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MTT法测定细胞生长曲线

MTT法测定细胞生长曲线MTT法测定细胞生长曲线 1、取生长状况良好的细胞,常规消化制成单细胞悬液并计数,调整细胞成六个浓度梯度,依次为:5x103、1x104、2x104、3x104、4x104、5x104/ml,均匀接种细胞于96孔细胞培养板,每孔加细胞悬。液200ul,每个浓度组设6个复孔,共接种7块培养板,37℃、5%C02浓度,饱和湿度培养箱中连续孵育24/48/72/96/120/148/172小时后。 2、每孔加入20ulMTT溶液(smg/m1用PBS配),继续孵育4h后终止培养。 3、快速翻转培养板,弃去上清...

MTT法测定细胞生长曲线 1、取生长状况良好的细胞,常规消化制成单细胞悬液并计数,调整细胞成六个浓度梯度,依次为:5x103、1x104、2x104、3x104、4x104、5x104/ml,均匀接种细胞于96孔细胞培养板,每孔加细胞悬。液200ul,每个浓度组设6个复孔,共接种7块培养板,37℃、5%C02浓度,饱和湿度培养箱中连续孵育24/48/72/96/120/148/172小时后。 2、每孔加入20ulMTT溶液(smg/m1用PBS配),继续孵育4h后终止培养。 3、快速翻转培养板,弃去上清液,每孔加入150ulDMSO,振荡10min,使MTT蓝紫色结晶完全溶解。 4、用酶联免疫检测仪于490nm处检测各孔的吸光值(OD值),并以未接种细胞只加培养基孔的吸光值为空白对照调零,取6孔平均值。 5、实验重复3次,以培养“时间”为横轴,“吸光值”为纵轴绘制细胞生长曲线。

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