触酶试验时间:2021.03.06创作:欧阳道虑理:触酶又称过氧化氢酶,具有过氧化氢酶的细苗,能催化过氧化氢成为水和原子态氧,继而形成氧分子,出现毛逸。方廉:取洁净玻片1張,用接种环挑取细茵,加3%H2O21譎,立即观疼结果。结果:若立即出现大量毛逸为阳性。无毛泡为阴性。应用:大多需氧和兼性厌氧茵均产生过氣化氢酶,但链球蔺科阴性,玫帝用此试验来荃定。此外,金氏.杆苗属的细蔺也为阴性。分枝杆前的鉴别则用时热触酶试验,结核分枝杆苗为阴性,戈无分枝杆苗和地分枝杆茵为阳性O注意事项:①3%H2O2嫁液要新鮮配制。②不宜用血琼脂平板上生长的苗隊,因红细胞含有触酶,可致假阳性反应。③取对数生长期的细茵。氧化醉试殓fl)原理:氧化酶(细胞色素氧化酶丿是细胞色素呼吸酶糸统的最终呼吸酶。(2)试利:1%盐酸叨甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。(3丿方出:帝用
方法
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有三种;1丿蔺掠出:直接譎加试別于彼检苗茵隊上。2)滤绒法:取洁净滤纨一小块,诂取苗少许,然后加试4剂o3丿试利纨片法:将滤纨片浸逸于试刘中制成试利纨片,取蔺涂于试利绒上。C4J结果:细蔺往与试利接融10秒内呈深紫色,为阳性。为保证结果的准确性,分别以铜绿假单胞蔺和大肠埃希茵作为阳性和阴性对照。(5)应用:主要用于肠杆苗科细茵与假单胞苗的荃别,前者为阴性,后者为阳性。秦瑟蔺属、莫拉苗属细茵也呈阳性反应。2.3耐酸性染色法(萎-俛二氐法)2.3.1石炭酸%红染色液喊性%红0.3g95%乙醉10mL5%酚水涿液90mL将%红滚解于乙醇中,然后与酚嫁液混合。2.3.23%盐酸一乙醉浓盐酸3mL95%乙醇97mL2.3.3复染液吕氏碱性美蓝染色液。美蓝0.3g;95%乙醇30mL;0.01%氢氧化钾徐液100mL;将美蓝溶解于乙醸中,然后与氢氧化钾涿液混合。234染色法2.3.4.1将•涂片在犬焰上加热厲加石炭酸%红染色液,徐徐加热至有蒸毛出现,但切不可使沸腾。染液如因蒸发减夕时,应随时添加。染5min,倾去染液,水洗。2.342满加盐酸-乙醇脱色,直至无红色脱彖为止(所需时问视涂片厚薄而定,一般为1〜3min),水洗。2.343厲加吕兔喊性美蓝染色液,复染30s〜lmin,水冼,待干,镜检。2.3.5结果:耐酸性细蔺呈红色,其他细前、细胞等扬质呈蓝色。抗畛杂色一般步線D初繚用玻片夹夹持涂片栋本,满加石炭酸复红2-3满,柱火焰嵩处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3・5分钟,待榇本冷却后用水冲冼。2)脱色3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。3丿O用喊性美兰嫁液复染1分钟,用水冲洗后用吸水绒吸干。笨酚、美蓝、盐酸四甲基对笨二胺或盐酸二甲基对笨二胺、玖氧水时间:2021.03.06创作:欧阳道