首页 EBER检测试剂盒（原位杂交）

EBER检测试剂盒（原位杂交）

EBER检测试剂盒（原位杂交）EBER检测试剂盒（原位杂交）规格:20 人份 50 人份 S30172 S30173 产品型号: EBER检测试剂盒(原位杂交) EBER检测试剂盒(原位杂交) (操作之前请详细阅读此说明书) 检测原理和意义, EBER是EB病毒编码的小RNA，是EB病毒的表达产物，在EB病毒感染的细胞核中以高拷贝数存在。根据EBER的特有序列设计的EBER单链 DNA探针能特异地与EBER靶序列互补、杂交，从而检测EB病毒是否存在。此方法检测石蜡组织切片中的EB病毒具有极高的特异性和灵敏性。目前EBER原位杂交已...

EBER检测试剂盒（原位杂交）规格:20 人份 50 人份 S30172 S30173 产品型号: EBER检测试剂盒(原位杂交) EBER检测试剂盒(原位杂交) (操作之前请详细阅读此说明书) 检测原理和意义, EBER是EB病毒编码的小RNA，是EB病毒的表达产物，在EB病毒感染的细胞核中以高拷贝数存在。根据EBER的特有序列设计的EBER单链 DNA探针能特异地与EBER靶序列互补、杂交，从而检测EB病毒是否存在。此方法检测石蜡组织切片中的EB病毒具有极高的特异性和灵敏性。目前EBER原位杂交已成为组织和细胞中EB病毒的标准检测方法，在国际上广为使用。 , 试剂盒提供的材料和试剂提供量成份保存方法 20人份 50人份 1EBER杂交液 -20? 400ul 500ulx2 2 蛋白酶K 4? 40ul 100ul 3 一抗 4? 1ml 2.5ml 4 二抗 4? 1ml 2.5ml 5HRP聚合物 4? 1ml 2.5ml 6 DAB底物 4? 1ml 2.5ml 7 DAB 4? 20ul 50ul 8 18X18mm盖玻片 4?/室温 20片 50片 30ml 30ml 9湿盒增效液 4?/室温 (注意:EBER杂交液请 -20?保存) 1 EBER检测试剂盒 EBER检测试剂盒泰普生物TRIPLEX , 用户自备材料和试剂 1. 8. 55?恒温培养箱二甲苯 2. 9. 37?恒温培养箱酒精 3. 10. PBS (pH=7.6) 光学显微镜 4. 11. 移液器苏木素 5. 12. 计时器氨水 6. 13. 玻片染色缸和染色架盐酸酒精 7. 湿盒2个 , 实验前需配试剂 30 ,湿盒增效液取湿盒增效液及蒸馏水，按3:7配制成30%湿盒增效液备用。 , 实验时需配试剂 A、1X蛋白酶K 将蛋白酶K与1×PBS按1:25的比例配制备用。 (现配现用)B、DAB显色液依据需要配制DAB显色液，以可覆盖整个组织的量为宜。取DAB与DAB底物，按照1:50的比例混匀，避光保存备用。(现配现用) , 操作步骤 1(切片处理:将4um厚度的组织粘附在APES处理的载玻片上，切片于60-70?烘烤60分钟以上。 (建议每次实验同时附加阳性、阴性对照片) 2(脱蜡及水化: 溶液次数×时间(分) 二甲苯 3 × 10 100%酒精 1 × 3 95,酒精 1 x 3 80%酒精 1 × 3 蒸馏水 1 x 3 (注意:使用过的二甲苯，应相应延长脱蜡时间，以保证脱蜡完全) (蛋白酶K消化:甩干切片, 将组织周围液体用滤纸吸干, 每张切片滴加适量1×蛋白酶K工作液(约3 50 ul，根据组织大小增、减量), 室温孵育5分钟。蒸馏水洗涤1×1分钟，小心擦干组织周围液体。 4(杂交: 4.1 每张切片滴加适量杂交液(约20 ul，根据组织大小增、减量)，并加盖玻片(本试剂盒配备，可 2 EBER检测试剂盒 EBER检测试剂盒泰普生物TRIPLEX 根据加入杂交液量进行剪裁); 4.2 放置水湿盒中，55?恒温箱孵育60-90分钟; 4.3 转至37?孵育4-16 小时(放置于30%湿盒增效液湿盒中)。建议过夜(,16小时)以保证低拷贝样本的杂交效果; 4.4 48?(PBS 预温)浸泡切片，小心移去盖玻片，继续浸泡5分钟; 4.5 48? PBS洗涤3x 5分钟 (); 轻微振荡容器注意:盖玻片规格应与杂交液量匹配， (切片在整个试验过程中要保持湿润状态，防止干片)5(信号放大与显色: (约50 ul，根据组织大小增、减量)5.1 小心擦去组织周围液体，滴加适量一抗，37?，水湿盒中孵 (轻微振荡容器) 育30分钟;37? PBS浸泡3x2分钟; 5.2 小心擦去组织周围液体，滴加适量二抗(50 ul)，室温，水湿盒中孵育约，根据组织大小增、减量 20分钟;室温PBS浸泡3x2分钟 (轻微振荡容器); 5.3 小心擦去组织周围液体，滴加适量HRP聚合物(约50 ul，根据组织大小增、减量)，室温，水湿盒中孵育30分钟;室温PBS浸泡3x2分钟 (轻微振荡容器)。 5.4 小心擦去组织周围液体，滴加适量DAB显色液(约50 ul，根据组织大小增、减量)，室温，水湿盒中孵育约10分钟(不同样本的显色时间可能有所差别，建议镜下观察显色过程);室温PBS 浸泡3x2分钟 (轻微振荡容器)。 5.5 自来水冲洗，苏木精复染(可用盐酸酒精分化及氨水返蓝)。梯度酒精脱水，中性树胶封片。 , 阳性结果判断标准:仅为细胞核着色。胞浆和胞膜着色不能视为阳性，只有当核分裂时可以出现胞浆阳性着色。其他事项: , 本试剂保质期为12个月。客户在收到产品时请及时检查，如发现有外包装破损、试剂盒成分不全等产品问题，或者在使用过程中有任何疑问，请及时与泰普客户服务中心联系，我们将及时为您解决。公司信息: , 公司名称:福建泰普生物科学有限公司总部:福建省福州市金山金洲北路7号金山科技企业孵化器7号楼4层邮编:350002 电话:800-804-8333，0591-2805 3600 传真:0591-2805 3700 研发中心:北京市昌平区北清路中关村生命科学园创新大厦A座207室邮编:102206 电话:010-8072 0071 传真:010-8072 0072 3 EBER检测试剂盒 EBER检测试剂盒泰普生物TRIPLEX 4 EBER检测试剂盒 EBER检测试剂盒泰普生物TRIPLEX 操作步骤简表 , 操作参数 1 二甲苯 3X10’ 2 100%酒精 1X3’ 3 95%酒精 1X3’ 4 80%酒精 1X3’ 5 蒸馏水 1X3’ 6 酶消化室温,5’ 7 蒸馏水 1’ 8 加杂交液适量 9 55?变性 60’-90’ 1030,湿盒增效液的湿盒中孵育 37?，4-16h 1-5+5 11 PBS(用前48?预温)脱片，浸泡 ’’ 3X5 12 PBS(用前48?预温)浸泡 ’13 加一抗 37?，30’ 14 PBS(37?)浸泡冲洗 3X2’ 15 加二抗室温，20’ 16 PBS 浸泡冲洗 3X2’ 17 HRP 聚合物室温，30’ 18PBS浸泡冲洗 3X2’ 19DAB显色室温，2-10' 20 PBS 浸泡 3X2’ 21自来水冲洗 1’ 22 复染，脱水，封片常规 5 EBER检测试剂盒 EBER检测试剂盒泰普生物TRIPLEX 6

                    本文档为【EBER检测试剂盒（原位杂交）】，请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑，
                    图片更改请在作品中右键图片并更换，文字修改请直接点击文字进行修改，也可以新增和删除文档中的内容。 
 该文档来自用户分享，如有侵权行为请发邮件ishare@vip.sina.com联系网站客服，我们会及时删除。

                    [版权声明] 本站所有资料为用户分享产生，若发现您的权利被侵害，请联系客服邮件isharekefu@iask.cn，我们尽快处理。

                    本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权，请谨慎使用。

                    网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传，仅限个人学习分享使用，禁止用于任何广告和商用目的。
                

下载需要：免费已有0 人下载

立即下载

EBER检测试剂盒（原位杂交）

你可能还喜欢