病毒中和试验测定法1.固定病毒稀释血清法(α法)本法用于抗血清的中和价。试验需先滴定病毒毒价，试验时将其稀释成每一单位剂量含个，再将待检血清倍比稀释200TCID50加等量个的病毒液，混匀后℃，每一稀释度接种孔细胞200TCID50/ml371h24培养板孔，每孔。培养箱培养一定时间后，
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出现孔数，40.2ml5%C02CPE以不出现CPE数和接种数的比为中和比值。按Karber法计算中和价。其公式如下：（）LogTCID50=L+dS-0.5（用对数计算，为病毒最低稀释度的对数。为组距，即稀释系数，在TCID50Ld10倍系列稀释则为-1，S为各组CPE与接种数比值之和）50%中和试验举例血清稀释1/101/201/401/801/1601/320稀释度对数-1-1.3-1.6-1.9-2.2-2.5每一接种剂量含病毒或或或100TCID50100LD50100EID50100ID50中和比值4/44/44/44/42/40/4L=-1，d=-0.3，S=4/4+4/4+4/4+4/4+2/4=4.5代入公式：－KarberLogND50=-10.3*(4.5-0.5)=2.2该抗血清半数中和单位为-2.2，即，则其中和价为，ND50()101/160160ND50/ml可以简写成160。2.固定血清稀释病毒法(β法)本法用于测定抗血清的中和指数。将病毒原液10倍系列稀释，分列于2排无菌管，第一排加等量正常血清（对照组）；第二排加待检血清（中和组），混匀后，置37℃1h，分别接种细胞板孔（或鸡胚、实验动物）进行培养，记录（鸡胚、动物死亡数），计算（或），按CPETCID50LD50下式计算中和指数。中和组（或）TCID50LD50中和指数=————————————对照组（或）TCID50LD50查反对数，即得该待检血清的中和指数。通常中和指数>50者判为阳性，10-49为可疑，<10者为阴性。例如：对照组滴度的-6.5LD50=10中和组滴度的-4.5LD50=10中和指数=10(6.5-4.5)=102.0=100中和指数的对数Log=Log100=2.0一般来说，以10倍稀释进行滴度测定，Log10=1。因此小于10（1
1.7)则是有意义的.
浙公网安备 33021202002483