抗核抗体检测及临床意义LLL自身抗体定义自身抗体是指针对自身组织，器官、细胞及细胞成分的抗体。正常的免疫反应有保护性防御作用，对自身组织、成分不发生反应。—旦自身耐受的完整性遭到破坏，则机体视自身组织、成分为“异物”，而发生自身免疫反应，产生自身抗体。正常人体血液中可以有低滴度的自身抗体，但不会发生疾病，但如果自身抗体的滴度超过某—水平，就可能对身体产生损伤，诱发疾病。第一页，共24页。自身免疫性疾病相关自身抗体抗核抗体谱（ANAs）类风湿关节炎相关抗体(RF,抗CCP等)抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）抗自身免疫性肌炎谱自身免疫性肝病相关抗...
自身抗体定义自身抗体是指针对自身组织，器官、细胞及细胞成分的抗体。正常的免疫反应有保护性防御作用，对自身组织、成分不发生反应。—旦自身耐受的完整性遭到破坏，则机体视自身组织、成分为“异物”，而发生自身免疫反应，产生自身抗体。正常人体血液中可以有低滴度的自身抗体，但不会发生疾病，但如果自身抗体的滴度超过某—水平，就可能对身体产生损伤，诱发疾病。第一页，共24页。自身免疫性疾病相关自身抗体抗核抗体谱（ANAs）类风湿关节炎相关抗体(RF,抗CCP等)抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）抗自身免疫性肌炎谱自身免疫性肝病相关抗体谱抗磷脂抗体谱第二页，共24页。抗核抗体谱（ANAs）ANAs抗核不溶成分抗核可溶成分（抗ENA）抗染色体DNA蛋白抗核仁抗体抗DNA抗体抗核小体抗体抗组蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4抗Sm,U1RNP,SSA,SSB抗Scl-70,Jo-1,PM-1抗rRNP,PCNA…….dsDNAssDNA抗着丝点抗体（ACA)抗5sRNA第三页，共24页。ANA是一类能与多种细胞核抗原反应的自身抗体，许多自身免疫性疾病都可以出现阳性。如系统性红斑性狼疮(SLE)、混合结缔组织病（MTCD）、干燥症(SS）、全身性硬皮症(PSS）。ANA测定在许多胶原病病人均可呈阳性，需进一步作抗DNA抗体和抗ENA抗体测定鉴别。抗核抗体(ANA)第四页，共24页。抗双链DNA抗体（抗ds-DNA抗体）脱氧核糖核酸分为双链DNA（dsDNA）和单链DNA（ssDNA）两种。 针对前者的自身抗体为系统性红斑狼疮的标记性抗体，而后者则见于多种风湿性疾病。第五页，共24页。抗核提取物抗体，是抗小分子细胞核核糖核蛋白（snRNPs）和小分子细胞浆核糖核蛋白（scRNPs）的自身抗体，不含组蛋白。包括：抗nRNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体等。对诊断和鉴别诊断有重要意义，与疾病严重程度和活动性无明显相关。抗ENA抗体第六页，共24页。抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）靶抗原为丝氨酸蛋白酶PR3、MPO等，是系统性血管炎的血清标记物。ANCA主要表现两种核型：①胞浆型（c-ANCA）：主要与韦格氏肉芽肿血管炎有关；②核周型（p-ANCA）主要见于血管炎、Churg-Strass综合症和少免疫沉积型节段坏死性肾小球肾炎和新月体肾炎。第七页，共24页。ANA检测方法-IIF法ANA滴度ANA核型第八页，共24页。荧光显微镜下ANA的染色型别均质型颗粒型核膜型核仁型着丝点型胞浆型混合型等第九页，共24页。核均质型第十页，共24页。核粗颗粒型HEp-2：间期细胞核呈颗粒样荧光，核仁阴性；分裂期细胞浓缩染色体阴性，染色体周围呈颗粒样荧光肝片：肝细胞核呈颗粒样荧光。核仁阴性；荧光强度与HEp-2基本一致靶抗原：nRNP、Sm第十一页，共24页。核膜型第十二页，共24页。抗dsDNA检测方法以短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法(IIF)短膜虫或马疫锥虫的动基体内含有天然纯dsDNA，未经人工处理，不含组蛋白与ssDNA，抗原性纯一特异。优点：特异性好第十三页，共24页。抗dsDNA抗体临床意义SLE的血清特异性抗体多有致病性（IgG型），与亲和力（高）有关与LN（狼疮肾炎）和SLE疾病活动性相关，活动期达90％可用于SLE疾病活动期判断＆药物疗效观察与SLE急性皮疹、血管炎、浆膜腔炎、白细胞减少等有关第十四页，共24页。抗ENA抗体extractablenuclearantigen可提取性核抗原成分：核酸与核蛋白，不含染色质成分功能：参与细胞内DNA复制、RNA转录、蛋白翻译合成来源：无种属差异，有组织不均一性理化特性：对温度和RNA酶敏感（U1RNP、SS-A）意义：抗ENA抗体是ANAs中范围最广、最为重要的一簇抗体，与疾病活动性大多无相关第十五页，共24页。抗ENA抗体检测方法免疫双扩散法(ID)对流免疫电泳法(CIE)免疫印迹法(IBT)酶联免疫吸附法(ELISA)蛋白芯片（Proteinchip）第十六页，共24页。抗RNP抗体高达50%的SLE病人和95%的MCTD病人血清中可检测到此抗体，典型的MCTD病人血清中可检测到高滴度的针对Sm/RNP免疫复合物的抗-RNP抗体，而往往检测不到抗-Sm抗体。第十七页，共24页。抗Sm抗体30%的SLE病人可检测到抗-Sm抗体，在肾炎病人和某些中枢神经严重损伤的病人也可检测到。第十八页，共24页。抗SSA抗体在SLE、风湿性关节炎（RA）、干燥综合症病人血清中常常可以检测到SS-A抗体，此外在硬皮病、新生儿红斑性狼疮（NLE）病人也可检测到。第十九页，共24页。抗SSB抗体在SLE、风湿性关节炎(RA）、干燥综合症病人血清中常常可以检测到SS-B抗体，在硬皮病、新生儿红斑性狼疮（NLE）病人也可检测到。SS-B抗体一般与SS-A抗体同时出现。若病人血清中可检测到SS-A抗体而不伴有SS-B抗体的出现，此病人继发肾炎的风险较大。第二十页，共24页。第二十一页，共24页。第二十二页，共24页。抗Jo-1抗体20-30%的多发性肌炎/皮肌炎，30-40%的多发性肌炎患者和高达60%的多发性肌炎伴有间质性肺疾病患者血清中可检测到抗-Jo-1抗体。其它胶原性疾病中很少检出此抗体。第二十三页，共24页。抗ScL-70抗体靶抗原：DNA拓朴异构酶I的降解产物主要存在核仁中40%的硬皮病和20-30%的全身性硬皮病患者中可检测到此抗体，很少在其它自身风湿性疾病中出现。第二十四页，共24页。
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