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生物工艺学知识点精编版MQSsystemofficeroom【MQS16H-TTMS2A-MQSS8Q8-MQSH16898】生物工艺学知识点精编版生物工艺学知识点第一章绪论1、生物工艺学(biotechnology):又称为生物技术,它是应用自然科学及工程学原理,依靠生物作用剂(biologicalagents)的作用将物料进行加工以提供产品或社会服务的技术。特点:多学科和多技术的结合、生物作用剂(生物催化剂)的参与、应用大量高、精、尖设备。。2、生物催化剂是游离的或固定化的细胞或酶的总称。生物催化剂特点:优点:①常温、常压下反应②反...

生物工艺学知识点精编版
MQSsystemofficeroom【MQS16H-TTMS2A-MQSS8Q8-MQSH16898】生物工艺学知识点精编版生物工艺学知识点第一章绪论1、生物工艺学(biotechnology):又称为生物技术,它是应用自然科学及 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 学原理,依靠生物作用剂(biologicalagents)的作用将物料进行加工以提供产品或社会服务的技术。特点:多学科和多技术的结合、生物作用剂(生物催化剂)的参与、应用大量高、精、尖设备。。2、生物催化剂是游离的或固定化的细胞或酶的总称。生物催化剂特点:优点:①常温、常压下反应②反应速率大③催化作用专一④价格低廉缺点:稳定性差控制条件严格易变异(细胞)生物反应过程实质是利用生物催化剂以从事生物技术产品的生产过程(processengineering)。3、生物技术研究的主要内容:基因工程(DNA重组技术,geneengineering)、细胞工程(cellengineering)、酶工程(enzymeengineering)、发酵工程(fermentationengineering)、蛋白质工程(proteinengineering)、第二章菌种的来源1、工业生产常用的微生物细菌、酵母菌、霉菌、放线菌、担子菌、藻类。2、分离微生物新种的过程大体可分为采样、增殖、纯化和性能测定。含微生物材料的预处理方法:物理方法(加热);化学方法(pH);诱饵法。诱饵技术:将固体基质加到待检的土壤或水中,待其菌落长成后再铺平板。分离的效率影响因素:1)培养基的养分;2)pH;3)加入的选择性抑制剂。3、高产培养基成分的选择准则:制备一系列的培养基,其中有各种类型的养分成为生长限制因素(C、N、P、O);使用一聚合或复合形式的生长限制养分;避免使用容易同化的碳(葡萄糖)或氮(NH4+),它们可能引起分解代谢物阻遏;确定含有所需的辅因子(Co2+,Mg2+,Mn2+,Fe2+)加入缓冲溶液以减小pH变化。4、代谢控制发酵(MetabolicControlfermentation):用人工诱变的方法,有意识地改变微生物的代谢途径,最大限度地积累产物,这种发酵形象地称为代谢控制发酵,最早在氨基酸发酵中得到成功应用。5、菌种的衰退 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 观现象有哪些?目的产物的产量下降营养物质代谢和生长繁殖能力下降发酵周期延长抗不良环境的性能减弱6、菌种的衰退的原因菌种保藏不当提供不了当的条件或不利的条件经诱变得到的新菌株发生回复突变7、菌种的复壮方法:纯种分离通过寄主体进行复壮淘汰已衰退的个体8、菌种的保藏的原理根据菌种的生理生化特点,人工创造条件,使孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低,以减少其变异。一般可通过保持培养基营养成分在最低水平,缺氧状态,干燥和低温,使菌种处于“休眠”状态,抑制其繁殖能力。9、菌种的保藏方法:A斜面冰箱保藏法B沙土管保藏法C石蜡油封存法D真空冷冻干燥保藏法E液氮超低温保藏法第三章菌种选育1、常用菌种选育方法(1)自然选育:是指在生产过程中,不经过人工处理,利用菌种的自发突变(spontaneousmutation)而进行菌种筛选的过程。特点:自发突变的频率较低,变异程度不大。所以该法培育新菌种的过程十分缓慢。(2)诱变育种:是利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群,促进其突变率大幅度提高,然后采用简便、快速和高效的筛选方法,从中挑选少数符合育种目的的突变株,以供生产实践或科学研究使用。诱变育种的理论基础是基因突变。常用诱变剂:物理诱变剂、化学诱变剂(碱基类似物、与碱基反应的物质、在DNA分子中插入或缺失一个或几个碱基物质)、生物诱变剂(3)分子育种(DNA重组、基因工程):用人为的方法将所需的某一供体生物的遗传物质DNA分子提取出来,在离体条件下切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后导入某一受体细胞中,让外来的遗传物质在其中进行正常的复制和表达,从而获得新物种的一种崭新的育种技术。(4)杂交育种(Hybridization):常规杂交育种(Hybridization):一般是指人为利用真核微生物的有性生殖或准性生殖或原核微生物的接合、F因子转移、转导和转化等过程,促使两个具有不同遗传性状的菌株发生基因重组,以获得性能优良的生产菌株。原生质体融合技术:通过人工方法,使遗传性状不同的两个细胞的原生质体发生融合,并产生重组子的过程,亦称为“细胞融合”(cellfusion)。原生质体融合的基本过程:原生质体形成、原生质体融合、原生质体的再生。3、工程菌的不稳定性表现质粒的不稳定(质粒的丢失、重组质粒的DNA片段脱落)、表达产物的不稳定第三章微生物的代谢调节1、微生物代谢调节方式代谢流向的调控分为代谢物的合成和代谢物的降解;通过快速启动蛋白质的合成和有关的代谢途径,平衡各代谢物流和反应速率来适应外界环境的变化。代谢速度的调控分为酶量(粗调)(酶合成的诱导和酶合成的阻遏)和酶活(细调)(酶活性的激活、酶活性的抑制)反馈阻遏是转录水平的调节,产生效应慢;影响催化一系列反应的多个酶反馈抑制是酶活性水平调节,产生效应快。只对是一系列反应中的第一个酶起作用底物对酶的影响称为前馈。产物对酶的影响称为反馈。2、微生物初级代谢调节包括酶活调节、酶合成调节、遗传控制(1)酶活性的调节(细调):一定数量的酶,通过其分子构象或分子结构的改变来调节其催化反应的速率。酶活调节的影响因素包括:底物和产物的性质和浓度、压力、pH、离子强度、辅助因子以及其他酶的存在等等。特点是反应快速。酶活性的调节包括:酶活性的激活和酶活性的抑制(反馈抑制)(2)酶合成的调节:通过调节酶合成的量来控制微生物代谢速度的调节机制。这类调节在基因转录水平上进行,对代谢活动的调节是间接的、缓慢的(3)酶合成的阻遏:在某代谢途径中,当末端产物过量时,微生物的调节体系就会阻止代谢途径中包括关键酶在内的一系列酶的合成,从而彻底地控制代谢,减少末端产物生成,这种现象称为酶合成的阻遏。末端代谢产物阻遏:由于某代谢途径末端产物的过量积累而引起酶合成的(反馈)阻遏。分解代谢物阻遏:当细胞内同时存在两种可利用底物(碳源或氮源)时,利用快的底物会阻遏与利用慢的底物有关的酶合成。这种阻遏并不是由于快速利用底物直接作用的结果,而是由这种底物分解过程中产生的中间代谢物引起的,所以称为分解代谢物阻遏(过去被称为葡萄糖效应)。3、改变细胞膜通透性的方法A限制培养基中生物素浓度在1~5mg/L,控制细胞膜中脂质的合成;B加入青霉素,抑制细胞壁肽聚糖合成中肽链的交联;C加入表面活性剂如吐温80或阳离子表面活性剂(如聚氧化乙酰硬脂酰胺),将脂类从细胞壁中溶解出来,使细胞壁疏松,通透性增加;D控制Mn2+、Zn2+的浓度,干扰细胞膜或细胞壁的形成;E可以通过诱变育种的方法,筛选细胞透性突变株。5、人工控制微生物代谢的两种手段:(1)生物合成途径的遗传控制(2)发酵条件的控制6.谷氨酸棒杆菌(生物素缺陷型)生产谷氨酸的调控第四章微生物次级代谢与调节1、次级代谢产物:某些微生物在生命循环的某一个阶段产生的物质,它们一般是在菌生长终止后合成的。其生物合成至少有一部分是与核内和核外的遗传物质有关,同时也与这类遗传信息产生的酶所控制的代谢途径有关。微生物产生的次级代谢物有抗生素、毒素、色素和生物碱等。2、初级与次级代谢途径相互连接次级代谢物通常是由初级代谢中间体经修饰后形成的修饰初级代谢中间体的三种生化过程生物氧化与还原、生物甲基化、生物卤化3、前体:指加入到发酵培养基中的某些化合物,它能被微生物直接结合到产物分子中去,而自身的结构无多大变化有些还具有促进产物合成的作用。中间体是指养分或基质进入一途径后被转化为一种或多种不同的物质,他们均被进一步代谢,最终获得该途径的终产物。4、次级代谢物生物合成的原理①一旦前体被合成,在适当条件下它们便流向次级代谢物生物合成的专用途径。②在某些情况下单体结构单位被聚合,形成聚合物。这些特有的生物合成中间体产物需做后几步的结构修饰,修饰的程度取决于产生菌的生理条件。有些复杂抗生素是由几个来自不同生物合成途径组成的。第五章发酵培养基1、培养基通常指人工配制的供微生物生长、繁殖、代谢和合成所需产物的营养物质和原料,同时,培养基也为微生物等提供除营养外的其它生长所必需的环境条件2、发酵培养基的要求①培养基能够满足产物最经济地合成②发酵后所形成的副产物尽可能的少③培养基的原料应因地制宜,价格低廉;且性能稳定,资源丰富,便于采购运输,适合大规模储藏,能保证生产上的供应。④所用培养基应能满足总体工艺的要求,如不应影响通气、提取、纯化及废物处理等。3、工业上常用的碳源:葡萄糖、乳糖、淀粉、蔗糖工业上常用的氮源:无机氮源:氨水,铵盐,硝酸盐等。有机氮源:玉米浆、豆饼粉、花生饼粉、棉籽粉、鱼粉、酵母浸出液等。生理酸性物质,如硫酸铵。生理碱性物质,如硝酸钠。提供生长因子的农副产品原料:1)玉米浆2)麸皮水解液3)糖蜜4)酵母:可用酵母膏、酵母浸出液或直接用酵母粉。产物促进剂是指那些非细胞生长所必需的营养物,又非前体,但加入后却能提高产量的添加剂。4、发酵培养基的设计和优化方法正交试验设计、均匀设计、响应面分析正交试验设计:利用正交表来安排与分析多因素试验的一种设计方法。它是由试验因素的全部水平组合中,挑选部分有代表性的水平组合进行试验,通过对这部分试验结果的分析,了解全面试验的情况,找出最优的水平组合。正交实验数据分析,见教材P112-114例题,表4-16,同时确定因素的主次顺序、各因素的优水平、各因素水平的最优组合。小数点后保留一位。第六章发酵培养基灭菌和空气净化在发酵工业生产中,为了保证纯种培养,在生产菌种接种培养前,要对培养基、空气系统、消泡剂、流加物料、设备、管道等进行灭菌,还要对生产环境进行消毒,防止杂菌和噬菌体的大量繁殖。1.微生物热阻:微生物在某一特定条件下(主要是温度和加热方式)下的致死时间。2.对数残留定律中各符号的意义。3.理论灭菌时间的计算间歇实罐灭菌时间的计算连续灭菌的灭菌时间计算:4.灭菌温度的选择:随着温度升高,灭菌速率常数增加的倍数大于培养基中营养成分的分解速率常数的增加倍数。即当灭菌温度升高时,微生物杀灭速度提高,培养基营养成分破坏的速度减慢。5.影响培养基灭菌的因素:所污染杂菌的种类、数量、灭菌温度和时间,培养基成分、pH值、培养基中颗粒、泡沫等对培养基灭菌也有影响。6.无菌空气:指通过除菌处理使空气中含菌量降低至一个极低的百分数,从而能控制发酵污染至极小机会。此种空气称为“无菌空气”。7.介质过滤除菌是使空气通过经高温灭菌的介质过滤层,将空气中的微生物等颗粒阻截在介质层中,而达到除菌的目的。是大多数发酵厂广泛采用的方法。按除菌机制可分为:绝对(表面)过滤和深层介质过滤。介质过滤除菌的机理:空气流通过这种介质过滤层时,借助惯性碰撞、拦截滞流、静电吸附、扩散等作用,将其尘埃和微生物截留在介质层内,达到过滤除菌目的。第七章种子的扩大培养1、种子扩大培养:指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子2、种子扩大培养的目的与要求(1)种子扩培的目的①接种量的需要②菌种的驯化③缩短发酵时间、保证生产水平(2)种子的要求①菌种细胞的生长活力强,移种至发酵罐后能迅速生长,延迟期短②生理性状稳定③菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求④无杂菌污染⑤保持稳定的生产能力。3、种子罐级数:是指制备种子需逐级扩大培养的次数,取决于菌种生长特性、孢子发芽及菌体繁殖速度、所采用发酵罐的容积。种子罐级数受发酵规模、菌体生长特性、接种量的影响。级数大,难控制、易染菌、易变异,管理困难,一般2~4级。4、种子制备分两个阶段:实验室种子制备阶段生产车间种子制备阶段5、种龄:是指种子罐中培养的菌丝体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。接种量:是指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。通常接种量:细菌1-5%,酵母菌5-10%,霉菌7-15%,有时20-25%青霉素生产的种子制备过程:安瓿管→斜面孢子→大米孢子→一级种子→二级种子→发酵第八章发酵工艺控制1、微生物发酵的生产水平取决于生产菌种本身的性能和合适的环境条件。2、发酵过程的代谢变化从产物形成来说,代谢变化就是反映发酵中的菌体生长、发酵参数的变化(培养基和培养条件)和产物形成速率这三者之间的关系。在分批培养过程中根据产物生成是否与菌体生长同步的关系,将微生物产物形成动力学分为①生长关联型和②非生长关联型。3、发酵方式(1)补料-分批发酵:指分批培养过程中,间歇或连续地补加新鲜培养基的培养方法。优点在于使发酵系统中维持很低的基质浓度。低基质浓度的优点:①可以除去快速利用碳源的阻遏效应,并维持适当的菌体浓度,使不至于加剧供氧的矛盾;②克服养分的不足,避免发酵过早结束。(2)半连续发酵:是指在补料-分批发酵的基础上,间歇地放掉部分发酵液的培养方法。优点:①可以除去快速利用碳源的阻遏效应,并维持适当的菌体浓度,使不至于加剧供氧的矛盾;②克服养分的不足,避免发酵过早结束;③缓解有害代谢产物的积累。(3)连续发酵:指培养基料液连续输入发酵罐,并同时放出含有产品的发酵液的培养方法。在这样的环境中培养,菌的生长就受到所提供基质的限制,培养液中的菌体浓度能保持一定的稳定状态。与传统的分批发酵相比,连续培养有以下优点:①维持低基质浓度:可以除去快速利用碳源的阻遏效应,并维持适当的菌体浓度,使不至于加剧供氧的矛盾;②避免培养基积累有毒代谢物;③可以提高设备利用率和单位时间的产量,节省发酵罐的非生产时间;④便于自动控制。4、发酵控制参数按性质分类:物理参数、化学参数、生物参数按检测手段分类:①直接参数:⑴在线检测参数⑵离线检测参数②间接参数5、发酵热发酵热就是发酵过程中释放出来的净热量。Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q显-Q辐射生物热(biologicalheat)是菌体生长过程中直接释放到体外的热能,使发酵液温度升高。搅拌热(agitationheat)是搅拌器引起的液体之间和液体与设备之间的摩擦所产生的热量。6、发酵过程pH值的一般变化规律(1)生长阶段:菌体产生蛋白酶水解培养基中的蛋白质,生成铵离子,使pH上升至碱性;随着菌体量增多,铵离子的消耗也增多,另外糖利用过程中有机酸的积累使pH值下降。(2)生产阶段:这个阶段pH值趋于稳定。(3)自溶阶段:随着养分的耗尽,菌体蛋白酶的活跃,培养液中氨基氮增加,致使pH又上升,此时菌体趋于自溶而代谢活动终止。7、引起发酵液pH值异常波动的因素pH值的变化决定于所用的菌种、培养基的成分和培养条件pH下降:①培养基中碳、氮比例不当。碳源过多,特别是葡萄糖过量,或者中间补糖过多加上溶氧不足,致使有机酸大量积累而pH下降;②消泡剂加得过多;③生理酸性物质的存在,铵被利用,pH下降。pH上升:①培养基中碳、氮比例不当。氮源过多,氨基氮释放,使pH上升;②生理碱性物质存在;③中间补料氨水或尿素等碱性物质加入过多。8、临界氧浓度(criticalvalueofdissolvedoxygenconcentration):指不影响菌的呼吸所允许的最低氧浓度。如对产物形成而言便称为产物合成的临界氧浓度。呼吸强度又称氧比消耗速率,是指单位质量的干菌体在单位时间内所吸取的氧量,以QO2表示,单位为mmolO2/(g干菌体·h)。耗氧速率又称摄氧率,是指单位体积培养液在单位时间内的吸氧量,以r表示,单位为mmolO2/(L·h)。9、引起溶氧异常下降,可能有下列几种原因:①污染好气性杂菌,大量的溶氧被消耗掉,可能使溶氧在较短时间内下降到零附近,如果杂菌本身耗氧能力不强,溶氧变化就可能不明显;②菌体代谢发生异常现象,需氧要求增加,使溶氧下降;③某些设备或工艺控制发生故障或变化,也可能引起溶氧下降,如搅拌功率消耗变小或搅拌速度变慢,影响供氧能力,使溶氧降低。10、泡沫的形成及其对发酵的影响在大多数微生物发酵过程中,通气、搅拌以及代谢气体的逸出,再加上培养基中糖、蛋白质、代谢物等表面活性剂的存在,培养液中就形成了泡沫。形成的泡沫有两种类型:一种是发酵液液面上的泡沫,气相所占的比例特别大,与液体有较明显的界限,如发酵前期的泡沫;另一种是发酵液中的泡沫,又称流态泡沫(fluidfoam),分散在发酵液中,比较稳定,与液体之间无明显的界限大量的泡沫引起的负作用:发酵罐的装料系数减少、氧传递系统减小;增加了菌群的非均一性;造成大量逃液,增加染菌机会;严重时通气搅拌无法进行,菌体呼吸受到阻碍,导致代谢异常或菌体自溶;消泡剂的添加将给提取工序带来困难。泡沫的消除调整培养基中的成分(如少加或缓加易起泡的原料)或改变某些物理化学参数(如pH值、温度、通气和搅拌)或者改变发酵工艺(如采用分次投料)来控制,以减少泡沫形成的机会。采用菌种选育的方法,筛选不产生流态泡沫的菌种,来消除起泡的内在因素。采用机械消泡或消泡剂来消除已形成的泡沫。常用的消泡剂有4大类:天然油脂类、脂肪酸和酯类、聚醚类、硅酮类11、造成染菌的主要原因设备渗漏空气带菌种子带菌灭菌不彻底技术管理不善第十章 下游加工过程概论1、下游技术(工程)(downstreamprocessing):对于由生物界自然产生的或由微生物菌体发酵的、动植物细胞组织培养的、酶反应等各种生物工业生产过程获得的生物原料,经提取分离、加工并精制目的成分,最终使其成为产品的技术。2.发酵液的特点1)含水多,产物含量低;2)含菌体蛋白;3)溶有原来培养基成分;4)相当多的副产物和色素;5)易被杂菌污染或使产物进一步分解;6)易起泡,粘性物质多。3、整个下游加工过程应遵循下列四个原则1)时间短;2)温度低,(选择在生物物质的温度范围内);3)pH适中;4)严格清洗消毒(包括厂房、设备及管路,注意死角)。4、一般下游加工过程可分为4个阶段1)培养液(发酵液)的预处理和固液分离;2)初步纯化(提取);3)高度纯化(精制);4)成品加工。5、下游加工过程的一般 流程 快递问题件怎么处理流程河南自建厂房流程下载关于规范招聘需求审批流程制作流程表下载邮件下载流程设计 第十二章发酵液的预处理和固液分离方法1、改善发酵液过滤特性的物理化学方法:调酸(等电点)、热处理、电解质处理、添加凝聚剂、添加表面活性物质、添加反应剂、冷冻-解冻及添加助滤剂等。2、凝聚——指在电解质作用下,由于胶粒之间双电层电排斥作用降低,电位下降,而使胶体体系不稳定的现象;常用的凝聚剂电解质有:硫酸铝Al2(SO4)3?18H2O(明矾);氯化铝AlCl3?6H2O;三氯化铁FeCl3;硫酸亚铁FeSO4·7H2O;石灰;ZnSO4;MgCO3絮凝——指在某些高分子絮凝剂存在下,基于桥架作用,使胶粒形成较大絮凝团的过程。工业上使用的絮凝剂可分为三类:1)有机高分子聚合物,如聚丙烯酰胺类衍生物、聚苯乙烯类衍生物;2)无机高分子聚合物,如聚合铝盐、聚合铁盐等;3)天然有机高分子絮凝剂,如聚糖类胶粘物、海藻酸钠、明胶、骨胶、壳多糖、脱乙酰壳多糖等。目前最常见的高分子聚合物絮凝剂有机合成的聚丙烯酰胺(polyacrylamide)类衍生物3、杂蛋白的去除方法有沉淀法、变性法、吸附法4、固液分离的方法:重力沉降、浮选、旋液分离、介质过滤、离心。5、根据过滤机理,过滤操作可分为澄清过滤和滤饼过滤。第十三章细胞破碎1、细胞破碎的阻力:细菌破碎的主要阻力:肽聚糖的网状结构,网状结构越致密,破碎的难度越大,革兰氏阴性细菌网状结构不及革兰氏阳性细菌的坚固;酵母细胞壁破碎的阻力:主要决定于壁结构交联的紧密程度和它的厚度;霉菌细胞壁中含有几丁质或纤维素的纤维状结构,其强度比细菌和酵母菌的细胞壁有所提高。2、常用破碎方法机械法:珠磨法(固体剪切作用)、高压匀浆法(液体剪切作用)、超声破碎法(液体剪切作用)、X-press法(固体剪切作用)。非机械法:酶溶法(酶分解作用)、化学渗透法(改变细胞膜的渗透性)、渗透压法(渗透压剧烈改变)、冻结融化法(反复冻结-融化)、干燥法(改变细胞膜渗透性)3、破碎率的测定方法1)直接测定法2)目的产物测定法3)导电率测定法第十四章沉淀法(Precipitation)1、固相析出技术:通过加入某种试剂或改变溶液条件,使生化产物溶解度降低,以固体形式(沉淀和晶体)从溶液中沉降析出的分离纯化技术。结晶法:在固相析出过程中,析出物为晶体称为结晶法。沉淀法:在固相析出过程中,析出物为无定形固体称为沉淀法。常用的沉淀法:盐析法、有机溶剂沉淀法和等电点沉淀法等。2、盐析(Saltinducedprecipitation):在高浓度的中性盐存在下,蛋白质(酶)等生物大分子物质在水溶液中的溶解度降低,产生沉淀的过程。原因如下:1)无机离子与蛋白质表面电荷中和,形成离子对,部分中和了蛋白质的电性,使蛋白质分子之间的排斥力减弱,从而能够相互靠拢;2)中性盐的亲水性大,使蛋白质脱去水化膜,疏水区暴露,由于疏水区的相互作用导致沉淀;Ks盐析法:在一定pH和温度下,改变体系离子强度进行盐析的方法;β盐析法:在一定离子强度下,改变pH和温度进行盐析;常用的盐析用盐:硫酸铵、硫酸钠,磷酸盐,柠檬酸盐。3、有机溶剂沉淀:在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂,降低溶质的溶解度,使其沉淀析出。原理:(1)降低了溶质的介电常数,使溶质之间的静电引力增加,从而出现聚集现象,导致沉淀。(2)有机溶剂的水合作用,降低了自由水的浓度,降低了亲水溶质表面水化层的厚度,降低了亲水性,导致脱水凝聚。常用的有机溶剂沉析剂:乙醇:沉析作用强,挥发性适中,无毒常用于蛋白质、核酸、多糖等生物大分子的沉析;丙酮:沉析作用更强,用量省,但毒性大,应用范围不广;4、等电点沉淀:调节体系pH值,使两性电解质的溶解度下降,析出的操作称为等电点沉淀。原理:蛋白质是两性电解质,当溶液pH值处于等电点时,分子表面净电荷为0,双电层和水化膜结构被破坏,由于分子间引力,形成蛋白质聚集体,进而产生沉淀。第十五章膜过滤法1、膜过滤法指以压力为推动力,依靠膜的选择性,将液体中的组分进行分离的方法。基本原理是筛孔分离过程。在压差的推动下,原料液中的溶剂和小的溶质粒子从高压的料液侧透过膜到低压侧,所得到的液体一般称为滤出液或透过液,而大的粒子组分被膜截留。包括微滤(MF)、超滤(UF)、纳滤(NF)和反渗透(RO)四种过程。在工业上用得最广的膜材料是醋酸纤维素和聚砜。浓差极化:当溶剂透过膜,而溶质留在膜上,使膜面浓度增大,并高于主体中浓度,这种浓度差导致溶质自膜面反扩散至主体中,这种现象称为浓差极化。在超滤中,为减少浓差极化,通常采用错流操作。膜的污染:膜在使用中,尽管操作条件保持不变,但通量仍逐渐降低的现象。污染原因:膜与料液中某一溶质的相互作用;吸附在膜上的溶质和其它溶质的相互作用。膜污染的消除:污染必须通过清洗的办法才能消除。经清洗后如纯水通量达到或接近原来水平,则认为污染已消除。减轻膜污染的方法1)预处理2)改变膜的表面性质市售的超滤器大致有四种型式:管式、中空纤维式、螺旋卷绕式和平板式。2.将下列表示相同意义的词连线concentrationfactor萃取separationfactor离子交换extraction超滤reverseosmosis膜分离membraneseparation离心ion-exchange分离因子cross-flowfiltration下游技术centrifugation反渗透ultra-filtration浓缩率错流萃取微滤第十六章溶剂萃取和浸取1、溶剂萃取利用一种溶质组分(如产物)在两个互不混溶的液相(如水相和有机溶剂相)中竟争性溶解和分配性质上的差异来进行分离操作的。2、“相似相溶”原理分子之间可以有两方面的相似:一是分子结构相似,如分子的组成、官能团、形态结构的相似;二是能量(相互作用力)相似,如相互作用力有极性的和非极性之分,两种物质如相互作用力相近,则能互相溶解。与水“相似”的物质易溶于水,与油“相似”的物质易溶于油就是相似相溶原理的表现。3、分配定律和分离因数(1)分配定律:在一定温度一定压力的条件下,溶质分配在两个互不相溶的溶剂中,达到平衡时溶质在两相中的活度之比为一常数。如果是稀溶液,活度可用浓度代替,则达到平衡时溶质在两相中的浓度之比为一常数。称之为分配系数K,(2)分离因数3、乳化和去乳化乳化:一种液体(分散相)分散在另一种不相混溶的液体(连续相)中的现象。乳化的结果可能形成两种形式的乳浊液:一种是水包油型(O/W),另一种为油包水型(W/O)。生产过程出现的乳浊液是水包油型(O/W),还是油包水型(W/O),主要由表面活性剂的性质决定。4、双水相萃取:在一定条件下,水相也可以形成两相(即双水相系统)甚至多相。于是有可能将水溶性的酶、蛋白质等生物活性物质从一个水相转移到另一水相中,从而完成分离任务。常用聚合物双水相系统:聚乙二醇-葡聚糖、聚乙二醇-无机盐系统双水相萃取的优点:1)使固液分离和纯化两个步骤同时进行,一步完成;2)适合热敏物质的提取,主要是胞内酶;3)亲水性聚合物加入水中,形成两相,在这两相中,水分都占大比例(85~95%),这样生物活性蛋白质在两相中不会失活,且以一定比例分配于两相中。第十七章离子交换法1、离子交换原理及分类离子交换树脂是一种不溶于酸、碱和有机溶剂的固态高分子材料。是一类带有官能团的网状结构的高分子化合物,其结构有三部分组成:不溶性的三维空间网状骨架,连接在骨架上的官能团和官能团所带的相反电荷的可交换离子。骨架上的活性离子在水溶液中发生离解,可在较大的范围内自由移动,扩散到溶液中,同时,在溶液中的同类型离子也能从溶液中扩散到骨架的网格或孔内。当这两种离子浓度差较大时,就产生一种交换的推动力,使它们之间产生交换作用,利用这种浓度差的推动力使树脂上的可交换离子发生可逆交换反应。树脂按活性离子分类,活性离子是阳离子(和阳离子发生交换)就称为阳离子交换树脂;如果是阴离子,则称为阴离子交换树脂。2、树脂的命名根据离子交换树脂官能团的性质,将其分为强酸(0)、弱酸(1)、强碱(2)、弱碱(3)、螯合(4)、两性(5)及氧化还原(6)等7类。3、离子交换树脂的理化性能指标1)外观;2)交联度;3)化学稳定性;4)机械强度;5)交换量4、影响离子交换树脂选择性的因素1)离子价数离子交换树脂总是优先选择高价离子,而低价离子被吸附时则较弱。阳离子被吸附的顺序为:Fe3+>Al3+>Ca2+>Mg2+>Na+,阴离子顺序为:柠檬酸根>硫酸根>硝酸根2)溶液浓度的影响树脂对离子交换吸附的选择性,在稀溶液中比较大,而在浓溶液中选择性较小。3)离子的水化半径水化半径较小的离子优先吸附。4)有机溶剂的影响有机溶剂会使树脂对有机离子的选择性降低,而容易吸附无机离子,可利用有机溶剂从树脂上洗脱难洗脱的有机物质。5)树脂与交换离子间的辅助力凡能与树脂间形成辅助力,如氢键、范德华力等辅助力的离子,树脂对其吸附力就大;反之,能破坏这些辅助力的溶液就能容易地将离子从树脂上洗脱下来。5、离子交换树脂的工作过程:1)树脂预处理:新树脂装入柱后,先用去离子水浸泡12h左右,使树脂充分吸水膨胀,再用2-3倍树脂体积的10%左右食盐水浸泡4h以上。用水洗净残留的NaCl,再根据树脂类型和使用所需要的型号分别用酸和碱处理,最后调pH值至所需范围。2)上柱交换交换方式:采用顺流和逆流进行3)洗脱:用亲和力更强的同性离子取代树脂上吸附的目的产物。4)树脂的再生:先用清水洗涤,然后用再生剂再生,最后用清水洗至所需pH值。系统是一种连续的离子交换系统目前已成功的应用在各种不同的产业领域中。ISEP系统采用多柱(20/30交换柱)吸附以及在稳定状态下连续运行。不需要备用设备;离子交换树脂的再生也不必中断正常的生产。ISEP系统可以处理杂质浓度较高的物料,保证产品具有稳定的成分和浓度;采用多通道逆向流动再生方式,减少了离子交换树脂及、再生剂和洗涤水的用量。第十八章色谱分离法1、色谱分离(ChromatographicResolution,CR)利用多组分混合物中各组分物理化学性质(如吸附力、分子极性、分子形状和大小、分子亲合力、分配系数等)的差别,使各组分以不同程度分布在固定相和流动相中。当多组分混合物随流动相流动时,由于各组分物理化学性质的差别,而以不同的速率移动,使之分离。分类吸附色谱分离是指混合物随流动相通过固定相(吸附剂)时,由于固定相对不同物质的吸附力不同而使混合物分离的方法。分配色谱是利用混合物中各物质在两液相中的分配系数不同而分离。根据固定相和流动相的极性与非极性的差别,分配色谱可分为正相色谱和反相色谱。离子交换色谱是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,由于混合物中不同溶质对交换剂具有不同的亲合力而将它们分离。凝胶色谱以凝胶为固定相,是一种根据各物质分子大小不同而进行分离的色谱技术,又称为分子筛色谱(MolecularSieveChromatography,MSC)、空间排阻色谱或尺寸排阻色谱(SizeExclusionChromatography,SEC)。第十九章蒸发、蒸馏和结晶1、真空蒸发:冷凝器和蒸发器溶液侧的操作压力低于大气压、此时系统中的不凝性气体必须用真空泵抽出。目的:降低溶液的沸点。优点:(1)溶液沸点低,可用温度较低的低压蒸汽或废蒸汽作加热蒸汽。(2)溶液沸点低,同样蒸汽所需的传热面小。(3)沸点低,有利于处理高温下易分解和变质的热敏性物料。(4)蒸发器的操作温度低,系统的热损失小。2、多效蒸发:第一个蒸发器(称为第一效)中蒸出的二次蒸汽用作第二个蒸发器(第二效)的加热蒸汽,第二个蒸发器蒸出的二次蒸汽用作第三个蒸发器(第三效)的加热蒸汽,依此类推。3、蒸发器的分类:分为膜式蒸发器和非膜式蒸发器两大类。膜式蒸发器又分为升膜蒸发器、降膜蒸发器、旋转刮板蒸发器、板式蒸发器。4、酒精发酵醪液蒸馏的理论基础是拉乌尔定律。拉乌尔定律:混合液中,蒸气压高的组分,在气相中的含量总是比液相中的高;反之,蒸气压低的组分,在液相中的含量总是比气相中的高。5、饱和曲线和过饱和曲线饱和溶液:溶液恰好饱和,溶质既无溶解也无结晶,即溶质与溶液处于平衡状态,此溶液称为饱和溶液;未饱和溶液:若添加固体则固体溶解;过饱和溶液:超过饱和点的溶质迟早要从溶液中沉淀出来。要使溶质从溶液中结晶出来,须首先使溶液成为过饱和状态,也即必须设法产生一定的过饱和度作为推动力。6、溶液的过饱和度与结晶的关系:AB为饱和曲线;CD为过饱和曲线。AB和CD将图分为:稳定区、介稳区和不稳区。稳定区:溶液尚未饱和,没有结晶的可能。介稳区:也不会自发产生晶核,但如已有晶核,则晶核长大而吸收溶质直至浓度回落到饱和线上。不稳区:能自发产生晶核。如E点是溶液的原始末饱和状态,EH是冷却结晶线,F点是饱和点,不能结晶,到达G点时,自发产生晶核。7、结晶包括三个过程:形成过饱和溶液;晶核形成;晶体生长。8、接触成核(碰撞成核):新生的晶核是晶浆(有晶体存在的结晶溶液)中已有的晶体颗粒,在结晶器中与其他固体接触碰撞时产生的晶体表层的碎粒。其中较大的就是新的晶核。优点:①动力学级数较低,即溶液过饱和度对成核影响较小。②在低过饱和度下进行,能得到优质结晶产品。③产生晶核所需要的能量非常低,被碰撞的晶体不会造成宏观上的磨损。在工业生产中,接触成核有以下4种方式:(1)晶体与搅拌螺旋桨间的碰撞;(2)湍流下晶体与结晶器壁间的碰撞;(3)湍流下晶体与晶体的碰撞;(4)沉降速度不同,晶体与晶体的碰撞。其中以第1种方式为主。第十一章典型发酵产品介绍1、酿造酒包括黄酒、啤酒、葡萄酒,酒精含量比较低。蒸馏酒主要指白酒、白兰地等。蒸馏酒的酒精含量高。2、红葡萄酒:用果皮带色的葡萄带皮发酵制成,酒色呈深红、鲜红、紫红或宝石红。白葡萄酒用白葡萄或红皮白肉葡萄的果汁制成,酒色呈浅黄、禾秆黄、金黄色或近似无色。3、白兰地商标上的英文缩写:(ExtraOld)酒龄(即贮陈期) 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 不低于10年。4、啤酒生产中麦汁煮沸的目的:蒸发水分,浓缩麦汁;钝化全部酶和麦汁杀菌;蛋白质变性和絮凝;酒花有效组分的浸出;排除麦汁中特异的异杂臭气。5、白酒的四大香型:米香型:桂林三花酒;发酵完成后经过反复二至三次蒸馏,酒精度数较高,民间过去叫“三蒸酒”、“三熬酒”。酿酒师们总结出了“观花论酒”的经验。当酒度在55°至60°时,由于液体表面张力,酒面晃动便泛起数层酒花,经久不散。酿酒师们说“起花了,三花!”就接酒。酱香型(茅型酒)茅台酒;原料为高粱,曲为纯小麦制高温曲,八次蒸料,八次下曲,八次发酵,八次蒸馏(但仅取酒7次,因为第一次蒸馏出的不作正品,泼回酒窖重新发酵)。浓香型(庐型酒):庐州老窖——产于四川泸州市。千年窖,万年糟,传统的老五甑生产工艺,混蒸,主体香为己酸乙酯。。纯小麦制大曲,以糯玉米为原料。根据酒的质量可分特曲、头曲、二曲和三曲。五粮液采用五种粮食(高梁、大米、糯米、小麦、玉米)为原料。清香型(汾型酒):汾酒——产于山西汾阳县杏花村,二次发酵二次勾兑。前次发酵21天,蒸馏,加酒糟,再发酵21天,再蒸馏。清蒸二次清工艺,乙酸乙酯和乳酸乙酯两者的结合为主体香。6、青霉素生产工艺(1)常用菌种为产黄青霉。(2)青霉素G的合成途径(2)发酵工艺(3)发酵培养控制①加糖控制一般在残糖将至%左右,pH上升时开始加糖。②补氮及加前体加硫酸铵、氨水或尿素,使发酵液氮源控制在~%。补前体以使发酵液中残余苯乙酰胺浓度为~%。③pH控制加酸或碱自动控制pH,一般为~。④温度控制一般前期25~26℃,后期23℃,以减少后期发酵液中青霉素的降解破坏。⑤通气和搅拌抗生素深层培养需要通气与搅拌。⑥泡沫和消泡可用天然油脂如豆油、玉米油或用化学合成消泡剂“泡敌”(环氧丙稀环氧乙烯聚醚类)来消泡。应当控制其用量并少量多次加入。⑦过滤宜采用鼓式真空过滤器。过滤前加去乳化剂降温。⑧提炼采用溶媒萃取法,醋酸丁酯(BA)作溶媒。⑨脱色采用活性炭进行脱色。过滤。⑩共沸蒸馏或直接结晶7.酶制剂的生产方法:固态发酵法和深层液体培养法枯草杆菌BF-7658液体深层发酵生产α-淀粉酶的发酵控制:A种子制备:孢子培养一般采用马铃薯培养基,于37℃下培养72h,使菌体全部形成孢子即为成熟。种子培养维持罐温37℃,罐压~,10h后加大通风,当菌体处于对数生长期后期,立刻接种至大罐,种子培养一般14h左右。发酵控制:温度37℃,罐压,通气量0~12h控制~,12h后控制在~,发酵后期控制在。发酵培养一般采用补料工艺,补料体积和基础培养基体积一般为1:3左右。从10h左右开始补加,一般前期、后期少,中期大,根据菌体的生长情况来调整。当pH低于,细胞生长粗壮时可酌减;当pH高于,细胞出现衰老并有空胞时可酌增,发酵周期一般为40h。提取:工业上回收α-淀粉酶一般采用硫酸铵盐析法。8.谷氨酸发酵菌种主要是棒状杆菌属、短杆菌属、小杆菌属及节杆菌属的细菌。这些菌都是需氧微生物,都需要以生物素为生长因子。发酵周期一般为30多小时。赖氨酸生产L-赖氨酸易吸收空气中的二氧化碳,很难得到其结晶。因此商品是赖氨酸的单盐酸盐。菌种主要为棒状杆菌属的各种突变株。10、二步发酵法生产维生素C工艺有酸转化工艺和碱转化工艺两种。酸转化设备简单、流程短,但制得的维生素C破坏严重、质量差,设备腐蚀严重,三废多,因此逐渐淘汰。碱转化虽然流程较长、投资大,但产品质量好,故目前绝大部分工厂均采用碱转化工艺。第一步发酵中所用菌种为生黑葡萄糖酸杆菌(Gluconobactermelagenus),简称黑醋菌。最常用的生产菌株为R-30;第二步发酵采用的菌种为由大、小两株细菌组成的混合菌种。小菌为氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacteroxydans),工业生产过程中使用最多的大菌为2980及152混合菌。11、柠檬酸的发酵生产以糖质原料发酵生产柠檬酸的常用菌种是黑曲霉,目前柠檬酸发酵以深层发酵为主。发酵是一个边糖化边产酸的过程,由同一种菌种在同一生活环境中完成,但两过程最适pH不同。最初以糖化为主,控制pH为~。产酸后控制pH为~,为防止pH下降抑制淀粉酶活性,在pH降至时,加入灭菌的碳酸钙乳剂,中和部分酸,使pH回升至左右。但中和剂用量要适度,pH过高则会产生大量杂酸(主要是草酸)。发酵要求温度在31℃左右,太高会产生杂酸,影响柠檬酸收率。发酵时间约4天左右。考试题型:名词解释4题共12分;填空题10题共20分;选择题20题共20分;判断题10题共10分,简答及 计算题 一年级下册数学竖式计算题下载二年级余数竖式计算题 下载乘法计算题下载化工原理计算题下载三年级竖式计算题下载 4题共20分;工艺流程及工艺条件控制题1题10分;正交实验数据分析题1题8分。祝大家取得优异成绩!
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