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病毒感染力的滴定（TCID50的测定）实验操作步骤、计算方法

病毒感染力的滴定（TCID50的测定）实验操作步骤、计算方法病毒感染力的滴定（TCID50的测定）实验操作步骤、计算方法病毒感染力的滴定(TCID50的测定)实验操作步骤、计算方法一、实验目的了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose):用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EID50(egg 50% infective dose):用鸡胚来检测半数细胞培养物感染量TCID50(50% tissue culture infe...

病毒感染力的滴定（TCID50的测定）实验操作步骤、计算方法病毒感染力的滴定(TCID50的测定)实验操作步骤、计算方法一、实验目的了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose):用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EID50(egg 50% infective dose):用鸡胚来检测半数细胞培养物感染量TCID50(50% tissue culture infective dose):用细胞来检测蚀斑形成单位(plaque forming unit，PFU):用细胞来检测三、材料 1、长满单层的细胞1瓶 2、胰酶、吸球、吸管、生长液 3、96孔细胞培养板 4、加样器、枪头 5、病毒液(PRV) 四、TCID50的操作步骤 1、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释，从10-1-10-10。 2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中，每一稀释度接种一纵排共8 孔，每孔接种100µl。 3、在每孔加入细胞悬液100µl，使细胞量达到2~3×105个/ml。 4、设正常细胞对照，正常细胞对照作两纵排。(100µl生长液+100µl细胞悬液) 5、逐日观察并记录结果，一般需要观察5-7天。 6、结果的计算，按Reed-Muench两氏法或Karber法五、TCID50的计算方法 1、Reed-Muench两氏法 2、Karber法含义:将该病毒稀释103.875接种100µl可使50%的细胞发生病变。

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