第七章细菌感染的检测方法与防治原则

第七章细菌感染的检测方法与防治原则免疫病原教研室靖吉芳教学大纲掌握内容标本采集原则人工免疫的分类及常用生物制剂熟悉内容抗细菌感染免疫的特点了解内容细菌感染诊断的常用方法第一、二、三代疫苗的优缺点第一节细菌感染的实验室诊断细菌学诊断检测病原菌及其抗原、代谢产物或其核酸以达到诊断目的。血清学诊断通过检测患者血清中的特异性抗体达到诊断目的。一、临床标本的采集及运送原则标本的采集与运送：早期、无菌、因病而异、双份血清、快、标记二、细菌的检测直接涂片镜检(痰/粪便/拭子等)标本分离培养→可疑菌落增菌(血液/脑脊液等)涂片镜检生化反应血清学鉴定药敏试验动物试验涂片镜检生化反应血清学鉴定药敏试验动物试验分离培养根据营养/生长条件/菌落特征初步鉴别细菌涂片镜检(动力/形态/大小/排列方式/染色特性/特殊结构)生化试验(根据酶和代谢产物鉴别细菌)动物实验(检测细菌毒力)药敏试验(指导临床用药)病原菌抗原的检测酶免疫技术协同凝集试验免疫荧光技术对流免疫电泳免疫印记技术协同凝集实验免疫荧光技术病原菌核酸的检测核酸杂交技术PCR技术基因芯片技术其他检测法气相色谱法呼气试验三、血清学诊断用已知的细菌或其特异性抗原去检测患者体液中有无相应抗体以及效价的动态变化,作为某些传染病的辅助诊断主要适用于抗原性较强的病原和病程较长的传染病的诊断因一般采取病人血清进行试验，故称血清学诊断.要求：双份血清判断：后期比早期效价高4倍以上方法直接凝集实验补体结合实验中和试验乳胶凝集实验ELISA——酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验第二节细菌感染的特异性预防特异性防治是给机体注射或服用病原微生物抗原或特异性抗体，以达到预防和治疗疾病的目的,这种方法称为人工免疫,包括人工主动免疫和人工被动免疫.一、人工主动免疫概念：将疫苗或类毒素接种于人体，刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答，从而对相应病原体感染产生特异性预防作用的措施。（一）疫苗1死疫苗：已死,多次接种,剂量大,副反应明显2活疫苗（减毒活疫苗）：（一）疫苗2活疫苗（减毒活疫苗）：活,无毒或弱毒,接种一次,剂量小,副作用小,免疫力持久.严防回复毒力活疫苗与死疫苗的比较活疫苗死疫苗接种次数1次2-3次接种量小较大接种反应轻重免疫效果较好,维持1-5年差,维持0.5-1年毒力回升有可能不可能安全性有潜在危险性安全性好疫苗稳定性相对不稳定相对稳定保存不易保存易保存3亚单位疫苗:利用保护性抗原,不含核酸,无毒性、可避免回复突变。（一）疫苗4基因工程疫苗:如把HBsAg基因插入酵母细胞中，成功制备乙型肝炎疫苗。优点：安全、经济、可批量生产缺点：技术要求高（一）疫苗5重组载体疫苗:将编码某一抗原的基因转入减毒的病毒或细菌而制成的疫苗。痘苗病毒为常用载体。为活疫苗的一种特殊形式。（一）疫苗6核酸疫苗（DNA疫苗）是将编码保护性抗原的基因重组到真核表达载体上，然后将重组的质粒DAN直接注射入宿主体内，外源基因在体内所表达的抗原能刺激机体产生免疫应答。优点：免疫效果好、可同时诱导体液和细胞免疫、免疫应答持久、制备简单、成本低廉、可联合免疫。缺点：安全？（一）疫苗（二）类毒素（toxoid）类毒素是外毒素经0.3-0.4%甲醛处理后,失去毒性仍保持抗原性的生物制品.如白喉类毒素、破伤风类毒素等,还可与死疫苗一起制成联合疫苗,如DPT二、人工被动免疫概念:输入含有特异性抗体免疫血清、纯化免疫球蛋白或细胞因子等免疫制剂，使机体立即获得免疫力的过程，称人工被动免疫.可用于紧急预防和治疗。类毒素（无毒抗原）外毒素（极毒抗原）抗毒素（抗毒抗体）免疫动物脱毒0.3-0.4%甲醛抗毒素-----动物血清中提取的免疫球蛋白丙种球蛋白-----人类免疫球蛋白其他免疫制剂﹡干扰素-主要为INF-γ,通过产生炎症反应和活化Mφ增强机体对胞内寄生菌的抵抗能力﹡IL-2-能刺激T细胞增殖,增强细胞免疫功能﹡集落刺激因子、LAK细胞等这些免疫制剂在抗菌免疫中应用不多，主要试用于一些病毒性疾病和肿瘤人工自动免疫和人工被动免疫的比较区别要点主动免疫被动免疫免疫物质抗原抗体或CK接种次数1-3次1次免疫出现时间慢,2-4周快,立即免疫持续时间长,数月-数年短,2-3周主要用途预防治疗或紧急预防C7课堂检测题(20s/题，同桌分奇偶数答题）1．属于人工自动免疫的生物制品（）A白喉抗毒素B破伤风类毒素C细胞因子D胸腺素E白细胞介素2．下列哪种生物制品用于人工被动免疫()A卡介苗B麻疹减毒活疫苗C乙肝疫苗D胎盘丙种球蛋白E类毒素*3．一个从未进行过破伤风免疫接种的人目前有可能感染这种细菌,医生决定对他进行被动免疫,应该注射（）A破伤风类毒素B破伤风抗毒素C破伤风外毒素D混合的人丙种球蛋白E血液4．下列哪种生物制品对人既是抗原又是抗体（）A类毒素B卡介苗(BCG)C动物免疫血清D转移因子E活疫苗*5．下列哪项属于人工主动免疫()A注射丙种球蛋白预防麻疹B接种卡介苗预防结核C注射免疫核糖核酸治疗恶性肿瘤D注射CK治疗肿瘤E骨髓移植治疗白血病6、细菌感染的血清学诊断中，通常采取双份血清检测，要确认现症感染，需要恢复期或一周后血清抗体效价比早期A升高4倍以上（含4倍）B升高2倍以上C升高4倍以上D降低4倍以上（含4倍）E降低2倍以上*7.类毒素刺激机体后产生的特异性免疫应答物质是（）A干扰素B抗毒素C补体D乙型溶素E细胞因子15．细菌标本的采集与送检错误做法是（2）A根据病原菌不同而采集不同标本B标本最好在使用抗生素之前采集C尽量采取病变明显部位的材料D用于分离的标本均需冷藏快送E采局部标本时应先用消毒剂，避免杂菌污染*A通过胎盘或初乳B接种抗毒素C接种疫苗D患传染病后E注射丙种球蛋白*12.自然自动免疫获得方式（）14．人工自动免疫获得方式（）11.人工被动免疫获得方式（多）13.自然被动免疫获得方式（）第三节细菌感染的治疗原则何时用？怎样用？WHO的统计结果表明，中国有1/2的儿童一旦出现咳嗽、流鼻涕的症状，就使用抗生素进行治疗。对全国83万名0～13岁儿童支气管哮喘患病情况调查显示，94%以上的哮喘儿童应用抗菌药物治疗，多数为盲用或滥用。www.medinfect.com滥用抗菌药物表现种种－资料我国有50%的人生病时使用抗生素，但事实上只有25%的患病者需要使用抗生素。我国门诊感冒患者约有75％应用抗生素；外科手术应用抗生素的情况则高达95％；我国住院患者的抗生素应用率为79％，这一数字远高于英国的22％和各国平均水平30％。www.medinfect.com滥用抗菌药物表现种种－资料不送检验标本，没有药敏试验，长期“经验用药”，你有足够的经验吗？病毒感染者常规使用：预防？“保险”？无知？其他？忽视毒副反应的滥用：肝肾毒性、药物热首选三代、四代头孢，是对还是错？首选碳青霉烯类——所谓“一次搞定”，是对还是错？滥用抗菌药物表现种种－表现·无菌手术的滥用:术前、术中、术后各个环节的滥用：剂量、时间、预防？·无依据地滥用：如不明原因发热、病毒感染（谈SARS治疗）、局部疼痛·无指征地联合用药：保险？经验？·抗感染治疗中忽视支持治疗·抗结核药物单用，或疗程不足滥用抗菌药物表现种种－表现·不恰当联用:如头孢菌素与大环内酯类药物联用（有争议？）·错误联用:氧哌嗪青霉素＋派拉西林合用16天（同一药物，只是名字、厂家不同）·无知用药：庆大霉素与奈替米星合用，同属氨基糖苷类药合用，加重了耳肾毒性·胡乱用药：颈部无菌手术预防性使用头孢他定8g/d，10天，出院后带红霉素www.medinfect.com滥用抗菌药物表现种种－举例该患者药物使用剂量小于正常健康人耐受临床试验最大剂量（2.4g），排除中毒；患者过去曾经使用过林可霉素2.4g，静脉滴注,未见异常，排除单纯过敏反应所致。通过标准化输液泵给药试验发现，该药的可能致死输注速度为20.04mg／min，而该患者的给药速度是致死速度的3倍！提示患者死因与滴速过快有密切关系。www.medinfect.com滥用抗菌药物表现种种－举例1女性患者，静脉滴注林可霉素1.8g/250ml，0.5小时内滴注完毕，滴注结束时猝死，其滴速是每分钟59.76mg。林可霉素具有神经肌肉接头阻滞作用,与麻醉药、肌松药联合应用时应该减量,否则可因协同作用而易引起呼吸抑制,甚至致死。而本例一次使用林可霉素1.2g，剂量偏大,应该0.6g间隔8－12小时重复使用。提示,患者的死亡可能与林可霉素剂量过大和林可霉素与麻醉药、肌松药不良相互作用有关。www.medinfect.com滥用抗菌药物表现种种－举例１患者因急性阑尾炎术后静脉滴注林可霉素1.2g/500m1预防感染，滴注完毕后，呼吸衰竭、休克死亡。庆大霉素的肾毒性明显，屡有报道一般用该药不可超过14天！用药中要进行肾功能监测必要时应作血药浓度监测www.medinfect.com滥用抗菌药物表现种种－举例1男性患者，44岁，因急性胰腺炎入院，给予庆大霉素24万单位，每日一次，静脉滴注，共29天，最终因急性肾功能衰竭治疗无效死亡。罗氏芬可以肌肉注射，也可以静脉推注，常规推注剂量每次2g，本例计量过大，推注速度？多数麻醉药能够导致组织胺释放，故诱导麻醉后使用抗生素经常出现皮疹本例是否与过敏反应有关上海某医院一患者因对头孢类抗生素过敏死亡的病例我院还出现术中胸腔用罗氏芬灌洗出现休克的案例www.medinfect.com滥用抗菌药物表现种种－举例1男性患者，55岁，因脑胶质瘤拟行手术，诱导麻醉后给予罗氏芬4g静脉推注，数分钟血压下降、心律减慢，至心跳骤停。经胸外按压心跳恢复。手术被迫中止。该患者推注罗氏芬过程中还出现皮肤荨麻疹。农民防治病虫害在养殖业，抗生素作为饲料添加剂被广泛使用我国每年生产约700吨喹诺酮类，一半以上被养殖业用掉中国每年要消耗大约6,000吨抗生素，用以喂食牲畜。另外：家庭清洁卫生用品，肥皂、沐浴液、清洁剂等中都含有抗生素：去污还是灭菌，为什么要灭菌？上述情况是否构成抗生素滥用、是否诱导细菌耐药？www.medinfect.com滥用抗菌药物表现种种－举例