文件排版存档编号：[UYTR-OUPT28-KBNTL98-UYNN208]PBS缓冲液配制PBS缓冲液配制磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8gNaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至，最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。NaCl；KCl；Na2HPO4；KH2PO4；加蒸馏水至1000ml，调节pH到（用Na2HPO4或KH2PO4调节）。用于免疫反应时可加入%叠氮钠（100mlPBS）;当试剂中含有辣根过氧化物酶时，严禁使用叠氮钠，可改用%柳硫汞。PBS缓冲液配方PHH2O1000100010001000NaClNa2HPO4NaH2PO4根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。PBS缓冲液称取NaCl8g，KCl，Na2HPO4?12H2O,KH2PO4，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至，加水定容至1L，常温保存备用。PBST缓冲液取300μlTween-20加入PBS100ml中，混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法。十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次~的PBS配方详细1.NaCl137mmol/L，KClL，Na2HPO4L，KH2PO4L2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将pH值调节至，然后加入去离子水将溶液定容至1L。4.高温高压灭菌后，室温保存。注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和mMMgCl2。LPBS(磷酸缓冲液PhosphateBufferSolution，PBS)的配制：甲液：LNa2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠,加蒸馏水至1000ml;乙液：LKH2P04溶液:称取磷酸二氢钾,,加蒸馏水至1000m1。将甲乙液分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下
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:pH甲液ml乙液mI你要配制pH=的PBS，可用甲、乙液各50ml混合即可。
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