，详情请查询代理商：东南科仪。 比色皿清洗液：浓盐酸：甲醇：水＝1：4：3如果比色皿被有机物污染，宜用盐酸—乙醇(1：2)混合液浸沉，也可用相应的有机溶剂浸泡洗涤。如：油脂污染可用石油醚浸洗，铬天青显色剂污染可用硝酸(1：2)浸沉等。比色皿不可用碱液洗涤，也不能用硬布、毛刷刷洗。一个干净的比色皿装满水后，相对于空气应有表中所得到的吸光度： λ（nm） 吸光度光学玻璃皿 650 0.035石英比色皿 240 0.093在多次实验中发现，比色皿换向后误差可达4％一7％左右。所以在精确测量时；定要看准比色皿箭头标志。如无标志，可作配套捡定后按方向在毛玻璃上端作上箭头一致的标记。以避免操作时搞反。比色皿必须保持清洁和无伤痕，玻璃和石英吸收池通常可用冷酸或酒精、乙醚等有机密剂清洗。避免使用重铬酸钾洗涤液，因为它会被吸附在比色皿壁上而出现一层格化物的薄膜，这种薄膜很难除去。粘合的玻璃比色皿不能用酸或碱清洗，更要避免用热浓酸清洗，通常用蒸馏水漂洗，然后用少量溶液淌洗；比色皿外壁要用擦镜纸或软绸布小心擦干 。 梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗提。 在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析间周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。 梯度洗脱的优点：1.缩短分析周期；2.提高分离能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。 程序升温 气相色谱分析中，色谱柱的温度控制方式分为恒温和程序升温两种。 程序升温是指在气相色谱法中,在一个分析周期内,柱温随时间由低温到高温作线性或非线性的变化,以达到用最短的时间获得最佳分离的方法. 程序升温具有改进分离、使峰变窄、检测限下降及省时等优点。 因此，对于沸点范围很宽的混合物，往往采用程序升温法进行分析。 （气相色谱）老化色谱柱的方法： 新填充的色谱柱不能马上使用还需要进行老化处理。老化的目的有两个，一是为了彻底除 去填充物中的残余溶剂，和某些挥发性杂质，另一个目的是促进固定液均匀的、牢固 分布在单体的表面上。 老化的方法： ----把柱子与汽化室连接，与检测器一端要断开，以氮气为载气，流速是正常的一半即可 ，温度选择固定液的最高使用温度，老化时间大约20小时，老化完成后将仪器温度降至近 室温关闭色谱仪，待仪器温度恢复室温再将色谱柱连接到检测器上（老化时接汽化室的一 端最好接在检测器上），开机，在使用温度下看基线是否平稳，如果平稳色谱柱就算老化 好了，否则要继续老化。 气相色谱检测器： 1、氢火焰离子化检测器（FID）用于微量有机物分析 2、热导检测器（TCD）用于常量、半微量分析，有机、无机物均有响应 3、电子捕获检测器（ECD）用于有机氯农药残留分析 4、火焰光度检测器（FPD）用于有机磷、硫化物的微量分析 5、氮磷检测器（NPD）用于有机磷、含氮化合物的微量分析 6、催化燃烧检测器（CCD）用于对可燃性气体及化合物的微量分析 7、光离子化检测器（PID）用于对有毒有害物质的痕量分析   气相色谱仪 原理 样品中各组分在两相溶液中分配系数的差异（分配系数：一定温度下，处于平衡状态时，组分在固定相中的浓度与在流动相中浓度的比值） 流动相将样品带入色谱柱，固定相保留样品，由于固定相对每个样品的保留时间不同，从而实现分离 流动相 液体 气体 适用 高沸点、热稳定性不好，大分子物质检测 沸点低、热稳定性好、中小分子的检测 组成部件 输液系统，进样系统，分离系统，检测系统，数据处理系统 气路系统，进样系统，分离系统，检测系统，记录系统 分类           紫外分光光度仪原理：不同浓度的样品和显色剂反应，生成的有色物质的浓度不同，从而吸光度不同。 1.死体积：（dead Volume）,从进样到惰性气体峰出现极大值的时间称为死时间. 2.保留时间:是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间，不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间，因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。 3.分离度：相邻两峰的保留时间之差与两峰宽之和一半的比值(分离度R应大于1.5表示完全分离)R＜1表示两峰有重叠部分，R=1分离度可达98%。 4.梯度洗脱：在同一个周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比 5.液质的原理：先在离子化器带上电荷，然后被打成小的碎片，进入四级杆的电磁场，不同质荷比的碎片发生的偏转大小不同.1211 液质的组成：进样系统、离子源、质量分析器、检测接收器。 液质谱图：横坐标表示质荷比（从左至右质荷比逐渐增大），纵坐标表示离子丰度。（丰度大则表示离子结构稳定） 6.外标法是以待测成分的对照品作为对照物质，相对比较以求得供试品含量 在色谱法中，想知道被测样品浓度。可以用外标法首先用待测组分的标准样品 绘制工作曲线，测出各峰的峰高或峰面积对应的样品浓度，绘制出标准曲线。 7. 反相色谱柱受到污染时，可用异丙醇再生，异丙醇不能清洗干净，可以尝试使用二氯甲烷。异丙醇极性4.3，二氯甲烷3.4  1011 被污染的色谱柱清洗方法