常见肿瘤动物模型一览

适用于讲座演讲授课培训等场景常见肿瘤动物模型一览常见肿瘤动物模型一览肿瘤动物模型一、自发性肿瘤动物模型二、诱发性肿瘤动物模型三、移植性肿瘤动物模型及其研究方法四、人体肿瘤异种移植性肿瘤模型一、自发性肿瘤动物模型定义：实验动物不经人为实验处理而自然发生的肿瘤成为自发性肿瘤实验动物选择：高发病率的实验动物一般选用小鼠mouse常用肿瘤模型小鼠肿瘤自然发生率自发性肿瘤动物模型的优点自然发生肿瘤发生学与细胞学特点与人类肿瘤相似2.便于慢性治疗及综合治疗3.发生条件自然可通过细致观察研究发现新的环境致癌因素及其他致癌因素；可以着重观察遗传因素在肿瘤发生中的作用自发性肿瘤动物模型的缺点肿瘤发生情况参差不齐难以短时间内获得大量肿瘤材料耗时长耗资大发生肿瘤的动物肿瘤生长速度差异大难以评价二、诱发性肿瘤动物模型定义：使用致癌因素Carcinogens在实验条件下诱发动物发生肿瘤的动物模型原理：利用外源性致癌因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和高增殖活性形成肿瘤用于诱发实验性肿瘤的动物种类很多以啮齿动物的使用最多、应用最广包括各种大鼠、小鼠、豚鼠等诱发性肿瘤模型动物选择物理方法：放射性物质致瘤用放射线照射或局部注射放射性同位素化学方法：使用化学致癌物如苯并芘benzpyrene、甲基胆蒽MC、联苯胺benzidine、亚硝胺类nitrosamine、黄曲霉素类aflatoxin等生物方法：用能诱发动物肿瘤的病毒致癌如：小鼠白血病病毒SV40病毒用转基因的方法诱发动物产生肿瘤可根据启动子类型的不同选择不同的发瘤器官如用乳球蛋白启动子的SV40T抗原的转基因小鼠可诱发乳腺癌或胰腺癌MMTV-Wnt-1转基因小鼠高发乳腺癌诱发性肿瘤动物模型建立方法原位诱发致癌物直接与动物靶组织或靶器官接触而诱发该组织或器官发生肿瘤异位诱发将与致癌物接触后的动物组织或器官埋置于该动物或另一正常动物皮下而产生的该组织或器官的肿瘤诱发性肿瘤动物模型建立方法致癌物致癌物1.涂抹法皮肤癌2.经口给药法消化道或消化腺3.注射法4.气管灌注法肺癌5.穿线法6.埋藏法诱发性肿瘤模型——致癌物给予途径1.肺癌Carcinomaofthelung简述：在实验功物身上诱发肺癌要比诱发其他肿瘤困难得多诱癌率低呼吸道给药的方法常常诱发多种肺外肿瘤而不是肺肿瘤方法：①二乙基硝胺DEN诱发小鼠肺癌：小鼠每周皮下注射1％DEN水溶液1次每次剂量为56mg／kg；②乌拉坦诱发肺腺癌：小鼠A系1-1.5月龄每次每只腹腔注入马拉坦生理盐水液0.1-0.3ml间隔3-5日再注共注2-3个月每只小鼠用量约为100mg诱发性肿瘤模型——举例特点：①DEN总量达868mg观察时间为100天发癌率可达40％DEN总量达1176mg观察时间为半年时发癌率可达94％其中支气管鳞状细胞癌占41％②乌拉坦注后3个月肺腺癌发生率为100％且多数为多发性诱发肺肿瘤的部位和组织分型与人类肺肿瘤相近似2.食管癌Carcinomaofesophagus简述：亚硝胺在体内经过代谢产生重碳烷使核酸或其他分子发生烷化而致癌．不对称亚硝胺口服或胃肠外给药均能诱发大鼠食管癌方法：①甲基苄基亚硝胺MBNA诱发食管癌：将1％MBNA溶液加在少量的粉末状饲料中搅拌均匀出1月龄以上Wistar大鼠自由摄食．结药量每天0.75～1.5mg/kg②二烃黄樟素诱发大鼠食管癌模型：在大鼠饲料中加入微量1/2500～1/10000黄樟素喂养大鼠诱发率达20％一70％特点及应用：MBNA诱发的食管癌可见食管鳞状细胞癌的组织但很少发生转移；亚硝胺致癌性较强大剂量1次给药即可致癌3.肝癌Carcinomaoftheliver简述：常用口服致肝癌的物质有乙基亚硝胺DEN4-2甲基氨基偶氮苯DBA、2-乙酰氨基酸2AAF．亚胺基偶氮甲苯OAAT和黄曲霉素方法：①DEN诱发大鼠肝癌：取体重250g左右的封闭群大鼠给与0．25％DEN水溶液0．25-1mL灌胃或稀释10倍放在饮水瓶中自由饮水剂量为每天2-10ml/kg喂养半年左右②黄曲霉素诱发大鼠肝癌：每月饲料中含0．001～0.015mg/kg混入饲料中喂6个月左右特点及应用：DEN诱发大鼠致癌率为70％．DBA诱癌率为60％黄曲霉素诱发大鼠肝癌发生率为80％此种方法从病因学角度分析与人体肿瘤较为近似故此类模型常用于肿瘤特点的深入研究4.宫颈癌Carvicalcarcinoma用穿线法将附有0.1mg二甲基胆蒽DMC的棉沙线结穿入雌性小白鼠的宫颈部并固定缝线观察半年左右处死动物取宫颈组织三.移植性肿瘤动物模型及其研究方法定义：模型是指将动物或人体肿瘤移植到同种或异种动物体内连续传代而形成移植性肿瘤动物的肿瘤实验动物选择：移植性肿瘤常用动物为小鼠、大鼠和地鼠肿瘤细胞的选择：筛选抗癌药物时最好选用3类瘤株及肉瘤、腹水型肿瘤和白血病株在众多移植性肿瘤中小鼠Lewis肺癌、小鼠黑色素瘤B16及小鼠白血病P388是目前最受重视和应用最广的接种方法无菌操作1.实体瘤制备瘤块冻存的瘤株瘤源动物7~10d增殖获得瘤块移入宿主体内给动物接种受体动物实体瘤接种法：瘤块接种法、瘤细胞悬液接种法、培养细胞接种法、活细胞接种方法等瘤块接种法选取接种后7~10d生长状态良好的瘤源动物颈椎脱臼处死消毒操作部位皮肤切开皮肤剥离出接种用的瘤块剔除非肿瘤组织和坏死组织选取生长良好而无变性坏死、淡红色黑色素瘤则呈黑色或黑紫色、鱼肉装的瘤组织在无菌平皿内剪成2mm3小块平皿放置在冰块上平皿内放置少许灭菌的PBS或其它营养液用无菌套管针抽吸瘤块接种于同种受体动物腋窝皮下接种部位皮肤应先消毒也可取出肿瘤后切成小块在受体动物的腋下剪开一个小口用无齿眼科镊夹取瘤块送入切口内腋窝部皮肤松弛能允许肿瘤生长的较大宿主动物的寿命也可延长接种操作的时间尽可能缩短从瘤块取材到接种结束一般应在30min内完成瘤细胞悬液接种法每次接种的动物数量较多时可采用此法具体方法是：无菌操作取出瘤块将数个瘤块混合后剪成小块放入玻璃匀浆器中加无菌生理盐水向一个方向转动研磨后经滤网过滤加生理盐水稀释成1:3~1:4肿瘤g：生理盐水ml的瘤细胞悬液用台盼兰染色法计数活细胞数用1ml注射器注射到接种部位每个接种点接种0.2ml一般含1×106~1×107个细胞数通常接种到腋窝皮下每只动物可选用多个接种点瘤细胞悬液接种法将对数生长期细胞用0.25%胰蛋白酶消化脱壁后用PBS或者生理盐水以1000r/min离心10min洗涤2次洗掉细胞中胰蛋白酶和培养液中血清等成分用台盼蓝拒染法计数活细胞数用生理盐水将肿瘤稀释成一定浓度的细胞悬液细胞悬液置于冰上使用1ml注射器在每个接种点接种0.2ml含1×106~1×107个细胞应尽快注射到接种部位2.腹水瘤肿瘤细胞的冻存与复苏对肿瘤细胞或瘤株进行冷冻保存可以使其得以长期使用防止退化或变异保存不同代细胞的特征一般在液氮中保存1~2年细胞存活率可达80%~90%1.冻存方法：取对数生长期增殖旺盛的细胞胰蛋白酶消化、离心、洗涤用含7份培养液、2份小牛血清、1份DMSO配成1~5*106个/ml的细胞悬液转入细胞冻存管将冻存管于4℃放置30min-20℃放置4h-70℃过夜然后放入液氮中2.复苏方法：取出冻存管迅速放入38~40℃水浴中并不停摇动使其在一分内全部融化500~800r/min离心5min弃上清加入培养液转入培养瓶内培养次日更换培养液以后按常规培养四.人体肿瘤异种移植性肿瘤模型这种模型使用人的肿瘤细胞在病理组织形态和遗传特征等方面均与人类肿瘤相同用这种模型可以比较直接的研究人类肿瘤的生物学特性及抗肿瘤药物常用的宿主动物：裸小鼠和C57BL/6小鼠裸小鼠作为移植宿主实验动物：在SPF屏障系统内繁殖生长的BALB/c裸小鼠6~8周龄体重21~22g瘤源：来源大致分两类一类是人的肿瘤细胞株另一类是源于人体肿瘤组织快的癌细胞常用的人癌裸鼠细胞株、接种方法和最佳生长期为:结肠癌HCT-8匀浆3周、胃癌MGC-803组织块4~5周、肝癌BEL-7402组织块4周、小细胞肺癌LTEP-SM1组织块4~5周、乳腺癌MCF-7组织块4~5周等操作方法例：人胃腺癌SGC-7901：1.超净台内将移植瘤剪成2~3mm3大小的瘤块用套管针接种在BALB/c裸小鼠右侧腋窝皮下2.接种24h后随机分组开始给予受试药进行实验治疗试验周期6周左右3.停药次日称体重剥取肿瘤并称重计算瘤重抑制率观察指标与疗效评价：1.动物在接种肿瘤后6周左右形成1g以上的瘤块平均瘤重则 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明移植肿瘤成功2.如出现20%小鼠的瘤重小于400mg则表示肿瘤生长不良3.在药物治疗期间如给药组小鼠死亡率超过20%或剥取肿瘤后平均体重下降超过15%自身对照表示药物存在毒性应当减量重新实验4.药效可根据给药后瘤重抑制率来评价瘤重抑制率大于30%并经统计学处理组间差异具有统计学意义时表示该受试药有苗头重复3次如疗效稳定评定该药有一定疗效注：肿瘤模型形成时间较长需30~40d甚至更长在异种移植瘤实验中还有一种正位移植即将人癌组织或细胞按其在人体内的原发部位接种于相应的器官有别于通常的皮下接种异位接种免疫功能抑制的大鼠作为移植宿主实验动物：体重120~160g的Wistar大鼠操作方法例：人胃癌细胞株：1.大鼠分笼饲养皮下注射具有免疫抑制作用的阿糖胞苷200mg/kg体重2d后用10Gy1000rad60Co全身照射照射后的大鼠饲养于洁净环境中每日紫外线灯照射1h自由摄食饮水饮水中加土霉素1mg/ml2.将人胃癌细胞株调至1×106个/ml细胞悬液台酚蓝拒染法 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 癌细胞存活率后每只鼠皮下注射0.5ml含5×105个细胞细胞悬液3.接种后每日观察肿瘤生长情况肿瘤生成后取瘤组织进行组织病理学检查结果：一般情况下接种3~5d形成肿瘤移植成功率可达85%移植成功后可用以观察受试药的疗效Thanks ppt 关于艾滋病ppt课件精益管理ppt下载地图下载ppt可编辑假如ppt教学课件下载triz基础知识ppt 常用编辑图使用方法1.取消组合2.填充颜色3.调整大小选择您要用到的图标单击右键选择取消组合右键单击您要使用的图标选择填充选择任意颜色拖动控制框调整大小商务图标元素商务图标元素商务图标元素商务图标元素商务图标元素商务图标元素商务图标元素商务图标元素商务图标元素商务图标元素