芳香烃(苯、甲苯、萘)的高效液相色谱定性分析
一、实验目的
1.了解液相色谱法的基本原理及其规律
2.了解高效液相色谱仪的基本构造并掌握其基本操作
3.掌握保留时间、峰宽、理论塔板数、分离度等的基本概念和实际意义
二、实验基本原理
在液相色谱中,采用非极性固定相,极性流动相的色谱法被称为反相色谱。苯、甲苯、萘在ODS柱上的作用力大小不等,不同组分的分配比不同,在柱内的移动速率不同,因而先后流出柱子,得到分离。根据组分峰面积大小及测得的定量校正因子,由归一化定量法可求出各组分的含量。
三、实验条件
PE-200型高效液相色谱仪,785A型检测器;C18 (5μm,4.6 mm×150 mm)型色谱柱;紫外检测器吸收波长254nm;流动相组成为甲醇:水(去离子水):甲醇=90:10(体积比),流速:1ml/min;进样体积:10μl
四、实验步骤
1、
标准
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溶液的配制:苯、甲苯分别用甲醇稀释,萘用甲醇溶解。标准溶液浓度约:苯0.1%(V/V)、甲苯0.1%(V/V)、萘0.1%(W/W)。
2、样品溶液的制备:取含苯、甲苯、萘的混和样品10mL稀释2500倍即得。
3、打开仪器电源,按要求设置好流动相的组成、流速、检测波长。
4、运行电脑中的工作站,用QuickStart法迅速建立一个方法。通入流动相,使色谱柱充分平衡,直到压力变化幅度很小。
5、等待基线稳定,把装有10μL苯标准溶液的进样器放入六通阀中,对检测器调零,待仪器稳定后,把六通阀转到Inject位置,同时注射进样器中的溶液。
6、重复步骤(5),分别注入10μL甲苯、萘的标准溶液。
7、重复步骤(5),注入10μL样品溶液。
8、打印出实验数据,比较标准溶液和样品中各组分的色谱峰,
记录
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相关结果,处理并提交实验
报告
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。
9、关机。
五、结果分析及实验报告
1、根据保留时间定性,确定样品中各个峰所代
表
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的物质。
2、试计算样品中两相邻峰间的分离度R和萘的理论塔板数n。