HPhe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Tyr–Leu-Val-Cys-GlyGlu-Arg-Gly-Phe-Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-AlaOHB链15710151920212530HGly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Ala-Ser-Val-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-AsnOH15102015A链711621SSSS牛胰岛素的化学结构—S————S——蛋白质是由20多种α-氨基酸按一定的序列通过肽键缩合而成的、具有较稳定构象和一定生物功能的大分子。蛋白质结构化学结构立体结构共价结构初级结构空间结构构象高级结构一级结构二级结构三级结构四级结构第一节通论一、元素组成和分类（掌握）元素组成（）元素组成特点（）（）法的理论基础蛋白质含量=蛋白氮×（）分类据分子组成分（）（）又分别根据（）分为（）二、分子形状和大小（了解）蛋白质形状（）（）长轴/短轴≤5长轴/短轴＞5大小相对分子质量103～106氨基酸残基相对分子质量以110计氨基酸相对分子质量以128计三、功能多样性（熟悉）理论上无数，估计在1010～1012功能多样性决定于分子多样性功能多样性决定生命现象多样性蛋白质的生物学意义（掌握）1、结构例如（）2、催化例如（）3、调节例如（）4、转运例如（）5、运动例如（）6、支架例如（）7、防御和进攻例如（）8、异常功能例如（）9、贮存例如（）一、肽和肽键（重点）一个氨基酸的α-羧基和另一个氨基酸的α-氨基脱水缩合而成的化合物。氨基酸之间脱水后形成的酰胺键称肽键（肽基、肽单位）。H2N－CH－COOH|R1HNH－CH－COOH|R2—————－H2O二硫键－S－S－两个半胱氨酸之间形成第二节肽二、肽的性质（了解）解离短肽基本同氨基酸的双缩脲反应三、天然活性肽（了解）谷胱甘肽（GSH）H2N-CHCH2CH2CO—COOHγ-GluNHCHCO—CH2SHCysNHCH2COOHGly2GSHGSSG巯基酶巯基保护剂胰高血糖素（）部位分泌，（）氨基酸，有（）用脑肽脑啡肽催产素升压素等同上要求多多益善B链HPhe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Tyr–Leu-Val-Cys-GlyGlu-Arg-Gly-Phe-Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-AlaOH15710151920212530HGly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Ala-Ser-Val-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-AsnOH15102015A链711621SSSS牛胰岛素的化学结构—S————S——第三节一级结构的测定五、部分裂解和分离纯化（重点、难点）1、酶法裂解胰蛋白酶精、赖羧基端肽键靡蛋白酶苯丙、酪、色羧基端肽键嗜热菌蛋白酶同糜但为氨基端肽键葡萄球菌蛋白酶谷、天羧基端肽键梭菌蛋白酶精羧基端肽键2、化学法裂解溴化氰蛋羧基端肽键羟胺天甘之间3、分离电泳、层析等六、肽段测序（了解）艾德曼降解法酶解法质谱法核苷酸序列推定法七、顺序确定（了解）一个氨基，末端为1；一个羧基，末端为20，无二硫键。组成为1～20，含量各1个。裂解并测序后得一套切5及其倍数，得4段1234567891011121314151617181920二套切6及其倍数，得4段1234567891011121314151617181920123451920123456161718192067891013141516171878910111211121314151234567891012121314151617181920八、二硫键位置的确定（掌握）对角线电泳法酶解肽链，纸电泳，用过甲酸蒸汽熏蒸滤纸，然后垂直方向二次电泳，则含二硫键的肽段成两个斑点，确定其顺序后，和上步的顺序对照，例1234567891011121314151617181920经鉴定，A顺序为789101112B顺序为131415161718C1顺序为123456C2顺序为19205、10、20为半胱氨酸所以，5、20之间成二硫键BAC2C1（1）用羧肽酶A和B处理该十肽无效（1）的结论是1……9ProPheNH4+、Asp、Glu、Tyr、Arg、Met、Pro、Lys、Ser、（2）胰蛋白酶处理产生两个四肽和游离的Lys（2）的结论是123Arg，Lys，Lys，789Pro或者Lys，Lys，345Arg，789Pro（3）梭菌蛋白酶处理产生一个四肽和一个六肽（3）的结论是Arg在4或6位，同上（4）溴化氢处理产生一个八肽和一个二肽，用单字母符号
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示其序列为NPNP是Asn、Pro（4）的结论是123ArgLysLys7Met，AsnPro或者LysLys345Arg7Met，AsnPro（5）胰凝乳蛋白酶处理产生两个三肽和一个四肽。N-端的胰凝乳蛋白酶水解肽段在中性pH时携带－1净电荷，在pH12时携带－3净电荷（5.1）的结论是3和7一个是Phe，另一个是Tyr（123，ArgLysLys7，MetAsnPro）或者4和7一个是Phe，另一个是Tyr（LysLys34，5Arg7，MetAsnPro）（5.2）的结论是1和2有一个是酸性氨基酸，为Glu；前述的或者是不可能的（5.3）的结论是3是Tyr，则7是Phe（6）的结论是1是Ser综上：该十肽的序列为：Ser•Glu•Tyr•Arg•LyS•Lys•Phe•Met•Asn•Pro（6）一轮Edman降解给出下列的PTH衍生物：SCH2OHONCNCCHH第四节肽链人工合成一、概述（熟悉）氨基酸1掩蔽氨基，活化羧基；氨基酸2掩蔽羧基；R基团的官能团也需掩蔽A1A2↓↓掩蔽激活Y-HN-A1-CO-X＋H2N-A2-CO-Z||R-MR-N↓缩合Y-HN-A1-CO－HN-A2-CO-Z||R-MR-N↓分离，除去α羧基掩蔽剂，改为活化剂Y-HN-A1-CO－HN-A2-CO-X||R-MR-N↓掩蔽羧基的氨基酸3↓缩合↓分离，除去α羧基掩蔽剂，改为活化剂三步循环↓除去所有掩蔽剂多肽（1234……）此合成方法的方向是从()端到()端基团的掩蔽激活见氨基酸性质。除去方法主要有皂化、透析等合成甘丙赖，如何进行？胰岛素人工合成1965年，中国，意义：理论上突破了生物大分子不能人工合成的观念，实践上为人工合成多肽类药物开辟了广阔的前景二、固相肽合成（了解）把第一个氨基酸的羧基连在树脂上，然后加掩蔽了氨基的氨基酸，缩合后洗脱氨基酸，再加第二个，……最后从树脂上水解多肽。固相肽合成方向是从羧基端到氨基端。应先把赖连在树脂上，加丙，缩合，洗脱，再加甘，缩合，洗脱，最后从树脂上水解三肽。
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