实验二十二 显微镜下测量微生物细胞的大小
生物112 周泓兆 1102040226
1、目的
学习并掌握利用显微测微尺测量微生物大小的方法。
2、原理
因为微生物的个体通常只在显微镜下可见,所以其大小的测量也应在显微镜下进行。用来测量微生物大小的工具有目镜和镜台测微尺。镜台测微尺专用于校正目镜测微尺每格的长度,是中央部分刻有精确等分线的载玻片,全长为1mm,等分为100小格,每一小格长为10μm。目镜测微尺的刻度在一个略小于目镜内径的圆玻璃片上,有等分50小格和等分100小格两种,每5小格间有一长线相隔。当将此测微尺放在目镜内观察物象时,可同时看见物象和测微尺,但是配合不同放大倍数的物镜时,目镜测微尺每刻度间的长度会发生变化。所以,目镜测微尺不能直接用来测量微生物的大小,使用前必须利用镜台测微尺进行校正。
3、
材料
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1.菌种:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
2.显微测微尺:镜台测微尺,目镜测微尺
3.其它:18×180mm试管分装9ml,10ml无菌水,无菌滴管,载玻片,盖玻片,吸水纸,擦镜纸,振荡器
4、实验步骤
1.校正目镜测微尺:
(1)安装目镜测微尺:取出目镜,旋开透镜螺旋,将目镜测微尺刻度朝下放入目镜筒,然后旋好螺旋,插入显微镜筒;
(2)置镜台测微尺:将镜台测微尺放在载物台上,使刻度面朝上;
(3)校正:在高倍镜下观察,调准焦距,当看清镜台测微尺后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行,然后移动推动器,是目镜测微尺和镜台测微尺的某一区间的两条刻度线完全重合,再数出两条重合线间各自所占的格数,根据公式得到校正后的目镜测微尺每小格的长度。
目镜测微尺每小格长度(μm)=
2.制备菌悬液:取一环菌加入5ml无菌水中,充分振荡,待用。
3.制酿酒酵母水压片:取一洁净载玻片,在中央滴一滴菌悬液,小心盖上盖玻片,用吸水纸吸干多余液体,千万不要产生气泡;
4.测量酿酒酵母菌体大小:将酿酒酵母水压片放在载物台上,在显微镜下看清菌体后,转动目镜测量酵母细胞菌体的直径。
5.整理:取下目镜测微尺,擦净后收好。
5、结果与讨论
1.将目镜测微尺的校正结果填入下
表
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。
目镜测微尺刻度的校正
物镜
物镜倍数
目镜测微尺格数
镜台测微尺格数
目镜测微尺每格代表的长度(μm)
高倍镜
40
24
6
2.5
2.将高倍镜下的结果填入下表。
酿酒酵母细胞大小的测量
菌细胞编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
平均值
目镜测微尺格数
2.9×1.2
2.5×1.0
2.8×1.6
2.4×1.1
2.6×1.3
2.4×1.2
2.5×1.6
2.3×1.1
2.6×1.2
2.7×1.3
2.57×1.26
酵母细胞直径(μm)
7.25×3
6.25×2.5
7×4
6×2.75
6.5×3.25
6×3
6.25×4
5.75×2.75
6.5×3
6.75×3.25
6.425×3.15
班级数据如下:
酵母菌细胞大小
长轴(μm)
短轴(μm)
下四分位
8.2
4.2875
最小值
5.35
3.15
最大值
16.2
11.9
上四分位
10.1975
7.2
中位数
9.475
5.95
1.实验时需要注意,放置目镜测微尺时需要刻度向下。
2.每次需要将目静测微尺旋转至与被测长度平行后才可读数。
3.制作水压片时不要滴加过多菌悬液,防止溢出。
4.在无法看清目镜测微尺刻度时,可以通过调整光圈大小使目镜测微尺清晰。