染色体分析在骨髓增殖性疾病诊断及治疗中的应用

染色体分析在骨髓增殖性疾病诊断及治疗中的应用 染色体分析在骨髓增殖性疾病诊断及治疗 中的应用 益量堕芏查生旦笙鲞笙塑!!!!!!!!:!. doi:10.3969/j.issn.10080341.2010.05.011 染色体分析在骨髓增殖性疾病诊断及治疗中的应用 李波.吴春梅,管洪在.李萍 (1青岛大学医学院血液病学教研室,山东青岛266071;2青岛大学医学院附属医院) [摘要]目的探讨染色体分析对骨髓增殖性疾病(MPD)分类,诊断及疗效判断的临床意义.方法收集 MPD病人骨髓,采用R显带技术,检测染色体核型,并对部分病人进行动态观察.结果159例MPD病人中染色 体异常的检出率为69.18,其中122例慢性粒细胞白血病(CML)病人中,染色体异常的检出率为85.25(104/ 122),37例初诊为其他类型的MPD病人中,染色体异常的检出率为16.22(6/37).CMI慢性期病人出现额外 染色体异常的比例为14.42,加速期和急变期的比例为61.11,两者比较差异有显着意义(.一15.228,P< 0.01).CML病人应用伊马替尼治疗与骨髓移植治疗后Ph染色体转阴率没有明显差异.结论染色体分析对 MPD的分型,诊断及疗效判断具有重要意义;额外染色体异常的出现与CML病人的病程进展密切相关. ;伊马替尼 [关键词]骨髓增殖性疾病;染色体显带 [中图分类号]R733.71[文献 标志 禁止坐卧标志下载饮用水保护区标志下载桥隧标志图下载上坡路安全标志下载地理标志专用标志下载 码]A[文章编号]1008—0341(2010)05—040503 APPLICATIoNoFCHROMOS0MEANALYSISINTHEDIAGNOSISANDTREATME NTOFMYELOPROLIFERATlVEDISOR— DERLIB0,?UCHUNMEI,GUANHONO-ZAI,etal(DepartmentofHematology,QingdaoUniversity MedicalCollege, Qingdao266071,China) [ABSTRACT]ObjectiveToinvestigatetheclinicalsignificanceofchromosomeanalysisinclassification,diagnosisandas— sessmentofcurativeeffectofmyelopro1iferativedisorder(MPD).MethodsBonemarrowofpatientswithMPDwascollected, andthecaryotypedetectedbyR— banding,anddynamicobservationcarriedoutinsomepatients.ResultsOf159MPDpatients, thedetectionrateofchromosomalabnormalitywas69.18,whichwas85.25%(104/122)in122casesofchronicmyelogenous leukemia(CML);in37patientswithothertypesofMPD,thedetectionratebeing16.22(6/37).Therateofextrachromo— somewasfoundin4.42ofCMIpatientsatchronicphase,and61.11%atacceleratedandacutetransformationphase,thediffer— encebetweenthepatientsoftwophaseswassignificant(X=15.228,P%0.01).Phchromosomenegativeratewasnotchanged muchinCMLpatientsafterGleevectherapyandbonemarrowtransp1antati0n.ConclusionChromosomeanalysisisofimportant significanceingroupng,diagnosing,andestimatingtherapeuticeffectofMPDtheappearanceofabnormalityofextrachromosome iscloselyrelatedwiththecourseofCML. [KEYWORDS~myel0pr.Hferativedisorder;chromosomebanding;imatinib 骨髓增殖性疾病(MPD)是一组多能造血干细 胞的克隆性疾病,表现为一种或几种血细胞质和量 的异常,其发病原因尚不明确.1951年,美国血液 学家WILLIAM首次提出"骨髓增生性疾病"的概 念.2001年,MPD被世界卫生组织(WHO)列为慢 性骨髓肿瘤之一,包括慢性粒细胞白血病(CMI), 真性红细胞增多症,原发性血小板增多症,原发性骨 髓纤维化,慢性中性粒细胞白血病,慢性嗜酸性细胞 白血病以及MPD未分类型.仅仅依靠常规的血液 学及骨髓细胞形态学检查不能对此类疾病进行详细 分类和正确诊断,对疾病的进展及预后也无法提供 有价值的评估.本实验将探讨染色体分析在临床 MPD的分类,诊断及疗效判断中的应用价值. 1资料与方法 [收稿日期]2010—04—13;[修订日期]2O10-06—02 [作者简介]李波(1983),男,在读硕士研究生. [通讯作者]吴春梅(1966一),女,副教授,硕士生导师.E—mail wuchunmeicindy@163.com. 1.1一般资料 2006年1月一2O09年12月,我院血液科共诊 治MPD病人159例,男85例,女74例;年龄3480 岁,中位年龄47岁.其中CML病人122例,包括 慢性期CML(CML—CP)104例,加速期和急变期 CML(cML—AP和CML—BP)18例;其他各类MPD 共37例.所有病例的诊断和疗效判定均参照《血液 病诊断及疗效标准》_】]. 1.2染色体制备与核型分析 用肝素抗凝注射器采集病人骨髓液约2mL,以 无菌操作按10.,1O/L的细胞数接种到5mL的 PRMI1640培养瓶中,置37?孵箱培养24h;加入 秋水仙酰胺,阻留中期分裂细胞.经低渗,预固定, 固定等步骤,制备细胞悬液;将细胞悬液滴片,采用 改良的R显带(RHG)法显带后,用吉姆萨液染色; 在显微镜下分析10,20个分裂中期细胞,观察有无 Ph染色体或其他核型异常.依据《人类细胞遗传学 国际命名体制(IscN)1995》进行核型描述. 齐鲁医学杂志2010年1O月第25卷第5期MedJQilu,October2O10,Vo1.25,No.5 1.3统计学处理 实验结果经SPSS11.5软件进行统计学分 析,数据问比较采用卡方检验及精确概率法检验. 2结果 2.1MPD病人染色体异常的检出率 本文159例MPD病人中,染色体异常的检出 率为69.189/6(110/159),其中Ph染色体阳性(Ph (+))病人占62.89%(1oo/159),其他染色体异常 病人占6.29(10/159).本文122例临床诊断为 CML的病人中,染色体异常的检出率为85.25 (104/122),其中Ph(+)占79.51(97/1%),其他 染色体异常占5.74%(7/122~.37例临床诊断为其 他类型MPD的病人中,染色体异常的检出率为 16.22(6/37),其中Ph(十)病人占8.11(3/ 37),其他染色体异常占8.?(3/37). 2.2Ph(+)MPD病人的染色体分析 1O0例MPD病人检出Ph(+),属于Ph(+) MPD,即CML.其中,69为典型Ph染色体易位, 即t(9;22)(q34;ql1),4为变异型Ph染色体,核 型分别为t(13;22)(q33;ql1),t(9;22;18)(q34; q11;q21),t(8;22)(q24;ql1),der(22)t(?;22)(?; q11).26的病人除Ph(+)外还伴有染色体数目 和(或)其他结构异常,且慢性期病人伴有额外染色 体异常的检出率为14.42(15/lO4),加速期和急 变期的检出率为61.11(11/18),两者比较差异具 有显着性(一15.228,P<0.01). 2.3采用伊马替尼或骨髓移植治疗CML后的染 色体变化分析 动态分析l2例服用伊马替尼治疗的Ph(+) CML病人的染色体变化.用药3,36个月后,10 例病人均不能检出Ph(4-)细胞,达到了完全遗传学 缓解(CCyR),其中1例CML—CP病人用药时间为1 个月时,其Ph(+)细胞仍占100,3个月时转阴;1 例用药时间为2个月时Ph(+)细胞占30,5个月 时转阴;1例急变期病人用药6个月后其Ph(+)细 胞占70%;1例加速期病人用药12个月后Ph(+) 细胞占60,达到部分遗传学缓解(PCyR).6例 Ph(+)CML病人采用异基因骨髓移植进行治疗, 移植后2,36个月,分别检测病人的染色体,5例转 为供者的核型,1例于移植后2,4个月进行染色体 分析,Ph(+)细胞检出率依次为60,80,90, 表明病人的恶性克隆依然存在,移植没有成功.Ph (+)CMI病人应用伊马替尼与骨髓移植治疗后, Ph染色体转阳率分别为83.3,83.3,两组Ph 染色体转阴率比较没有明显差异(P>O.05). 3讨论 WHO(2008)最新分类标准已将骨髓增殖性疾 病重新命名为骨髓增殖性肿瘤(MPN),将疾病改为 肿瘤,强调了其肿瘤的性质,提高了对其的重视程 度.新标准中指出,9O,95的CML病人Ph染 色体或bcr—abl融合基因阳性.国内外文献也报道, CML病人中Ph(+)的检出率在9O以上_3],而本 文结果仅为85.25,较之为低.究其原因,一方 面,可能与病例数少有关;另一方面,对于Ph(一) CML可进一步分为Ph(一)bcr—abl(+)和Ph(一) bcr-abl(一),前者仍属于Ph(+)CML,后者可能并 非真正的CML,而是不典型的其他骨髓增殖性疾 病.WHO新标准中也指出,其他类型的MPD,具 有Ph(一)且bcr—abl(一),但并无特征性的染色体 变化.我们对37例临床诊断为MPD的病人进行 染色体分析,3例检出Ph(+),确诊为CML,其余 未见有特征性改变,与其结果相符.可见染色体核 型分析对于MPD的准确分型具有重要的临床意 义.大量资料证明,CML病人除Ph(+)外,又出现 其他染色体异常,常常预示着疾病向AP及BP发 展.本文Ph(+)CMI一CP病人的其他染色体异常 检出率为14.42,CML—AP和CML—BP病人的检 出率为61.11,两者比较差异有显着意义.杨颉 等[6研究显示,部分病人检出额外染色体异常时,临 床上尚无急变征象,核型演变往往和急变同时或更 早发生.因此,监测CML病程中的染色体核型改 变有预测病情进展及判断预后的价值. CMI是一种获得性干细胞克隆性疾病,其经典 病例具有特征性的Ph染色体和bcr-abl融合基因, 目前公认的治愈方法为异基因骨髓移植.近年来, 伊马替尼治疗慢性粒细胞性白血病开创了肿瘤靶向 治疗的新时代.伊马替尼选择性地抑制细胞增殖, 并且能抑制Ph(+)细胞合成bcr—abl酪氨酸激酶. 同时,伊马替尼也作用于具有酪氨酸激酶活性的血 小板衍生生长因子受体和原癌基因].本文研究 结果显示,骨髓移植与伊马替尼对CML治疗的有 效率无明显差异.与WANG等的研究结果相 符.WANG等对615例CML病人随访调查结 果显示,伊马替尼组的3年和5年的总体生存率 (0S)和无进展生存期(PFS)均比骨髓移植组高. 由于时间有限,我们未作统计.(下转第409页) 齐鲁医学杂志2O10年1O月第25卷第5期MedJQilu,October2010,Vo1.25,No.5 脂酰肌醇3激酶一Akt信号转导通路等发挥神经保 护作用_9].本文研究结果显示,应用神经调节素后, C0X一2mRNA及其蛋白的表达变化规律与对照组 相似,但其表达数量明显减少,同一时间点相比,差 异均有显着性,说明神经调节素能够减少MCAO—R 后脑组织中COX一2mRNA及其蛋白的表达.因 此,我们推断神经调节素对缺血神经元的保护作用 还可通过选择性地抑制COX一2的表达这一途径来 实现,其具体作用机制有待进一步研究. [1] [2] [3] [参考文献] NOGAWAS,ZHANGF,ROSSME,eta1.Cyclo—oxygen ase2geneexpressioninneuronscontributestoischemicbrain damage[J].JNeurosci,1997,17(8):2746-2755. XUZ,FORDGD,CROSIANDR,eta1.NeuroDr0tection byneuregulin——1followingfocalstrokeisassociatedwiththeat—— tenuationofischemia——inducedpro——inflammatoryandstressgene expression[J].NeurobiolDis,2005,19(3):461-47O. 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