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电转化大肠杆菌实验

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电转化大肠杆菌实验电转化大肠杆菌实验电转化大肠杆菌所需试剂和器材:无水乙醇;70%乙醇;双蒸水;感受态细菌(-80℃冰箱);LB培养基;抗生素(根据实验目的选择);1.5mlep管;电转杯;电转仪操作步骤:1.将电转杯以此用双蒸水、70%乙醇、无水乙醇充分清洗(很重要,否则电转杯短路,实验就会失败!),置于空气中充分晾干后,放于冰上;2.将待电转DNA与感受态细菌混合,加入电转杯的缝隙处。(除了腺病毒同源重组外,均使用1mm电转杯)3.选择电转仪的Mannul选项,调节电压为1.8KV,按Pulse键进行电转;用无抗生素的LB培养基...

电转化大肠杆菌实验
电转化大肠杆菌实验电转化大肠杆菌所需试剂和器材:无水乙醇;70%乙醇;双蒸水;感受态细菌(-80℃冰箱);LB培养基;抗生素(根据实验目的选择);1.5mlep管;电转杯;电转仪操作步骤:1.将电转杯以此用双蒸水、70%乙醇、无水乙醇充分清洗(很重要,否则电转杯短路,实验就会失败!),置于空气中充分晾干后,放于冰上;2.将待电转DNA与感受态细菌混合,加入电转杯的缝隙处。(除了腺病毒同源重组外,均使用1mm电转杯)3.选择电转仪的Mannul选项,调节电压为1.8KV,按Pulse键进行电转;用无抗生素的LB培养基500μl冲洗电转杯中细菌,随后转入含抗生素的LB培养基中培养或涂布在抗生素平板上筛选单菌落。注意事项:1.电转杯要充分预冷2.在进行腺病毒的重组实验室,要选用2mm内径的电转杯,其它均使用1mm内径的电转杯。
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