【精品】自然地理实验幻灯片

自然地理实验秒杀三视图中求椎体表面积的小公式秒杀三视图中求椎体表面积的小公式PAGEPAGE2秒杀三视图中求椎体表面积的小公式秒杀三视图中求锥体表面积的小公式???今天再给大家讲一个三视图中一个求锥体表面积的神奇小结论,还是不需要将三视图还原成立体几何体,而是直接利用三个试图就可求出表面积.当然,这个结论要比求体积的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 含金量高很多,求表面积相对求体积的问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 难度系数要高.因为在求立体几何体的侧面积的时候,往往需要把每个侧面的高都求出来,而运算量就相应的加大了.???前面在说三视图规律的时候曾总结了一个这样的结论:如果三视图中有两个视图都为三角形(只看外部的轮廓线,不管内部的虚线或实线),那么这个空间立体几何一定为锥体.锥体的表面积需要求出各侧面的面积,侧面积之和即为立体几何体的侧面积,而侧面之和再加上底面面积即为表面积.当然底面积特别好求,一般就为俯视图的面积,主要是侧面积,往往需要将三视图还原然后做各个侧面的高,然后求出面积,过程复杂且繁琐，不在需要还原三视图,直接通过平面几何即可求出各个侧面,请同学们记住下面的这个公式:这里的L表示俯视图中三边的边长,h表示三个视图中各视图的高,L和h通过试图一眼就可以看出,要注意这里的d,它表示的是锥体顶点在底面的射影到俯视图中各边的距离.下面以几道真题带领大家掌握这个公式.神奇小公式解法:第一步:利用三个视图各边的关系(长对正,高平齐,宽相等)将俯视图中各边的边长都找出来,有的题里俯视图的三边都是已知的;第二步:找出各三个视图的高第三步:找出顶点在底面的射影到俯视图中各边的距离d.前面两步是直接就可看出来的,这里唯一有一个地方需要手动算得就是d,当然这里也是特别容易的,好了以上面的例题为例来讲解一下如何运用,为了方便起见,我在这里列了一个表格.(同学们在草稿纸上是可以直接写的,分别把对应一组L,h,d标出来,然后求侧面积).这里的L分别为5,4,,然后是各视图的高都为4,最后是d,d表示的是顶点在底面射影到俯视图个边的距离,当然顶点在底面的射影是一目了然的,直接就是俯视图中边长为5边上的那个分界点.我们知道三个视图中往往正视图下面就是俯视图,所以顶点在底面的射影很明显,那好了,针对这道题里的d,射影到边长为5的距离为0,到边长为4的距离是3,到边长为的距离需要手动算一下,设其为c,利用相似三角形,c:2=4:,得c为,即射影到边长为的距离为.如下表所示:因为想给大家尽量讲的清楚一点,所以说的有点多,但并不是过程很复杂,接下来我们看例2.这里的L分别为2,和,然后是各视图的高都为1,d射影到边长为2的距离为0,到边长为的距离都为,如下表.这里俯视图的边长需要你找一下,很容找到L分别为2,,,h分别为1,1,1,d分别为2,0,0,具体如下表:第11讲固体压强,液体压强综合能力检测题第11讲固体压强,液体压强综合能力检测题PAGEPAGE\*MERGEFORMAT1第11讲固体压强,液体压强综合能力检测题第9～11讲综合能力检测题单项选择题1．如图所示，实心均匀正方体放在水平桌面上，从虚线处将其沿竖直方向截成大小不同的甲、乙两块，则两块对水平桌面的压强p甲、p乙的大小关系是()A．p甲大于p乙B．p甲等于p乙C．p甲小于p乙D．无法判断第1题图　　　　　第2题图　　　　　第4题图2．叠罗汉是一种体育娱乐项目，如图，三个体重、体型相同的人叠成两层静态造型。每个人体重均为G，每只鞋的鞋底面积均为S，则图中箭头所指的那只脚对水平地面的压强为()A.eq\f(3G,4S)B.eq\f(2G,3S)C.eq\f(G,2S)D.eq\f(G,S)3．为探究液体内部压强的特点，用隔板将一容器分成左、右两部分，隔板下部有一圆孔用橡皮膜封闭(如图所示)，当左、右两侧各注入适量的液体后，图中符合实际情况的是()4．两个用同一种材料制成且完全相同的密闭圆台形容器一正一反放置在同一水平桌面上，容器内装有质量和深度均相同的液体，如图所示。若它们分别在水平方向拉力F1和F2的作用下沿桌面做匀速直线运动，速度分别为v和2v，容器底部受到液体的压强分别为p1和p2，下列关系正确的是()A．p1＝p2　F1＝F2B．p1＞p2　F1＜F2C．p1＞p2　F1＝F2D．p1＜p2　F1＞F25．下列各图不属于连通器的是()6．下列生活实例与所应用的物理知识的说法错误的是()A．坐沙发比坐木凳舒服，利用了减小压力来减小压强的道理B．用吸盘挂钩挂衣服，利用了大气压强的作用C．水坝的下部比上部建造得宽，是由于水对坝的压强随深度的增加而增大D．制造形状上下不对称的机器，利用了流体压强与流速的关系7．如图所示，将盛有适量水的容器放在水平桌面上，然后把系在弹簧测力计下的铁块慢慢地浸入水中(水未溢出)，观察铁块从刚开始浸入水中到完全浸在水中的实验现象，并对一些物理量作出了如下判断：①铁块受到的浮力变大；②弹簧测力计的示数变小；③桌面受到的压力变大；④水对容器底部的压强变大。其中正确的是()A．①②B．①②③C．①②③④D．①②④8．如图所示，a、b是两种物质质量与体积的关系图象，分别用a、b两种物质制成体积相等的甲、乙两实心物体，浸没在水中。松手稳定后()A．乙漂浮，乙受到的浮力小B．甲漂浮，甲受到的浮力大C．乙下沉，甲受到的浮力大D．甲下沉，乙受到的浮力大9．在三个相同的烧杯里装入质量相等的甲、乙、丙三种不同的液体，把一支装有适量铁砂的平底试管先后放入这三个烧杯中，静止后如图所示。下列说法正确的是()A．试管在甲液体中受到的浮力最大B．甲液体的密度最大C．丙液体对烧杯底部的压强最小D．试管在三种液体中排开液体的重力一样大第9题图　第10题图　第11题图　第12题图10．如图所示的甲图中，石料在钢绳拉力的作用下从水面上方以恒定的速度下降，直至全部没入水中。图乙是钢绳拉力随时间t变化的图象。若不计水的摩擦力，则可算出该石料的密度为()A．2.8×103kg/m3B．2.3×103kg/m3C．0.6×103kg/m3D．3.2×103kg/m311．(2015，丹东)A、B是两个质量完全相同的实心长方体，轻轻放入水中后，静止时如图所示，则下列说法正确的是()A．两物体的密度大小关系是：ρA＞ρBB．两物体受到水的浮力大小关系是：F浮A＜F浮BC．两物体排开水的体积大小关系是：V排A＝V排BD．两物体下表面受到水的压强大小关系是：pA＞pB12．两个底面积不等的圆柱形容器(S甲＜S乙)，分别盛有甲、乙两种不同的液体，将两个完全相同的小球分别放入这两种液体中，小球静止时的位置如图所示，此时两液面刚好相平。若将这两小球从液体中取出，则液体对容器底部压强的变化量△p甲、△p乙的大小关系是()A．△p甲一定大于△p乙B．△p甲一定等于△p乙C．△p甲一定小于△p乙D．△p甲可能小于△p乙二、填空题(每空1分，共20分)13．(2015，安徽)如图所示，重为1.5N的圆柱体竖直漂浮在水面上，其底面积S＝30cm2，则水对圆柱体下表面的压强p＝Pa，圆柱体下表面所处的深度h＝cm。14．(2015，玉林)书包用宽的背带，是为了在压力一定时，通过受力面积来压强。(以上两空填“增大”或“减小”)15．护士给病人输液时，药水瓶上插着两根管，一根给病人输液，另一根通过瓶盖扎进瓶内药水中，如图所示。这根“闲置”管是为了利用。由于针头较细，为确保药液的流速，需要将药水袋提升到相对针管一般不低于1.3m的高度，由此推算针管处受到的液体压强为Pa。(ρ药液＝ρ水)第13题图　第15题图　第16题图　第17题图16．(2014，广州)如图所示的装置，抽气前气球内气体压强大气压；抽气时瓶内的气球在膨胀，说明气球内气体压强__大于__玻璃瓶内气体压强，从而推测此时瓶内的气体压强大气压。(均填“大于”“等于”或“小于”)17．(2015，茂名)我国最新研发的隐形战机将参加今年的阅兵，机翼的横截面积设计成如图所示的形状，这是利用了在气体中流速越大的地方压强越的原理，从而使机翼的上下表面产生压强差，为飞机提供升力。当该飞机水平加速飞行时，飞机受到的动力(填“大于”“等于”或“小于”)它受到的阻力。以为参照物，飞行员是静止的。18．(2015，汕尾)用手将一重为5N的物体全部压入水中，物体排开的水重8N，此时物体受到的浮力为N，放手后物体将(填“上浮”“下沉”或“悬浮”)，待物体静止时所受浮力为N。19．牛奶密度是检验牛乳质量的一项重要指标，为了比较市场上两种不同品牌牛奶的密度，小华设计了三种实验方法。方法一：将一正方体塑料块先后放入这两种不同品牌的牛奶中，让它漂浮在液面上，观察塑料块露出液面的体积，露出液面体积较大的牛奶的密度较；方法二：将测量液体内部压强的压强计的金属盒先后放入这两种不同品牌牛奶中的同一深度，观察压强计的高度差，高度差较大的牛奶的密度较；方法三：用同一饮料瓶分别装满这两种不同品牌的牛奶，重的牛奶密度较。(以上三空均填“大”或“小”)20．(2015，齐齐哈尔)两个质量相等质地均匀的实心球甲和乙，它们的体积之比V甲∶V乙＝1∶3，则它们的密度之比ρ甲∶ρ乙＝；现将甲、乙两球放入装有足够深的水的容器中，当它们静止时，水对两球的浮力之比为F甲∶F乙＝2∶3，则乙球的密度为ρ乙＝kg/m3。三、实验与探究题21．(2015，桂林)如图所示，为小丽在“研究影响压力作用效果的因素”实验中所选用的器材在水平桌面上进行的实验过程。(1)本实验的科学探究方法是。(2)小丽为了探究压力作用的效果跟压力大小的关系，应该通过图中的两次实验进行比较得出结论；为了探究压力作用的效果跟受力面积大小的关系，应该通过图中的两次实验进行比较得出结论；(3)通过实验小丽得出结论：压力作用的效果不仅跟压力的大小有关，而且跟受力面积有关。小丽的结论(填“正确”或“不正确”)。(4)在生活中，书包的背带做得又宽又大，这是利用了来减小压力作用的效果；俗话说“磨刀不误砍柴工”所蕴含的物理知识是来增大压力作用的效果。22．(2015，邵阳)在“探究液体压强与哪些因素有关”的实验中，小芳猜想：液体的压强可能与液体的密度、深度等因素有关。(1)要探究液体的压强与某个因素的关系，需要先控制其他几个因素不变，这种实验探究方法称作法。(2)如图是小芳同学设计的用压强计探究影响液体压强因素的三个实验装置。①要探究在液体密度相同时，液体的压强与液体的深度是否有关，应选取装置甲和装置____(填“乙”或“丙”)来进行研究。②要探究在液体深度相同时，液体的压强与液体的密度是否有关，应选取装置乙和装置____(填“甲”或“丙”)来进行研究。第22题图　　第23题图23．(2015，河北)小明利用弹簧测力计测量石块的密度。(ρ＝1.0g/cm3，g取10N/kg)(1)用细线将石块挂在弹簧测力计上，弹簧测力计的示数如图甲所示，石块重G＝___N。(2)将石块浸没在水中，弹簧测力计的示数如图乙所示，石块受到的浮力F浮＝_N。(3)石块的体积V＝_cm3。(4)石块的密度ρ石块＝___g/cm3。【拓展】完成上述实验后，小明又将挂在弹簧测力计下的石块浸没在不同液体中，收集了下表中的数据。弹簧测力计示数/N3.22.61.91.2液体的密度/g·cm－30.81.11.451.8(1)将表格补充完整。(2)分析上表，小明得出此装置可作“密度计”，此“密度计”的分度值是。24．(2015，河南)小亮想测量一个小木块(不吸水)的密度，他利用天平、圆柱形玻璃杯、适量的水、细针等器材，经过思考，想出了如下的实验方法。(1)图甲是小亮在调节天平时的情景，小丽指出了他在操作上的错误，你认为错误之处是____。(2)小亮纠正错误后调节好天平，按照以下步骤继续实验。①将小木块放在天平左盘，天平平衡时右盘中所加砝码和游码的位置如图乙所示，则小木块的质量为____g。②将玻璃杯中装满水，用细针缓慢地将木块压入水中，使之完全浸没。利用排水法，测出溢出水的质量为30g，则小木块的体积为cm3。(已知ρ水＝1.0×103kg/m3)③测出小木块的密度是g/cm3。(3)受小亮实验的启发，小丽在实验时除了利用原有的圆柱形玻璃杯、适量的水和细针外，又找了一把刻度尺，不用天平也测出了木块的密度。请你将下列测量步骤补充完整：①在玻璃杯中装入适量的水，用刻度尺测出杯中水的深度为h0；②；③用细针缓慢地把木块压入水中，使之完全浸没，用刻度尺测出杯中水的深度为hm；④小木块密度的表达式：ρ木＝(用测量的物理量和已知量的符号表示)。四、综合计算题25．(2015，呼和浩特)一个重力为3N的实心铁块A，与一实心正方体木块B叠放在圆筒形容器底部，底部水平，如图所示。实心木块的密度为0.6×103kg/m3，边长为10cm。求：(1)实心木块的重力；(2)实心木块对容器底部的压强；(3)若不断缓慢向容器中倒水，直到水注满容器；当木块稳定时，木块露出水面的体积。(g取10N/kg)26．(2015，贵港)一带阀门的圆柱形容器，底面积是200cm2，装有12cm深的水，正方体M边长为10cm，重20N，用细绳悬挂放入水中，有eq\f(1,5)的体积露出水面，如图所示。试求：(1)正方体M的密度；(2)正方体M受到的浮力以及此时水对容器底部的压强；(3)若从图示状态开始，通过阀门K缓慢放水，当容器中水面下降了2cm时，细绳刚好被拉断，则细绳能承受的最大拉力是多少？(g取10N/kg，水的密度为1.0×103kg/m3)。电学专题部分1．如图所示，要使三个灯泡并联，应闭合开关，当只闭合S1时，不发光。第1题图　　第2题图2．在如图所示的电路中，只增加一根导线，使电路变成并联电路，则这根导线应接在两点之间。3．新交通法规定驾驶员不系安全带记3分，罚100元。汽车上设置了“安全带指示灯”，提醒驾驶员系好安全带。当安全带系好时，相当于闭合开关，指示灯不亮；安全带未系好时，相当于断开开关，指示灯发光。图中符合上述要求的电路图是()4．某同学观察他家里的电动自行车后发现：不管捏紧左边还是右边的车闸，车尾的一盏刹车指示灯均会亮起，而拨动扶手旁向左或向右的转向开关时，车尾只有对应一侧的转向指示灯会亮起，下列指示灯的示意图合理的是()(2015，广元)小明家台灯的插头插在如图所示的插座上，插座上有一个开关和一个指示灯。若插座开关和指示灯分别用S1、L1表示，台灯的开关和灯泡分别用S2、L2表示。小明断开或闭合S1、S2时，记录现象如下表。由小明的记录可判断出关于L1、L2的连接方式可能是电路图中的()开关状态插座指示灯(L1)台灯(L2)闭合S1，断开S2亮不亮闭合S2，断开S1不亮不亮S1和S2都闭合亮亮6．小黄的房间门口装有开关S1，床头装有开关S2，这两个开关都能单独控制房间的吊灯，如图所示的电路图能符合这一要求的是()7．近年来，梅州市新增了不少新能源公交车，在公交车后门的两侧扶手上，各装有一个按钮(相当于一个开关)，想要下车的乘客只要按下任何一个按钮，装在驾驶台上的指示灯都会发光，提醒司机有乘客需要下车。请设计一个符合要求的电路图(已画出指示灯和电源，如图所示)。8．如图甲是电吹风的电路图，图乙是电路元件实物图，选择开关绕O点转动，可分别置于OAB、OBC、OCD三个位置，使电吹风分别处于“热风挡”“冷风挡”“停止”三个状态。请根据图甲的电路图将图乙的实物电路图补画完整。9．如图是楼梯照明灯的模拟电路。它的要求是在楼梯的上下两端都能对灯进行控制。请在图上补画连接导线，使之符合这一要求。10．如图所示，两个灯泡L1、L2串联，闭合开关S，L1发光，L2不发光。发生这一现象的原因，不可能是()A．电源电压较低B．L2发生了断路C．L2发生了短路D．L2实际功率很小11．如图所示的电路图，电源电压保持不变。开关S闭合时，发现图中只有两个表的指针发生偏转，电路中的电阻R或灯L只有一个出现故障，则可能是()A．电流表A示数为零，灯L短路B．电流表A示数为零，灯L断路C．电流表A1示数为零，电阻R短路D．电流表A1示数为零，电阻R断路12．如图所示电路，电源电压为3V，当开关S闭合后，只有一盏灯泡发光且电压表的示数为3V，产生这一现象的原因可能是()A．灯泡L1处短路B．灯泡L2处短路C．灯泡L1处断路D．灯泡L2处断路13．在如图所示的实验电路中，闭合开关，移动滑动变阻器的滑片后，发现电流表、电压表均有示数，小灯泡不亮。则故障原因是()A．L断路　　　　　　　B．L短路C．R断路D．R短路14．在如图所示的电路中，闭合开关S，灯L不亮，电压表有示数。已知电路中各处均接触良好。(1)请写出发生上述现象的三个可能原因：；；。(2)为进一步确定原因，小华同学将一个电流表正确串联在该电路中，闭合开关S，观察电流表的示数情况。若电流表有示数，说明上述现象产生的原因是(写出一个可能原因)；若电流表无示数，说明上述现象产生原因是。(3)小明同学准备用一根导线并联接在电阻R两端，根据灯泡能否发光进一步确定原因。此操作 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 (填“可行”或“不可行”)。请说明理由：。教你如何调制颜色教你如何调制颜色PAGE/NUMPAGES教你如何调制颜色教你如何调制颜色红+少黑=暗红红+黄=橘红?红+白=粉红红+兰=深紫?黄+少量黑=深黄灰色黄+少量白=粉黄?黄+兰=绿红+黄=橙黄+蓝=绿白+蓝=淡蓝红+黑=咖啡?红+蓝=紫黄+黑=棕绿黄+白=淡黄黑+白=灰?黑+兰=蓝灰色?白+兰=兰灰色熟褐色=柠檬黄+纯黑色+玫瑰红?粉玫瑰红=纯白色+玫瑰红?朱红色=柠檬黄+玫瑰红?暗红色=玫瑰红+纯黑色紫红色=纯紫色+玫瑰红?褚石红=玫瑰红+柠檬黄+纯黑色粉蓝色=纯白色+天蓝色?蓝绿色=草绿色+天蓝色灰蓝色=天蓝色+纯黑色?浅灰蓝=天蓝色+纯黑色+纯紫色粉绿色=纯白色+草绿色?黄绿色=柠檬黄+草绿色墨绿色=草绿色+纯黑色粉紫色=纯白色+纯紫色?啡色=玫瑰红+纯黑色粉柠檬黄=柠檬黄+纯白色?藤黄色=柠檬黄+玫瑰红桔黄色=柠檬黄+玫瑰红?土黄色=柠檬黄+纯黑色+玫瑰红?手绘装颜料调色表玫红色+黄色=大红(朱红、桔黄、藤黄)朱红色+黑色少量=啡色天蓝色+黄色=草绿、嫩绿天蓝色+黑色+紫=浅蓝紫草绿色+少量黑色=墨绿天蓝色+黑色=浅灰蓝天蓝色+草绿色=蓝绿白色+红色+黑色少量=禇石红天蓝色+黑色（少量）=墨蓝白色+黄色+黑色=熟褐玫红色+黑色（少量）=暗红红色+黄+白=人物的皮肤颜色玫红色+白色=粉玫红蓝色+白色=粉蓝黄色+白色=米黄任何颜色加黑都会降低纯度和明度,加白则相反先掌握三原色调间色:红+黄=橙,红+蓝=紫,黄+蓝=绿然后是原色加间色调复色,间色加间色调次复色,这些很麻烦,根据比例而不同调颜色只要掌握基本的原则就好调了.比如你想调一个高级灰,就找一个相近的纯颜色(原色和间色都可以称为纯颜色,有些复色不严格也可以这么说),比如肉色,就可以先用橘黄和玫瑰红加一起,再加白就行了,这个比较简单.但是那些金粉银粉什么的就麻烦多了,金粉应该是橘黄加土黄再少加点白,自己试试吧.还有高级灰的话一定要加互补色来降低纯度另外,调颜色尽量不要用黑,调出来不准,也容易脏,学会用互补色会好点。?微生物肥料生物安全通用技术准则NY1109-2006微生物肥料生物安全通用技术准则NY1109-2006PAGE/NUMPAGES微生物肥料生物安全通用技术准则NY1109-2006微生物肥料生物安全通用技术准则（NY1109-2006）1　范围本 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 规定了微生物肥料使用菌种安全性分级目录、不同菌种及产品选择毒理学试验的原则、程序、试验方法和结果评价方法。本标准适用于中华人民共和国境内生产、销售的微生物肥料。2　规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成 协议 离婚协议模板下载合伙人协议 下载渠道分销协议免费下载敬业协议下载授课协议下载 的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB15193.3-2003???急性毒性试验GB/T4789.28-2003?食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3　术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1　?半数致死量?medianlethaldose,LD50是经口给予受试物后，预期能够引起动物死亡率为50%的单一受试物剂量，该剂量为经过统计得出的估计值。其单位是每千克体重所摄入受试物质的毫克数、克数或毫升数，即mg/kg体重、g/kg体重或mL/kg体重。4　选择毒理学试验的原则4.1　生产用菌种微生物肥料生产用菌种分为四级管理，其安全分级目录见附录A。未列入附录A中的菌种，除根瘤菌和乳杆菌(Lactobacillus）外，其余均需做毒理学试验。?第一级（A.1）为免作毒理学试验的菌种。4.2?产品5　毒理学试验程序5.1?菌种毒理学试验程序微生物肥料生产用菌种的鉴定资料，包括属及种的拉丁文学名和中文译名、形态、生理生化特性及鉴定依据、功能评价等资料。?对于需要做毒理学试验的菌种，生产者需提供试验用纯菌种斜面，经复核确认与该菌种鉴定资料相符且无杂菌污染后，进行毒理学试验。5.2?产品毒理学程序需对送检产品进行菌种和载体物料的真实性确认后，进行毒理学试验。6　试验方法6.1受试物的准备?菌种受试物将试验菌种接种于适宜的培养基中，在适宜的条件下培养一定时间，用生理盐水调整菌液浓度至2.0×108～2.0×109cfu/mL，该溶液为菌种受试物。?产品受试物固体产品根据试验要求，配制所需浓度，溶剂首选去离子水，也可选用羧甲基纤维素、明胶、淀粉等。液体产品不可稀释，直接使用。6.2?急性毒性试验按GB15193.3-2003执行。6.3?致病性试验致病性试验包括以下项目。?急性毒性试验方法同5.2。?一次破损皮肤刺激试验?目的检测受试物对实验动物皮肤的刺激/腐蚀作用和强度。?实验动物每次实验至少需要3只皮肤完好的白色健康家兔或豚鼠。?操作程序a)涂受试物前，将家兔或豚鼠背部脊柱两侧的毛去掉，去毛范围约2.5cm×2.5cm，用75%酒精清洁、消毒暴露皮肤，待酒精挥发后，用灭菌刀片或注射针头分别在两块皮区内划一个“＃”形的破损伤口。注意皮肤破损仅达表皮，不要伤及真皮。b)将受试物0.5mL直接滴于破损皮肤上，或滴于同样大小的2层～4层纱布上并敷贴于破损皮肤表面，然后用一层无刺激塑料膜或油纸覆盖，再用无刺激胶布固定。另一侧去毛破损皮肤作为空白对照（或溶剂对照），敷贴时间为4h。试验结束后，用温水或无刺激性溶剂除去残留受试物。c)分别于去除受试物后1h、24h和48h观察皮肤局部反应，并按表1进行刺激反应评分。注意鉴别感染和原发性刺激反应的区别，若有感染可疑，应进行重复测试。?评价规定在各个观察时间点，按照表1对动物的皮肤红斑与水肿形成情况进行评分，并按时间点将3只动物的评分相加，除以动物数，获得不同时间点的皮肤刺激反应积分均值（刺激指数）。取其中最高皮肤刺激指数，按表2评定该受试物对动物皮肤刺激强度的级别。　表1?皮肤刺激反应的评分标准皮肤刺激反应皮肤刺激反应评分红斑形成：?无0勉强可见1明显红斑2中等～严重红斑3紫红色红斑并有焦痂形成4水肿形成：?无0勉强可见1皮肤隆起，轮廓清楚2水肿隆起约1mm3水肿隆起超过1mm4表2?皮肤刺激强度分级皮肤刺激指数刺激强度级别0～＜0.5无刺激性0.5～＜2.0轻刺激性2.0～＜6.0?中等刺激性6.0～8.0强刺激性?溶血试验?目的检测受试物是否具有溶血特性。?操作程序用无菌棉拭子蘸取菌种受试物,以蛇形线接种于血琼脂平板(按GB/T4789.28-2003中4.6规定),置36℃±1℃培养箱中培养,24h后观察有无溶血环产生。同时用已知阳性菌株金黄色葡萄球菌等作为对照。?试验结果???菌落周围有溶血环的，则溶血试验阳性；否则为阴性。?抗菌药物敏感试验质控菌株可选用大肠杆菌ATCC25922等标准菌株。?目的检测受试物对抗生素的敏感性强度。?试验用抗生素可选用头孢哌酮（CFP）、四环素（TE）、头孢唑啉（CZ）、链霉素（S）、俐特灵（FR）、环丙沙星（CIP）、复方新诺明（SXT）、氯霉素（C）、氨苄青霉素（AM）、庆大霉素（GM）、强力霉素（DO）、丁胺卡那霉素（AN）、甲氟哌酸（PEF）、氟啶酸（ENO）、多西环素(DO)、依诺沙星(ENO)、阿米卡星(AN)等中的几种。6?操作程序a)用无菌棉拭子将受试物均匀涂抹于营养琼脂平板表面，共涂抹3次。每涂抹1次，平板应转动60o，最后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿,置室温干燥5min。b）用无菌棉拭子蘸取浓度为2.0×108～2.0×109cfu/mL质控菌株菌悬液，均匀涂抹于营养琼脂平板表面，具体方法同上，作为对照试验。c)以无菌操作取出抗生素纸片分别贴在涂有受试物和质控菌株菌悬液的平板培养基表面，每个平板放4个纸片。然后将平板置于36℃±1℃恒温培养箱中培养18h后观察抗生素纸片周围有无抑菌环，量取并记录其直径（包括纸片直径）大小，单位mm。试验应做3个平行，取其均值。d)质控菌抑菌环应均在质控范围内，说明试验方法准确可靠，否则试验无效。?急性腹腔注射致病性试验?目的检测受试物的急性致病性。?试验动物清洁级健康成年小鼠，体重18～20g。?操作程序a）选健康成年小鼠40只,体重18～20g，雌、雄各半，剂量为500mg/kgBW，按0.1mL/10gBW经腹腔注射受试物。b）于腹腔注射后第3d、7d分别取存活的实验动物雌、雄各5只解剖，并做大体病理学观察。c)腹腔注射后第14d将剩余实验动物处死、解剖并做大体病理学观察。?结果观察、评价根据试验周期内动物有无死亡及出现的中毒体症、大体病理学观察及病理组织学检查发现病变的程度进行分级判定（见表3）。表3急性致病性判定标准级?别判定依据强致病性动物出现死亡，死亡动物及24h以上存活动物在第3d、7d经解剖肉眼检查或病理组织学检查即可发现脏器的明显病变。弱致病性动物有中毒体症无死亡，动物第14d经解剖肉眼检查或病理组织学检查可发现脏器的明显病变。无致病性动物无中毒体症无死亡，动物第14d解剖肉眼检查或病理组织学检查均未发现脏器的明显病变。??急性眼刺激试验.1?目的检测受试物对实验动物眼睛的急性刺激和腐蚀作用。实验动物3只家兔，试验前检查家兔双眼，有异常者不能用于试验。操作程序a）吸取受试物0.1mL,滴入家兔一侧眼结膜囊内，另一侧眼以生理盐水作为正常对照。b）滴受试物后，将眼被动闭合4s,30s后用生理盐水冲洗。于滴眼后1h、24h、48h、72h、7d、14d和21d，肉眼观察家兔眼结膜、虹膜和角膜的损伤与恢复情况。如果72h内未出现刺激反应，或第7d或第14d，眼睛刺激反应完全恢复，即可提前终止试验。必要时，用2%荧光素钠溶液或裂隙灯、放大镜检查角膜及虹膜变化。评价规定按表4对家兔眼角膜、虹膜和结膜的急性刺激反应进行评分，并分别计算每只动物在三个不同观察时间（24h、48h和72h）角膜损害、虹膜损害、结膜充血和结膜水肿四方面的“平均评分”（即每只动物的24h、48h和72h评分之和除以观察数3）。分别以动物眼角膜、虹膜和结膜充血、水肿的平均评分和恢复时间进行评分，按表5或表6眼刺激反应分级标准判定受试物对眼睛的刺激强度。表4?急性眼刺激反应的评分标准眼损害表现评分角膜损害：无溃疡形成或混浊散在或弥漫性混浊，虹膜清晰可见半透明区易分辨，虹膜模糊不清出现灰白色半透明区，虹膜细节不清，瞳孔大小勉强可见角膜不透明，混浊，虹膜无法辨认?01234虹膜损害：正常皱褶明显加深，充血，肿胀，角膜周围有中度充血，瞳孔对光仍有反应出血、肉眼可见破坏，或瞳孔对光无反应?012结膜（睑结膜、球结膜）充血：血管正常血管充血呈鲜红色血管充血呈深红色，血管不易分辨弥漫性充血呈紫红色?0123结膜（睑结膜、球结膜）水肿：无水肿轻微水肿（包括瞬膜）明显水肿，伴有部分眼睑外翻水肿至眼睑近半闭合水肿至眼睑大半闭合?01234表5?眼刺激反应分级标准级?别判定依据可逆性损伤无刺激性3只动物的平均评分：角膜损害<1、虹膜损害<1、结膜充血<2和结膜水肿<2；或3只动物中至少有2只动物的平均评分符合上述标准，另外1只动物的刺激反应在21d内完全恢复。轻刺激性3只动物中有2只动物的平均评分：角膜损害≥1；虹膜损害≥1；结膜充血≥2；结膜水肿≥2，且7d内全部动物的刺激反应完全恢复。刺激性a3只动物中有2只动物的平均评分：角膜损害≥1；虹膜损害≥1；结膜充血≥2；结膜水肿≥2，且21d内全部动物的刺激反应完全恢复。不可逆性损伤腐蚀性b至少有1只动物的角膜、虹膜或结膜的刺激反应在21d的观察期内未完全恢复或/和在3只动物中有2只动物的平均评分：角膜损害≥3；虹膜损害≥1.5。注：完全恢复是指动物的眼刺激反应评分：角膜损害=0，虹膜损害=0，结膜充血=0或1，结膜水肿=0或1。a?接触受试物后所产生的可逆性炎性反应。b?接触受试物后所产生的不可逆性组织损伤。?表6??眼刺激性反应分级标准平均评分动物数（只）恢复时间（d）a损伤类型　角膜损害<1和虹膜损害<1和结膜充血<2和结膜水肿<2≥2≤21无刺激性　角膜损害≥1或虹膜损害≥1或结膜充血≥2或结膜水肿≥2≥2≤7轻刺激性　　≤21刺激性　　角膜损害≥3或虹膜损害≥1.5≥2?腐蚀性b　　角膜损害≥1或虹膜损害≥1或结膜充血≥1或结膜水肿≥1≥1>21　a?为动物刺激反应评分恢复至角膜损害=0，虹膜损害=0，结膜充血=0或1，结膜水肿=0或1的时间。b?至少有1只动物于21d尚存在角膜粘连或血管翳，也可判为腐蚀性。　7　结果评价凡毒理学试验结果评价为有毒的产品，不得生产和销售；有毒或致病性试验结果不符合的菌种,均不得作为微生物肥料生产用菌种。7.1?急性毒性试验根据半数致死量（LD50）数值,判定受试物的毒性分级,半数致死量(LD50)剂量分级按GB15193.3-2003附录D执行，凡LD50>5000mg/kgBW的，可通过，即该菌种可作为生产用菌种或该产品可进行生产、销售。7.2?致病性试验结果判定同6.1。如结果为无刺激或仅具轻度刺激作用，可通过；否则，应放弃使用。溶血试验结果为阴性的，可通过；否则，应放弃使用。受试菌株必须对两种以上的抗生素敏感；否则，应放弃使用。结果为无急性致病性可通过；否则，应放弃使用。结果对眼无刺激性或具有轻刺激性的，可通过；否则，应放弃使用。　附录A（规范性附录）菌种安全分级目录A.1?第一级：免作毒理学试验的菌种?根瘤菌类??????????????????????Azorhizobiumcaulinodans?????????????????????????茎瘤固氮根瘤菌（田菁（茎瘤）根瘤菌）Bradyrhizobiumelkanii?????????????????????????????埃氏慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobiumjaponicum????????????????????????日本慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobiumliaoningense?????????????????????辽宁慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Mesorhizobiumhuakuii????????????????????????????????华癸中生根瘤菌（紫云英）Mesorhizobiumloti??????????????????????????????????????百脉根中生根瘤菌Rhizobiumetli????????????????????????????????????????????埃特里根瘤菌（菜豆）Rhizobiumleguminosarumbiovarphaseoli?????豌豆根瘤菌（菜豆生物型）Rhizobiumleguminosarumbiovartrifolii???????豌豆根瘤菌（三叶草生物型）Rhizobiumleguminosarumbiovarviceae????????豌豆根瘤菌（蚕豆生物型）Sinorhizobiumfredii?????????????????????????????????费氏中华根瘤菌（快生大豆根瘤菌）Sinorhizobiummeliloti??????????????????????????????苜蓿中华根瘤菌还包括尚未确定种名的，从一些豆科植物根瘤内分离、纯化、鉴定、回接、筛选后在原宿主植物结瘤、固氮良好的根瘤菌，如花生、绿豆、沙打旺根瘤菌等。?自生及联合固氮微生物类????????Azospirillumlipoferum????????????????????????????????生脂固氮螺菌Azospirillumbrasilense????????????????????????????????巴西固氮螺菌Azotobacterbeijgerinckii???????????????????????????????拜氏固氮菌Azotobacterchroococcum?????????????????????????????褐球（圆褐）固氮菌Azotobactervinelandii?????????????????????????????????棕色固氮菌Azotobacterpaspali?????????????????????????????????????雀稗固氮菌Beijerinckiaindica??????????????????????????????????????印度贝氏固氮菌?光合细菌类????????????????????Rhodobactercapsulatus?????????????????????????????????荚膜红细菌Rhodobactersphaeroides???????????????????????????????类球红细菌(球形红杆菌)Rhodopseudomonasacidophila???????????????????????嗜酸红假单胞菌Rhodopseudomonasgelatinosa???????????????????????胶质红假单胞菌Rhodopseudomonasglobiformis????????????????????球形红假单胞菌Rhodopseudomonaspalustris??????????????????????????沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonasrutila????????????????????????????血色红假单胞菌Rhodopseudomonassulfidophila???????????????????嗜硫红假单胞菌Rhodopseudomonasviridis???????????????????????????绿色红假单胞菌Rhodospirillumfulvum????????????????????????????????黄褐红螺菌Rhodospirillumrubrum????????????????????????????????深红红螺菌Rhodospirillumsalinarium???????????????????????????盐场红螺菌Rubrivivaxgelatinosus????????????????????????????????胶状红环菌（胶状红长命菌）?分解磷钾化合物细菌类??????????Bacillusamyloliquefaciens?????????????????????????????液化淀粉芽孢杆菌Bacilluslaterosporus?????????????????????????????????????侧孢芽孢杆菌Bacilluslicheniformis??????????????????????????????????地衣芽孢杆菌Bacillusmegaterium????????????????????????????????????巨大芽孢杆菌Bacillusmucilaginosus????????????????????????????????胶胨样芽孢杆菌Bacillussubtilis??????????????????????????????????????????枯草芽孢杆菌Bacillusthuringiensis????????????????????????????????????苏云金芽孢杆菌Thiobacillusthiooxidans??????????????????????????????氧化硫硫杆菌?促生细菌类????????????????????Paenibacillusazotofixans?????????????????????????????固氮类芽孢杆菌Paenibacilluspolymyxa???????????????????????????????多粘类芽孢杆菌?酵母菌类??????????????????????Candidaguillermondii???????????????????????????????????季也蒙假丝酵母Candidamembranaefaciens???????????????????????????膜醭假丝酵母Candidatropicalis???????????????????????????????????????热带假丝酵母Candidautilis?????????????????????????????????????????????产朊假丝酵母Endomycopsisfibuliger?????????????????????????????????扣囊拟内孢霉Pichiafarinosa???????????????????????????????????粉状毕赤酵母Pichiamembranaefaciens??????????????????????????????膜醭毕赤酵母Saccharomycescerevisiae?????????????????????????????酿酒酵母Rhodotorularubra???????????????????????????????????????深红酵母?放线菌类??????????????????????Frankiasp.????????????????????????????????????????????????弗兰氏克菌（固氮放线菌）Streptomyceschingyangensis????????????????????????泾阳链霉菌Streptomycesmicroflavus???????????????????????????????细黄链霉菌?AM真菌类?????????????????????Glomusmosseae??????????????????????????????????????????摩西球囊霉?其它??????????????????????????Lactobacillusparabuchner?????????????????????????????类布氏乳杆菌Lactobacillusacidophilus??????????????????????????????嗜酸乳杆菌Lactobacillusbulgaricus????????????????????????????????保加利亚乳杆菌Lactobacilluscasei????????????????????????????????????????干酪乳杆菌Lactobacillusdelbruecki????????????????????????????????德氏乳杆菌Lactobacilluslactis???????????????????????????????????????乳酸乳杆菌Lactobacillusplantarum????????????????????????????????植物乳杆菌Pediococcuspentosaceus???????????????????????????????戊糖片球菌Streptococcuslactis???????????????????????????????????乳酸链球菌Streptococcusthermophilus??????????????????????嗜热链球菌A.2?第二级：需做急性毒性（LD50）试验的菌种Arthrobacteraurescens??????????????????????????????????金黄节杆菌AspergilluscandidusLink??????????????????????????????亮白曲霉Aspergillusniger???????????????????????????????????????????黑曲霉Aspergillusoryzae?????????????????????????????????????????米曲霉AspergilluspenicillioidesSpeg???????????????????????帚状曲霉AspergilluswentiiWehmer????????????????????????????温特曲霉EurotiumchevalieriMangin???????????????????????????谢瓦散囊菌Bacillusbrevis(Brevibacillusbrevis)???????????????短芽孢杆菌Bacilluscirculans?????????????????????????????????????????环状芽孢杆菌Bacilluscoagulans??????????????????????????????????????凝结芽孢杆菌Bacilluspumilu????????????????????????????????????????????短小芽孢杆菌Bacillussphaericus??????????????????????????????????????球形芽孢杆菌Brevibacteriumsp.????????????????????????????????????????短杆菌Burkholderiafungorum?????????????????????????????????真菌伯克霍尔德氏菌Chaetomium?cochliodes???????????????????????????????螺卷毛壳Chaetomiumtrilaterale???????????????????????????三侧毛壳Clostridiumpasteurianum?????????????????????????巴斯德梭菌Geobacillusstearothermophilus???????????????????????嗜热脂肪地芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)?????????????????????????Geotrichumcandidum???????????????????????????????????白地霉Nocardiasp.????????????????????????????????????????????????诺卡氏菌Nocardiopsissp.???????????????????????????????????????????拟诺卡氏菌Paenibacillusmacerans?????????????????????????????????浸麻类芽孢杆菌??Penicilliumcitreonigrum???????????????????????????????黄暗青霉Penicilliumcitrinum??????????????????????????????????????桔青霉Penicilliumfrenguentans???????????????????????????????常现青霉Penicilliumglabcum?????????????????????????????????????光孢青霉Pseudomonasfluorescens???????????????????????????????荧光假单胞菌Promicromonosporacitrea?????????????????????????????柠檬原小单胞菌Pseudomonasputida?????????????????????????????????????恶臭假单胞菌Pseudomonasstutzeri????????????????????????????????????施氏假单胞菌Pseudomonasvesicularis???????????????????????????????泡囊假单胞菌Rhizopusoryzae????????????????????????????????????????????米根霉Sphingobacteriummultivorum????????????????????????多食鞘氨醇杆菌Sporotrichumthermophile??????????????????????????????嗜热侧孢霉Streptomycesalbidoflavus??????????????????????????????微白黄链霉菌Streptomycesfradiae?????????????????????????????????????弗氏链霉菌streptomycesgriseospiralis?????????????????????????????灰旋链霉菌Trichodermaharzianum?????????????????????????哈茨木霉Trichodermakoningii????????????????????????????????????康宁木霉Trichodermaviride???????????????????????????????????????绿色木霉A.3?第三级：需做致病性试验的菌种Acinetobactercalcoaceticus???????????????????????????乙酸钙不动杆菌Acinetobacterbaumannii???????????????????????????????鲍氏不动杆菌Alcaligenesdenitrificans???????????????????????????????反硝化产碱菌Alcaligenesfaecalis?????????????????????????????????????粪产碱菌Alcaligenesxylosoxidans??????????????????????????????木糖氧化产碱菌Bacilluscereus????????????????????????????????????????????蜡样芽孢杆菌Enterobacteragglomerans????????????????????????????成团肠杆菌Enterobactercloacae???????????????????????????????????阴沟肠杆菌Enterobactergergo