药物半数致死量（LD50）的测定
Determination of Drug Median Lethal Dose(LD50)
【目的和原理】 了解药物LD50测定的意义、方法、计算过程。
LD50是指使一群体动物中半数死亡的剂量，是衡量药物毒性大小的指标，是评价药物优
劣的重要参数。了解药物单次给药或短时间内多次给药后动物所产生的毒性反应及其严重程
度，为临床安全用药及监测提供一定的参考。
LD50的测定方法很多，较为常用的有改良寇氏法、简化概率单位法、序贯法、孙瑞元点
斜法和Bliss-Finney法。本实验介绍结果较准确、计算简便、可计算出全部有关参数的改良
寇氏法及及计算机应用程序中的Bliss-Finney法。
【实验动物】小白鼠，体重 18-22g，♀♂各半，实验前禁食 12 h，不禁水。
【实验 药品】 计算机（BL-410 机能实验系统）、计算器、电子秤、量筒（10ml）、
注射器
【实验
一
1.
（Dm,D
1）稀释
如果全
2.
3．
要求各
二
1.
器材和
（1ml）、小鼠笼；盐酸普鲁卡因（procaine hydrochloride）。
步骤和观察项目】
、预备实验
探索剂量范围：根据经验或文献找出动物 100%及 0%死亡的剂量，即上下限剂量
n）。对于无毒性参考
资料
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的药物，一般先配制最大浓度药剂，然后按等比关系（如 2：
成多个剂量，方法是每组取 4～10 只小鼠，按估计剂量给药，如果全死则降低剂量，
活则增加剂量，进而确定出Dm, Dn。
确定组数、计算各组剂量：
组数（G）：5-8 组
各组剂量：各组剂量要按等比级数排列，按下列
公式
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求出公比 r:
r = (G-1)
Dm/Dn
按公比求各组剂量：D1，D2，D3，D4，D5，……，Dm
其中D1=Dn= 最小剂量，D2=D1· r，D3 =D2· r，……Dm =D n-1·r
配制等比稀释溶液：
小鼠给药容积一样，0.1ml/kg～0.2ml/kg，按下列公式计算浓度：
C母=Dm/等容注射量
、正式实验：
分组编号：随机将小鼠分为五组，每组 10 只， ♀♂各半。
2.给药：分别将配制好的等比稀释液按 0.2ml/10g 由 ip 给药。
3.观察记录：记录小鼠死亡数。
结 果 记 录 表
组别 剂量（D）
mg/kg
动物数（n）
只
死亡数（F）
只
死亡率%（P）
F/n
1
2
3
4
5
计算LD50及 95%可信限：
LD50=lg –1[Xm－i(∑P－0.5)]
Xm=最大剂量的对数值
i=相邻两组比值的对数（lgr）
P=各组死亡率
∑P =各组死亡率总和
LD50的 95%平均可信限 = LD50±4.5LD50·SX50
其中SX50为LD50的
标准
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误
SX50=i·√(∑P－ΣP2)/(n－1)
其中 n=各组动物数
ΣP2=各组死亡率平方的总和
Bliss 法：被认为是目前最精确的方法，受到我国《新药临床前毒理学研究指导原则》
的推荐，计算相当复杂，应用计算机软件计算则简单易行。
1． 启动微机，运行 BL-410 程序，进入其数据处理选项，再进入半数致死量选项。
2． 一次输入各组剂量、动物总数、动物死亡数等相关数据。
3． 单击“计算”按钮计算LD50等参数。
【注意事项】 药物称量、配制及给药的准确程度是本实验成功与否的关键。
1.实验过程中给药剂量一定要准确。
2.注意观察中毒症状及其发生时间、死亡时间。
【思考题】
测定LD50有何药理意义？
（石卓）
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