PI染色检测细胞周期实验步骤

PI染色检测细胞周期实验步骤Documentnumber：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UTPI染色检测细胞周期实验步骤protocol：PI染色检测细胞周期收集细胞：胰酶（含EDTA）消化收集对数生长期细胞（加热处理后损失多的组宜多收集细胞保证细胞有×10*6个），吸取旧培养基到一个新离心管里；少量常温PBS（根据培养皿大小决定量，PBS洗可以保证消化效率）洗2次，清洗的PBS也要收集到上述离心管内【检测凋亡才需收集旧培养基及清洗的PBS】；然后胰酶消化（注意一定要消化完全，显微镜下观察细胞呈单个，而不是成片脱落）后...

Documentnumber：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UTPI染色检测细胞周期实验步骤protocol：PI染色检测细胞周期收集细胞：胰酶（含EDTA）消化收集对数生长期细胞（加热处理后损失多的组宜多收集细胞保证细胞有×10*6个），吸取旧培养基到一个新离心管里；少量常温PBS（根据培养皿大小决定量，PBS洗可以保证消化效率）洗2次，清洗的PBS也要收集到上述离心管内【检测凋亡才需收集旧培养基及清洗的PBS】；然后胰酶消化（注意一定要消化完全，显微镜下观察细胞呈单个，而不是成片脱落）后利用旧培养基中和胰酶；离心(1000r/300g5min)收集细胞沉淀。用预冷的PBS清洗细胞两次。3、固定细胞：用预冷的PBS重悬细胞沉淀，使细胞充分悬浮成单细胞，再将重悬细胞加入预冷的%无水乙醇(乙醇终浓度70%)，吹打混匀以免细胞团聚，4℃固定2H至过夜。4、细胞染色：离心（1000r/300g5min）收集固定的细胞，以的PBS洗细胞一次，离心(第一次实验时用7000rpm才把细胞离心下来，但最后流式结果显示细胞没有碎)再次获取细胞沉淀后加入100μlRNaseA于37℃水浴30min，最后加入400μlPI避光染色30min（常温或4℃均可）【有的试剂盒说明是：每个样本加入500uL染色剂（据样本数，用PBS临时配好总量，其中PI50ug/ml、RNaseA100ug/mL、%）4℃避光染色30分钟】5、流式分析以标准程序用检测，一般计数2-3万个细胞，结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。分析时，使用FL2-w和FL2-A显示，去除联体细胞。

                    本文档为【PI染色检测细胞周期实验步骤】，请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑，
                    图片更改请在作品中右键图片并更换，文字修改请直接点击文字进行修改，也可以新增和删除文档中的内容。 
 该文档来自用户分享，如有侵权行为请发邮件ishare@vip.sina.com联系网站客服，我们会及时删除。

                    [版权声明] 本站所有资料为用户分享产生，若发现您的权利被侵害，请联系客服邮件isharekefu@iask.cn，我们尽快处理。

                    本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权，请谨慎使用。

                    网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传，仅限个人学习分享使用，禁止用于任何广告和商用目的。
                

下载需要：￥18.0 已有0 人下载

立即下载

你可能还喜欢

最新资料

资料动态

专题动态

宇萍

暂无简介~

格式：doc

大小：45KB

软件：Word

页数：0

分类：企业经营

上传时间：2021-10-24

浏览量：16

热点搜索

建设工程申请书（精选7篇）高空飞行相关知识：关于座舱释压日间手术管理流程施工吊篮监理实施细则木鳖子生产工艺规程求职申请表晨光.晨光电梯特种设备主要类别安全风险管控责任清单 2019年电大《个人与团队管理》期末考试真题（含答案）智慧小区智能化停车场管理系统设计方案 2019国家建筑标准设计标准图集目录（城市道路专业） 2022年山东专升本英语真题 SMT常见不良代码 PVC厚度Gauge对照表建设工程申请书（精选7篇）高空飞行相关知识：关于座舱释压日间手术管理流程施工吊篮监理实施细则木鳖子生产工艺规程求职申请表晨光.晨光电梯特种设备主要类别安全风险管控责任清单 2019年电大《个人与团队管理》期末考试真题（含答案）智慧小区智能化停车场管理系统设计方案 2019国家建筑标准设计标准图集目录（城市道路专业） 2022年山东专升本英语真题 SMT常见不良代码 PVC厚度Gauge对照表