巴戟天配方颗粒鉴别初步研究

【摘要】目的为解决巴戟天配方颗粒在不具饮片外形后品种的真伪鉴别和质量优劣评价等重大技术问题。方法采用薄层色谱法、紫外光谱线组法和红外光谱法分别对不同批次的巴戟天配方颗粒进行研究。结果薄层色谱斑点清晰能与对照药材色谱对应;紫外光谱线组上的吸收峰数目及峰位值相同,重现性良好;红外光谱法操作简便,快捷,重现性良好。结论研究的方法可有效地控制巴戟天配方颗粒的质量。【Abstract】ObjectiveTosolvethetechnicalproblemsofauthenticationandqualitystandardsinspectionofMorindaparticulateformulations.MethodsDifferentbachesofMorindaparticulateformulationswereresearchedbythin-layerchromatography(TLC),ultraviolet(UV)spectrumgroup-linemethodandfouriertransforminfraredspectroscopy(FTIR).ResultsSpotsofTLCwereclearincorrespondencewiththoseofthecontolcrudemedicines.AbsorptionpeaknumbersandvaluesinUVspectrumweresameanditsreproducibilitywasgood.FTIRwassimple,fastandhadgoodreproducibility.ConclusionThesemethodsusedinthisstudycancontolthequalityofMorindaparticulateformulationseffectively.【Keywords】Morindaparticulataformulations;Thin-layerchromatography;Ultravioletspectrumgroup-line;Fouriertransforminfraredspectroscopy基金项目:国家“十五”重大科技专项“创新药物和中药现代化”课题(项目编号:2001BA701A38)中药配方颗粒是以符合炮制规范的单味中药饮片为原料,采用现代制药工业的先进工艺和方法,经提取、浓缩、干燥、制粒制成一定规格供医疗机构临床配方使用的制成品,是中药饮片的一种补充形式,可供临床医生代替中药饮片使用。变传统中药汤剂的大包饮片用砂锅合煎、过滤饮服等繁杂操作为规范化工业大生产、小包装、水冲即服。既保持了原中药饮片的药性、药味和药效,又具有不需煎煮、疗效确切、安全方便等优点,是传统中药饮片与时俱进的产物,是“源于饮片,高于饮片”的现代中药汤剂。巴戟天为常用药材,又名鸡肠风、鸡眼藤、三角藤等,味甘、辛,性微温。具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效,主治阳萎遗精、宫冷不孕、月经不调、风湿痹痛、筋骨痿软等症。《中国药典》2005年版一部收载巴戟天为茜草科植物巴戟天(MorindaofficinalisHow)的干燥根[2],主要分布于广东、广西、海南省区的热带和亚热带地区,广东省高要县和德庆县为该中药的道地产区,是我国著名的“四大南药”之一。为了解决巴戟天配方颗粒在不具饮片外形后品种的真伪鉴别和质量优劣评价等重大技术问题,通过对巴戟天配方颗粒进行薄层色谱法、紫外光谱线组法[1]和红外光谱法鉴别研究,从而为巴戟天配方颗粒质量 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 制定奠定基础。1仪器与试药1.1仪器CAMAGAutomaticTLCSampler4全自动薄层自动点样仪(瑞士珈玛);CAMAGReprostar3薄层成像系统(瑞士珈玛);硅胶G薄层层析玻璃板(德国默克);SHIMADZUUV-2501PC型紫外分光光度计(日本岛津);Nicolet6700傅立叶变换红外光谱仪(美国赛默飞世尔);Ez0MNIC8.0软件;YP-2压片机(上海)。1.2试药巴戟天配方颗粒(批号0411019、0501072、0602035、0706032、0710084、0807044)由广东一方制药有限公司提供。对照品:巴戟天对照药材由中国药品生物制品检定所提供。试剂:光谱纯KBr粉末(英国BDH);水为蒸馏水;其余试剂均为分析纯。2薄层色谱鉴别称取各批次巴戟天配方颗粒各2g,加乙醇30ml冷浸过夜,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取巴戟天对照药材4g,加水100ml,煮沸30min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇30ml,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版第一部附录VIB)试验,吸取上述溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以二甲苯-甲酸乙酯-正己烷-甲醇-甲酸(20∶10∶8∶0.5∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点(如图1)。3紫外光谱线组鉴别3.1供试品溶液的制备3.1.1水提液称取各批次巴戟天配方颗粒各1g,分别置于50ml容量瓶中,加水约45ml,超声处理15min,放冷,加水至刻度,摇匀,滤过,分别精密吸取续滤液1ml于10ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,即得。图1巴戟天配方颗粒薄层鉴别图1、批号04110192、批号05010723、批号06020354、批号07060325、批号07100846、批号08070447、巴戟天对照药材3.1.2石油醚提取液称取各批次巴戟天配方颗粒各0.5g,分别置于25ml容量瓶中,加石油醚约20ml,超声处理15min,放冷,加石油醚至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。3.1.3无水乙醇提取液称取各批次巴戟天颗粒各0.25g,分别置于25ml容量瓶中,加无水乙醇约20ml,超声处理15min,放冷,加无水乙醇至刻度,摇匀,过滤,分别精密吸取续滤液5ml于10ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,即得。3.2紫外光谱的测定取上述各种溶液适量,置于1cm石英比色皿中,以各自的纯溶剂为空白对照,测定200～400nm之间的紫外光谱图[1](见图2～10)。图2水提取液的紫外谱线图图3石油醚提取液的紫外谱线图图4无水乙醇提取液的紫外谱线图图5批号0411019的三种溶剂紫外谱线图图6批号0501072的三种溶剂紫外谱线图图7批号0602035的三种溶剂紫外谱线图图8批号0706032的三种溶剂紫外谱线图图9批号0710084的三种溶剂紫外谱线图图10批号0807044的三种溶剂紫外谱线图3.3结果从上面紫外光谱图中可看出巴戟天配方颗粒的水提液、石油醚提取液和无水乙醇提取液的紫外光谱各不相同;其中水提液在(279±2)nm处有吸收峰;石油醚提取液在(270±2)nm、(218±1)nm处各有一吸收峰;无水乙醇提取液在(280±2)nm、(227±2)nm、269nm处有吸收峰(见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1)。表1巴戟天配方颗粒的三种溶剂提取液紫外谱线组图峰位值最大吸收峰位值(nm)λmax(H2O)λmax(EtOH)λmax(Pet)279±2280±2270±2227±2218±1269  3.4重现性试验按供试品制备方法,制备同一批供试品(批号:0411019)的三种溶剂提取液各5份,分别进行紫外光谱测定,测得谱线图。结果可知同批样品同一溶剂的紫外谱线图基本一致,说明重现性良好。3.5结论根据巴戟天配方颗粒的水、石油醚、无水乙醇提取液的紫外谱线组图峰位值与峰型,可为巴戟天配方颗粒的鉴别提供依据。4红外光谱鉴别4.1供试品的制备取本品1mg～2mg,加入约200mg在120℃干燥4h的KBr粉末,在研钵中研磨、混匀,转移到模具中,在低真空下用9.81GPa左右的压力,经1～2min将样品压成透明的薄片[3]。压片的厚度约1～2mm。4.2光谱测定将上述样品置于傅立叶变换红外光谱仪(DTGS 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 器,分辨率4cm、扫描次数32次,扫描时实时扣除水和CO2的干扰)中,测定光谱范围在4000～400cm之间的红外光谱图(结果如下)。图11巴戟天配方颗粒六批次的红外光谱图图12巴戟天配方颗粒红外特征光谱图图13巴戟天配方颗粒红外重现性光谱图4.3结果从图中可看出各批号巴戟天配方颗粒的红外光谱基本相似,在408cm、423cm、517cm、574cm、704cm、762cm、776cm、817cm、862cm、930cm、1020cm、1080cm、1155cm、1241cm、1372cm、1423cm、1457cm、1639cm、2926cm、3400cm各处附近均有吸收峰。在1080cm、1423cm附近均有多糖类的-OH峰,在1639cm附近有-C=C-基团的吸收峰,2926cm附近出现-CH2的吸收峰。共有峰及其具体峰位与整体峰形对于巴戟天配方颗粒的鉴别具有综合性特征意义。4.4重现性试验按样品制备方法,对每一批号样品均压5个片,进行红外光谱测定。结果可知同一批号的各片样品所测得的红外谱图基本一致,说明重现性良好。4.5结论根据巴戟天配方颗粒的红外光谱图的吸收峰位及峰型,可为巴戟天配方颗粒的鉴别提供依据。5小结与讨论5.1巴戟天配方颗粒的薄层色谱鉴别对《中国药典》2005年版一部巴戟天项下鉴别方法进行了修改,样品与对照药材均用乙醇冷浸过夜,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液及对照药材溶液,以二甲苯-甲酸乙酯-正己烷-甲醇-甲酸(20︰10︰8︰0.5︰1)为展开剂,预饱和15min,展开,取出,晾干后,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。5.2巴戟天配方颗粒的紫外谱线组鉴别为了提高紫外光谱鉴别的可靠性和灵敏性,在单一紫外光谱线法的基础上,根据巴戟天配方颗粒中化学成分的复杂性及各种化学成分的极性大小不同,并着眼于巴戟天配方颗粒中化学成分的整体效应,改单一溶剂为多种溶剂,改单一紫外光谱线为多条紫外光谱线组,以其紫外光谱线组的三条谱线上总的吸收峰数目及峰位值,可达到鉴别巴戟天配方颗粒的目的。通过对六批次供试品的三种溶剂(水、石油醚、无水乙醇)紫外光谱线组图进行测定与分析,可知紫外光谱线组图法可鉴别巴戟天配方颗粒,在同一溶剂提取液中,吸收峰出现在相同的位置上。能全面地反映出巴戟天配方颗粒所含成分的整体效应差异性、特征性、灵敏性和方法的统一性。5.3巴戟天配方颗粒的红外光谱鉴别《中国药典》采用红外光谱法鉴别药物的依据为:在规定的相同方法条件下,测得相同物质的红外光谱图一致。从上述所测红外光谱图可知,各批次供试品红外光谱图基本一致,说明是同一种配方颗粒。因此可利用不同批次供试品重复多次测定得到一个巴戟天配方颗粒的红外光谱标准,据此可用来鉴别巴戟天配方颗粒。红外光谱法特有的宏观指纹特性与其技术操作简便快速,供试品处理简单,可用于中药配方颗粒的质量评价,继而实现快速在线质量控制,具有很重要的实践意义。5.4讨论通过对此三种方法进行比较,可知三者各有优劣:薄层色谱法应用较广,对设备要求较低,但供试品的前处理操作比较复杂、耗费时间长;紫外光谱组线法谱图明确、简单,但利用多种溶剂提取,对环境有一定的污染;红外光谱法操作简单、快捷,耗时较短、所用试剂较少,但其谱图解析比较困难。综上所述,薄层色谱法、紫外谱线组法、红外光谱法均能用于鉴别巴戟天配方颗粒,这三种方法将成为鉴别配方颗粒的一种有效途径。