培养液中酵母菌种群数量的变化
基 础 回 扣
1、酵母菌
酵母菌是单细胞真核生物。
生长周期短,增殖速度快,
还可以用酵母菌作为实验
材料
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研究(探究酵母菌的呼吸方式,判断细胞的死活探究膜的透性)
2、种群数量的变化
种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等
“S”型曲线有一个K值,即环境容纳量。
种群数量的增长也受到许多环境因素(如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等)的影响。
探究过程
1.提出问题:
2.作出假设:
3.设计实验:
4.进行实验:
5.分析结果和
表
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达交流:
6.得出结论:
培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?
酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,随着时间的推移,由于资源和空间有限,呈“S”型增长。
连续培养5天,每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度
各小组汇报实验结果,结合前4天的结果,画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。
酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,但随着时间的推移,由于资源和空间有限,将呈“S”型增长,并最终将全部死亡。
3.设计实验:
①将10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中;
②将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀;
③将试管在28℃条件下连续培养5d;
④每天取样计数酵母菌数量;
⑤分析结果,得出结论。
是否设置对照组和多组重复实验?
如何取样计数?
记录
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表怎样设计?计数时有哪些注意事项?
计数室
计数室(中间大方格)的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为______mm3 ,合_________mL。
1mm
0.1
1×10-4
血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器
计数室
计数室分为25中格(双线边)
每一中格又分为16小格
计数室是由___________个小格组成
25×16=400
如何计数?
五点取样法
样方法
每mL培养液中酵母菌数量=
=A (平均每个中格酵母细胞数)×25×104
×稀释倍数
A1
A2
A5
A3
A4
第 1 天
第 4 天
第 6 天
第 7 天
死亡
酵母菌数量变化记录表
计数时有哪些注意事项?
①从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几次;
如果酵母菌浓度过大,应先稀释。
②对于压在中格界线上的酵母菌,一般只取相邻两边及夹角计数;
③对于已经出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算;已死亡的酵母菌不计数※。
④每个样品一般计数三次,取其平均值。
培养液中酵母菌种群数量的变化
Chart1
1 88
2 196
3 535
4 595
5 2980
6 11040
7 11310
时间/d
酵母菌数量/万个·mL-1
酵母菌种群个体数量变化
Sheet1
时间/天 1 2 3 4 5 6 7
88 196 535 595 2980 11040 11310
Sheet1
时间/d
酵母菌数量/万个·mL-1
酵母菌种群个体数量变化
Sheet2
Sheet3
Chart2
1 102
2 196
3 535
4 595
5 2980
6 11040
7 10310
时间/d
酵母菌数量/万个·mL-1
酵母菌种群个体数量变化
Sheet1
时间/天 1 2 3 4 5 6 7
102 196 535 595 2980 11040 10310
Sheet1
时间/d
酵母菌数量/万个·mL-1
酵母菌种群个体数量变化
Sheet2
Sheet3
死亡
在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么?
培养液配制
灭菌
接种
培养
无菌操作
培养条件
针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”,有人提出了新的问题,某同学按下表完成了有关实验。
试管编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃)
A 10 — 0.1 28
B 10 — 0.1 5
C — 10 0.1 28
温度、营养物质对酵母菌生长的影响
试管编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃)
A 10 — 0.1 28
B 10 — 0.1 5
C — 10 0.1 28
以计数酵母菌为例
(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.
(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.
(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.
(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.
血球计数板的使用
(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.
(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞
(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列
公式
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计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.
3.计算公式
(1)16格×25格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=
100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数
(2)25格x16格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=
80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数
怎样进行酵母菌的计数?
对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算计算中的酵母菌总数,盖玻片下,培养液厚度为0.1mm,可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式:2.5×104x(x为小方格内酵母菌数)
从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么?
本探究需要设置对照吗?如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作;如果不需要,请说明理由。
需要做重复实验吗?
目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,以保证估算的准确性,减少误差。
不需要,本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化,只要分组实验,获得平均数值即可。
不用重复,只要分组实验获得平均值即可。
5、怎样记录结果?记录表怎样设计?
如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应采取怎样的措施?
摇匀试管取1mL酵母菌培养液稀释n倍后,再用血球计数板计数,所得数值乘以n×2.5×104,即为10mL酵母菌液中酵母菌个数。
只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。
7 对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数?
第1天 第2天 第3天 第4天 第5天 第6天 第7天
第1组
第2组
第3组
------
第n组
平均值
设计实验:
A组为实验组,装培养液10 mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃。
B组装培养液10 mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度5℃,与A组形成温度条件对照。
C组不装培养液,只装无菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃,与A组形成营养条件对照。
计数
计数:首先取样,每 天取样时间大体一致,并要遵守无菌操作
规范
编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载
。每次取样前要试管振荡摇匀,正确地使用1mL刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入1支干净的试管里,然后用滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘,待培养液自行渗入并充满网格后,再放在显微镜下进行细胞计数,后立即将数据填到记录表格中。如 记数时发现,细胞数较多,不易分辨,吸取的样液应当稀释。
参考1:一次实验数据记录表
参考2:出A、B、C各个处理的曲线图