要分

null维生素C含量测定方法综述 维生素C含量测定方法综述 摘要摘要 目前研究维生素C测定方法的报道较多，如滴定法、光度 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 法、高效液相色谱法等，各种方法各有特点。特别是高效液相色谱法是近年来发展较快的一种方法。本文对近年来有关维生素C的测定方法进行了综述。关键词关键词 维生素C 滴定法 光度分析法 高效液相色普法等 概述概述 维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。近年来报道的测定方法主要有滴定法、光度法、高效液相色谱法等。维生素C的结构式维生素C的结构式 维生素C：六碳的多羟基内酯null1 滴定法测定维生素C1 滴定法测定维生素C 1.1 2，6一二氯靛酚法 1.2 微量滴定法2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量其能还原2,6-二氯酚靛酚染料。 维生素C具有还原性的烯二醇基，我们通过氧化还原滴定来测定维生素C ——2，6-二氯靛酚法 ——2，6-二氯靛酚法 原理2，6-二氯靛酚是一种染料，其氧化型在酸性介质中为红色，碱性介质中为蓝色，与Vc反应后，生成无色的还原型酚亚胺，因此，在酸性条件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶液显玫瑰红色，即为终点；无需另加指示剂。 ——2，6-二氯靛酚法 ——2，6-二氯靛酚法 方法取本品适量（约相当于Vc50mg），用适量水溶解，置100ml量瓶中，加偏磷酸-醋酸试液20ml,再用水稀释置刻度，摇匀； 精密量取稀释液适量（约相当于Vc2mg）置50ml的锥形瓶中,加偏磷酸-醋酸试液5ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液显玫瑰红色,并持续5s不褪； 空白试验：取偏磷酸-醋酸试液5.5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。 计算： (V-V0) ×F ×T ×W W ×标示量 标示量%=反应摩尔比１﹕１×100％null 维生素C 2,6-二氯酚靛酚 维生素C 2,6-二氯酚靛酚 （还原型） （氧化型，粉红色） （氧化型） （还原型） + + ==== 2,6-二氯酚靛酚染料的钠盐在水溶液中显蓝色，在酸性溶液中呈红色，被还原后红色消失。碘量法碘量法原理：由于维生素C分子中的烯二醇基有极强的还原性，能被碘氧化，用碘滴定VC EC6H6O6/C6H8O6=0.18 ,EI2/I-=0.535 终点：淀粉为指示剂，溶液出现稳定的蓝色即为终点 反应式： 碘量法碘量法 碘的浓度由已知浓度的Na2S2O3 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 溶液标定 反应式： 计算式： Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100% 碘量法碘量法注意 ！ 测定时：加HAC使溶液呈弱酸性 原因: (1) Vc还原性很强，在空气中很容易被氧化，在碱性介质中更甚 (2)I2在碱性介质中会发生歧化反应 加HAC可减少VC的副反应，避免实验误差 电位滴定法电位滴定法原理：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点. Pt为指示电极，甘汞作参比电极 E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数) 电位滴定法电位滴定法原理(具体来说:) 随着滴定剂的加入，由于发生化学反应，待测离子浓度将不断变化； 从而指示电极电位发生相应变化； 导致电池电动势发生相应变化； 计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。 电位滴定法 电位滴定法右图：电位滴定法基本仪器装置 计算式：(与碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100% 优点： 解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 2 分光光度测定维生素C2 分光光度测定维生素C2.1 2，4一二硝基苯肼分光光度法 2.2 钼蓝比色法 2.3 其他方法2，4一二硝基苯肼分光光度法 2，4一二硝基苯肼分光光度法 原理： 维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸 反应式： 2，4一二硝基苯肼分光光度法2，4一二硝基苯肼分光光度法pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸 二酮古洛糖酸 2, 4一二硝基苯肼分光光度法2, 4一二硝基苯肼分光光度法脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎 脎在500nm波长有最大吸收 脎的结构： 分光光度法分光光度法样品溶液与VC标准溶液按上述方法同样处理 500nm处测吸光度 下图：721型分光光度计 钼蓝比色法 钼蓝比色法 马占玲等用钼蓝比色法测定青椒中还原型维生素C含量的基本原理和方法。测定波长839 nm，维生素C含量在0．004～0．024 mg／mL范围内呈线性关系，回收率为97．2％。该方法简单、快速、准确。 钼蓝比色法钼蓝比色法逯家辉等提出了一种测定维生素C的新方法，它是基于Folin B试剂与抗坏血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介质中反应生成脱氢抗坏血酸，反应产物在910 nm波长处有最大吸光度进行定量分析。该方法的线性范围为0～50．0μg／mL，相关系数r=0．999 86，回收率为98．12％～102．15％。 ——差示旋光法 ——差示旋光法原理方法结果维生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有显著差异，而片剂辅料旋光度保持不变 差示旋光法消除辅料的影响，直接测出该制剂的含量 讨论与 ——差示旋光法 ——差示旋光法方法TEXT1）标准溶液的配制 准确称取维生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸钠0.37g,置于100mL容量瓶中,用新沸冷却的蒸馏水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的维生素C标准溶液。 TEXT原理方法结果讨论与 ——差示旋光法 ——差示旋光法2）比旋光度与溶液pH值的关系 量取10.0mL维生素C标准液于50mL量瓶中,用水稀释至50mL。测定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批加入氢氧化钠固体(每次约50mg),每次溶解后,测定一次溶液的pH及其旋光度,得到维生素C溶液的pH及旋光度关系原理方法结果讨论与——差示旋光法——差示旋光法选定pH为2.2和6.2 ——差示旋光法 ——差示旋光法2）差示旋光度与溶液浓度关系 吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的维生素C标准液各两份,分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容；一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容，静置3min后,用220mm测定管，以前者为空白，测定后者的差示旋光度(△a)。 文献结果：线性方程为△a=0 205*C+ 0．05，r=0．9964原理方法结果讨论与 ——差示旋光法 ——差示旋光法3）辅料干扰试验 取混合辅料20mg(淀粉、硬脂酸镁、EDTA、糊精等按处方比例混匀)两份分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容,一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容,滤去不溶物,滤液在两种pH值测定差示旋光度。 文献结果：辅料的差示旋光度为零，说明辅料对维生素C含量的测定不干扰。原理方法结果讨论与 ——差示旋光法 ——差示旋光法4）稳定性试验 同一测试样品，在120min内，每隔3min测定一次差示旋光度。 文献结果：差示旋光度基本不变原理方法结果讨论与 ——差示旋光法 ——差示旋光法5）回收率试验 精密称取维生素C精制品500.0mg两份，分别置于50mL容量瓶中，各加入20mg辅料，分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液，测定差示旋光度。 文献结果：平均回收率为97.8％，变异系数cv为1.03％原理方法结果讨论与 ——差示旋光法 ——差示旋光法方法TEXT6）样品测定 取维生素C片剂10片，称重研碎后分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液(相当于含Vc 20mg/mL)，滤去不溶物，测定滤液的差示旋光度，根据回归方程计算其含量。 TEXT原理讨论方法结果与 ——差示旋光法 ——差示旋光法方法TEXT1）维生素易被氧化,空气及水中的氧均可使其氧化分解，配制溶液时使用新沸冷却水,同时加人EDTA作为稳定剂； 2）样品测定时，片剂部分物质不能完全溶解，必须过滤除去，然后测定滤液的差示旋光度。TEXT原理讨论方法结果与3 高效液相色谱法测定维生素C3 高效液相色谱法测定维生素C3.1 HYPERSIL—C8色谱柱法 3.2 VenusilXBP—C18柱法 3.3 其他方法HYPERSIL—C8色谱柱法 HYPERSIL—C8色谱柱法 采用HYPERSIL—C 8色谱柱，用0．1％低浓度的草酸作流动相，陈昌云等采用0．05 mol／L磷酸二氢钾缓冲液：甲醇=80：20 (v／v)作流动相。流速为1．0mL／min，二极管阵列检测器，检测波长为254 nm。 3.2 VenusilXBP—C18柱法3.2 VenusilXBP—C18柱法 系统采用VenusilXBP—C18柱(4．6x250 mm，5μg)，用0．2％的偏磷酸的水溶液作为流动相，流速1 ml／min，检测波长240 nm；维生素C浓度在0．1-1．0 mg／mL范围内有良好的线性关系。该方法回收率99．89％，标准偏差0．91，操作简便、灵敏、可靠 薄层扫描法薄层扫描法原理 维生素C具有 较强还原性，可使蓝色染料2，6-二氯靛酚钠定量地还原成无色的酚亚胺，而本身被氧化成去氢抗坏血酸，利用此特征进行薄层扫描法测定含量。 薄层扫描法薄层扫描法 操作方法与结果 （1）试纸的制备 2,6-二氯靛酚钠 (DCP-Na)溶于无水乙醇配成0.05%的DCP-Na乙醇溶液，滤纸在盛有DCP-Na乙醇溶液的展开缸中浸渍3min，边浸边摇展开缸，使滤纸均匀着色，充分被染料溶液所饱和。取出悬挂于暗处，晾干后，立即放入干燥器中避光保存，备用。 薄层扫描法薄层扫描法（2）缓冲溶液的配制 称取柠檬酸水合物10g，放入1000ml容量瓶中，加入1M 氢氧化钠 420ml，并用蒸馏水稀释至刻度，此溶液的pH应为3.5。否则，用酸或碱调整 pH值，保存于冰箱中。 薄层扫描法 薄层扫描法3）扫描条件确定 在制备的染料试纸上定量点上维生素C对照品进行扫描 ，维 生素 C在 290nm 处有最大吸收，420nm处无吸收，故选择1=290nm， 2=420nm．双波长反射式锯齿扫描。原理方法结果讨论与薄层扫描法薄层扫描法4）线性实验 4.1）对照品溶液的配制 精密称取维生素C标准品100mg，用缓冲溶液配成lmg/ml的标准溶液。精密称取维生素C标准溶液1、2、3、4、5ml，分别置于10ml容量瓶中，用缓冲溶液稀释至刻度。 4.2）测定 用5l定量毛细管，分别吸取上述溶液各5 l，点于试纸上 。点样后晾干，并将试纸 固定在20cm×20cm玻璃板上，放入薄层扫描仪。测定△A 的积分值 (峰面积)作为纵坐标Y ，点样量为横 坐标X，得一直线方程 Y=15692X+130225，r= 0．9991 原理方法结果讨论与 薄层扫描法 薄层扫描法方法TEXT5）样品的含量测定 取维生素 C片10片，研细，精密称取平均片重一片的粉末，放入100ml容量瓶中，加入缓冲液至刻度，振摇，使维生 素 C溶解，放置、澄清，用吸液管取3ml 移至10ml容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度。用 5 l定量毛细管点样品溶液与不同浓度的标准液于同一试纸上 ，然后扫描 测定峰面积，由工作曲线法计算维生素C片中的维生素C含量。TEXT原理方法结果讨论与薄层扫描法薄层扫描法6）回收率实验 精密称取维生素C对照品20mg，其它原辅料适量，置 10ml容量瓶中，加缓冲液稀释至刻度，振摇，滤过 ，弃初滤液。分别吸取续滤液与对照品维生 素 C液各5 l点于同一试纸上，按上述条件进行扫描测定。 薄层扫描法 薄层扫描法点样时各点间距应大于10mm，扫描测不定期波长可做少量变动，但每次测定必须固定同一测定波长 点样量 在3～8l之间线性关系较好，当点样量为10 l，线性关系较差。 原理方法结果讨论与结束语结束语总之，维生素C的测定方法很多，各种方法各有特点，常用的滴定法方法简单，但在滴定有色物质终点不易判断，分光光度法操作费时，高效液相色谱法是目前发展较快的一种方法，方法灵敏，选择性好，有较好的发展前景。毛细管电泳n51是近几年新兴的分析方法，具有效率高、分析时间短、样品处理简单等特点，但有待于进一步完善。 参考文献参考文献[1]吴春艳．水果中维生素C含量的测定及比较[J]．武汉理工大学学报，2oo7，29(3)：90—91． [2]王元秀，庄海燕．微量滴定法测定猕猴桃中维生素C的含量[J1．济南大学学报(自然科学版，2001，15(4)：374， [3]张颖，等．不同产地枸杞子中维生素C含量测定[J]．中国医院药学杂志，2004，24(8)：500—501． [4]袁叶飞，甄汉深，欧贤红．分光光度法测定大枣中的维生素C含量[J]．安徽中医学院学报，2006，25(2)：40--41． [5]马占玲，等．青椒中还原型维生素C含量的测定[J]．渤海大学学报(自然科学版)，2006，27(2)：111-113．参考文献参考文献[6]逯家辉，等．F0lin B分光光度法测定蔬菜中维生素C的含量[J]．分析检测，2oo5，26(8)：171—172． [7]王艳颖，等．高效液相色谱法测定草莓中维生素C含量[J]．大连大学学报，2006，27(2)：21—22． [8]姜波，范圣第，刘长建，花艳红．菠萝中维生素C的高效液相色谱分析[J]．大连民族学院学报，2003，5(1)：52—53． [9]刘长建．青椒中维生素C的高效液相色谱分析[J]．大连轻工业学院学报，2004，23(3)：229—230． [10]陈昌云，李小华，刘莉莉．高效液相色谱法测定蜜柚中维生素C的含量[J]．化工时刊，2oo7，21(8)：19—21．参考文献参考文献[11]王爱月，张向兵，李发生．高效液相色谱法测定食品及保健品中维生素C含量的研究[J】．中国卫生检验杂志， 2006，16(10)：1175-1176． [12]雍莉，等．高效液相色谱法快速测定保健食品和果蔬中的VitC[J]．现代预防医学，2005，32(3)：247—248． [13]胡志群，王惠聪，胡桂兵．高效液相色谱测定荔枝果肉中的糖、酸和维生素C[J]．果树学报，2005，22(5)：582． [14]张秀梅，等．高效液相色谱法测定菠萝果实维生素C含量[J]．福建果树，2oo7，140(1)：20—21． [15]杨建洲，张荣莉．毛细管区带电泳分析果蔬中的维生素C含量[J]．分析化学，2oo2，30(1)：120谢词谢词本文是在徐洁老师的精心指导下独立完成的。为此，我首先要感谢徐老师，她对我的论文提出了实践性的建议，徐老师教学严谨，踏踏实实，对我的影响极大。从她身上我知道了该如何对待自己的工作，该如何做好自己的工作，为我以后踏上工作岗位有很大的帮助，使我对工作有了更新的态度，在以后的学习工作中我会加倍努力以回报老师的辛勤。再次感谢徐老师的言传身教。