植物水溶性总糖的提取和含量测定蒽酮比色法
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1.掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。
2.学习植物可溶性糖的一种提取方法。
3.学习分光光度计的使用。
糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮
(CHO)脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色。该物质在620 nm处有最大1410
吸收，在150 µg/mL范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
这一方法有很高的灵敏度，糖含量在30 µg左右就能进行测定，所以可做为
微量测糖之用。一般样品少的情况下，采用这一方法比较适合。
1.电子天平，超声波清洗器，电热恒温水浴锅，抽滤设备，分光光度
计，容量瓶，刻度吸管等
2.：
(1)葡萄糖MATCH_
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_1713512527659_0液：l00 µg/mL
(2)浓硫酸
(3)蒽酮试剂：0.2 g蒽酮溶于100 mL浓 H
SO中。当日配制使用。 24
3.：甜高粱，甘草
1.
取7支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：
1 2 3 4 5 6 7 管号
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.6 0.8 葡萄糖标准液（mL）
1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.4 0.2 蒸馏水（mL）
0 10 20 30 40 60 80 葡萄糖含量（µg）
在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0mL，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完
后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。自水浴沸腾起计时，准确煮沸l0 min，
1
取出，用冰浴冷却至室温，在620 nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管
吸光值。以标准葡萄糖含量（µg）为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。
2.将样品粉碎，105 ºC烘干至恒重，精确称取
1~5 g，置于50mL三角瓶中，加沸水25mL，加盖，超声提取10 min，冷却后过滤（抽滤），残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤（抽滤），滤液收集在50mL容量瓶中，定容至刻度，得可溶性糖的提取液。
3.吸取提取液2mL，置于另一50mL容量瓶中，以蒸馏水定容，摇匀。
4.吸取1 mL已稀释的提取液于试管中，加入4.0 mL蒽酮试剂，平行三份；空白管以等量蒸馏水替代提取液。以下操作同标准曲线制作。根据A
620平均值在标准曲线上查出葡萄糖的含量（µg）。
C × V × D
样品含糖量（%）= ????????????? × 100%
W × V × 106
其中：C——在标准曲线上查出的糖含量（µg），
V——提取液总体积（mL），
V——测定时取用体积（mL），
D——稀释倍数，
W——样品重量（g），
610——样品重量单位由g换算成µg的倍数
1.该显色反应非常灵敏，溶液中切勿混入纸屑及尘埃。
2.HSO要用高纯度的。 24
3.不同糖类与蒽酮的显色有差异，稳定性也不同。加热、比色时间应严格掌
握。
1.用水提取的糖类有哪些？
2.制作标准曲线时应注意哪些问题？
2
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