第二十章高效液相第1页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日定义:以高压输送流动相,采用高效固定相,及高灵敏度检测器,发展而成的现代液相色谱
分析
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方法。优点:1、柱效高,分离效率高。2、分析速度快(几-几十分钟内即可完成)3、大大提高了灵敏度(紫外检测器最小检测限可达10-9g,荧光检测器最小检测限可达10-12g。4、应用范围广5、分离选择性高第2页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日第一节高效液相色谱法的主要类型和原理一、高效液相色谱法的主要类型LLC,LSC最长见的:化学键合相色谱法离子抑制色谱法离子对色谱法二、化学键合相色谱法(BPC)以化学键合相为固定相的色谱法(键合相色谱法)适用于分离几乎所有类型的化合物。第3页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日(一)正相化学键合相色谱法采用极性键合相为固定相,以非极性或弱极性溶剂作流动相(二)反相化学键合相色谱法(三)反相离子对色谱法三、其他高效液相色谱法(一)离子色谱法(二)手性色谱法(三)亲合色谱法第4页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日第二节高效液相色谱法的固定相和流动相及其选择一、化学键合相色谱法的固定相二、化学键合相色谱法的流动相三、分离条件的选择(一)高效液相色谱中的速率理论H=A+Cmu+smuu(二)正相键合相色谱法的分离条件(三)反相键合相色谱法的分离条件(四)反相离子对色谱法的分离条件四、其他固定相第5页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日第6页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日1、键合型离子交换剂2、手性固定相3、亲和色谱固定相第三节高校液相色谱仪一、输液系统(一)高压输液泵(二)梯度洗脱装置二、分离和进样系统(一)进样器(二)色谱柱第7页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日高效液相色谱仪方框图柱恒温箱自动进样器样品进样器预柱分析柱检测器级分收集器
记录
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器微机贮液瓶泵第8页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日三、检测系统(一)检测器的主要性能(二)紫外检测器(三)荧光检测器第9页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日四、数椐记录处理和计算机控制系统第四节高校液相色谱分析方法一、定性分析方法1、色谱鉴定法2、化学鉴定法3、两谱联用鉴定法二、定量分析方法1、外标法2、内标法第10页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日三、高校液相色谱分离方法的选择第11页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日第12页,共12页,2022年,5月20日,15点55分,星期日