抗生素类药物的分析 (2)

第十一章抗生素类药物的分析AnalysisofAntibioticsDrugHistoryofAntibiotics~1495EuropeansMercury------>syphilis（梅毒）ChineseMoldysoybeancurd----->boils烫伤AmericanIndiansChewedbarkofcinchonatree---->malarialfever（疟疾）  ~1630EuropeansQuinine(barkofcinchona)----->malaria1877LouisPasteurInhibitionofsomemicrobesbyothers1908GelmoSynthesizedsulfanilamide磺胺(1stsulfonamide) 1908-10PaulEhrlichSelectivestains;Synthesizedarseniccompoundarsphenamine;(NobelPrize)("606",Salvarsan)----->syphilis(T.pallidum);Coinedterms"magicbullet,""chemotherapy,""chemicalknife);1928/9AlexanderFlemingInhibitionofS.aureuscoloniesbymoldPenicilliumnotatum;(NobelPrize)Discovered"miracledrug"penicillin1939G.DomagkTherapeuticvalueofsulfonamides(磺胺);(NobelPrize)Streptococcusandbroadrangeantimicrobialactivities  1944/5SelmanWaksmanIsolatedstreptomycin（氯霉素）fromStreptomycesgriseus(soilmicrobes);(NobelPrize)Proposedterm"antibiotic"=chemicalcompoundmadebyamicroorganismthatinhibitsorkillsothermicroorganismsatlowconcentrations1945Florey&ChainReinvestigated,isolatedandcharacterizedpenicillin;(NobelPrize)DemonstratedpracticalclinicalvalueasbettermeanstopreventdeathfrominfectionofwarwoundsAsporethatdriftedintohislabandtookrootonaculturedishstartedachainofeventsthatalteredforeverthetreatmentofbacterialinfections(AlexanderFleming,NobelPrizewinner)Today,thepenicillinclassofantimicrobials isacornerstoneofantibiotictherapy,andpenicillinanditsderivativesaresomeofthemanybroad-spectrumdrugsavailableforphysiciansandotherstoprescribe.青霉素类抗生素抗菌作用：革兰阳性菌：链球菌、葡萄球菌、破伤风、白喉、肺炎球菌、炭疽、消化链球菌；革兰阴性球菌：脑膜炎球菌；淋球菌嗜血杆菌属：百日咳杆菌、流感杆菌；其它：螺旋体。作用机理：干扰细菌细胞壁的合成。不良反应：毒性反应，变态反应，赫氏反应，二重感染。头孢菌素类优点：抗菌作用强，耐青霉素酶，临床疗效高，毒性低，过敏反应较青霉素少见。第一节概述抗生素的定义“antibiotics”originatedfrom“anti”and“bio”抗生素是指在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。抗生素的来源1.生物合成（发酵）2.化学合成或半合成特点：1.化学纯度较低（三多）2.活性组分易发生变异3.稳定性差发酵液中杂质无机盐、脂肪、各种蛋白质、各种降解产物、色素、热原、毒性物质[鉴别试验]1.官能团的显色反应2.光谱法3.色谱法4.生物学法除有关物质外，增加异常毒性、细菌内毒素、热原、降压物质、无菌、聚合物[检查]含量测定 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 （一）生物学方法（根据量反应平行线原理 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 ）当抗生素在菌层培养基中扩散时，会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度，即扩散中心浓度高而边缘浓度低。因此，当抗生素浓度达到或高于MIC（最低抑制浓度）时，试验菌就被抑制而不能繁殖，从而呈现透明的抑菌圈。根据扩散定律的推导，抗生素总量的对数值与抑菌圈直径的平方成线性关系。测定抗生素抑菌或杀菌的能力优点1、与临床效果一致2、灵敏度高3、干扰物质少缺点1、操作繁琐2、培养时间长2、测定误差大（二）化学及物理化学方法根据抗生素的分子结构特点，利用其特有的化学或物理化学性质。UV以理化方法测定主药含量优点1.准确度高。2.简单、快速。1.不一定代 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 生物效价。缺点2.易受杂质干扰。抗生素活性表示方法效价单位即指每毫升或每毫克中含有某种抗生素的有效成分的多少。用u表示例如1mg青霉素钠为1670u1mg庆大霉素为590u抗生素的分类（按结构与性质）：β–内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类林可霉素类、其他抗生素类第二节β–内酰胺类抗生素青霉素类头孢菌素类酸性结构与性质一、Na与碱金属(Na+、K+)成盐（一）羧基易溶于水与有机碱(普鲁卡因)成盐难溶于水普鲁卡因青霉素（二）手性C(5%头孢唑啉钠溶液–18～–24°)头孢菌素类C6C7青霉素类C3C5C6旋光性﹡﹡﹡﹡﹡（三）共轭体系头孢菌素类母核有共轭体系青霉素类母核无明显UV多数有苯环取代基UV青霉素钠UV7-20（四）β–内酰胺环水溶液不稳定不稳定性因素四元环张力大酰胺键易水解（某些金属离子）（温度）某些氧化剂二、K+、Na+反应（一）鉴别焰色→鲜黄色+醋酸氧铀锌→↓黄Na+焰色→紫色+0.1%四苯硼钠+Ac→↓白K+（二）呈色反应1.羟肟酸铁反应β-内酰胺类NaOH呈色Fe3+/3H+2、与H2SO4-HNO3反应头孢菌素类3.茚三酮反应△α-氨基（三）沉淀反应1.遇酸→↓在过量HCl或有机溶剂中溶解2.有机胺盐反应（1）重氮化-偶合反应重氮化-偶合反应芳伯氨基(四)色谱法HPLC比较供试品和对照品的保留时间(t)是否一致。TLC比较供试品和对照品的Rf值是否一致。（五）光谱法1.IR2.UVIR法β-内酰胺环酰胺三、特殊杂质的检查抗生素的特殊杂质主要有高分子聚合物，有关物质，异构体等。（一）聚合物即药物中高分子杂质，分子量一般在1000～5000，个别可至10000。是β–内酰胺类药物过敏反应的主要原因。来源：外源性和内源性，前者包括蛋白，多肽等，后者指药物本身的聚合物。方法：HPLC法例：头孢他啶中头孢他啶聚合物的测定色谱柱：葡聚糖凝胶G－10为填充剂的色谱柱检测波长：254nm对照品溶液：头孢他啶外标法：头孢他啶聚合物以头孢他啶计算不得超过0.3％（二）有关物质例：头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查HPLC自身对照法步骤一：头孢呋辛酯异构体的制备步骤二：供试品溶液的制备步骤三：对照品溶液的制备（供试品溶液稀释100倍）步骤四：HPLC测定步骤五：根据标准比较色谱峰面积是否超过规定三、含量测定(一)高效液相色谱法（HPLC）特点：能有效分离供试品中可能存在的降解产物、未除尽的原料及中间体等杂质。示例：头孢克洛的测定(外标法)色谱条件：色谱柱：ODS流动相：磷酸二氢钾溶液（pH3.4）－乙腈（92：8）检测波长：254nm对照品供试品第三节氨基糖苷类抗生素链霉素双氢链霉素新霉素卡那霉素庆大霉素巴龙霉素链霉素链霉胍+链霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺苷元糖链霉双糖胺一、结构与性质碱性水溶性抗生素多与硫酸成盐链霉素3个庆大霉素5个碱性中心溶解度与碱性（一）旋光性：（二）链霉素pH5～7.5庆大霉素pH2～12稳定UV（三）稳定性（四）链霉素水解产物反应（五）链霉素在230nm有吸收二、鉴别茚三酮反应（一）△羟基胺结构（二）Molisch试验糖的性质氨基糖苷类（羟甲基糠醛）麦芽酚反应（四）链霉糖特有反应H+分子重排UV法（五）IR法（六）庆大霉素无UV吸收（七）色谱法：TLC：多以硅胶为薄层板，氯仿－甲醇－浓氨水为展开剂，茚三酮或碘蒸汽为显色剂HPLC含量测定本类抗生素的效价测定目前各国主要采用微生物检定法,HPLC法。由于此类抗生素多无紫外吸收，不能直接用紫外检测器，多采用柱前衍生化法（如茚三酮）。