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过氧化氢酶的活力测定

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过氧化氢酶的活力测定过氧化氢酶的活力测定——紫外吸收法 H2O2在240nm波长下有强烈吸收,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活力。 三、材料、仪器与试剂 (一)、材料:小麦叶片 (二)、仪器(仪器的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定) 紫外分光光度计;离心机;研钵;250ml容量瓶1个;0.5ml刻度吸管2支,2ml刻度吸管1支;10ml试管3支;恒温水浴; (三)、试剂(试剂的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定后...

过氧化氢酶的活力测定
过氧化氢酶的活力测定——紫外吸收法 H2O2在240nm波长下有强烈吸收,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活力。 三、材料、仪器与试剂 (一)、材料:小麦叶片 (二)、仪器(仪器的选择在实验开始前由学生在预习 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 中提出 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 后教师审定) 紫外分光光度计;离心机;研钵;250ml容量瓶1个;0.5ml刻度吸管2支,2ml刻度吸管1支;10ml试管3支;恒温水浴; (三)、试剂(试剂的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定后并配制) 0.2mol/L pH7.8磷酸缓冲液(内含1%聚乙烯吡咯烷酮);0.1mol/L H2O2(用0.1mol/L高锰酸钾标定)。 四、实验操作: 1.酶液提取:称取新鲜小麦叶片或其它植物组织0.5g置研钵中,加入2~3ml 4℃下预冷的pH7.0磷酸缓冲液和少量石英砂研磨成匀浆后,转入25ml容量瓶中,并用缓冲液冲洗研钵数次,合并冲洗液,并定容到刻度。混合均匀将量瓶置5℃冰箱中静置10min,取上部澄清液在4000rpm下离心15min,上清液即为过氧化氢酶粗提液。5℃下保存备用。 2.测定:取10ml试管3支,其中2支为样品测定管,1支为空白管,按 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 40-2顺序加入试剂。 表40-2 紫外吸收法测定H2O2样品液配置表 管 号 S0 S1 S2 粗酶液(ml) 0.2(煮死酶液) 0.2 0.2 pH7.8磷酸(ml) 1.5 1.5 1.5 蒸馏水(ml) 1.0 1.0 1.0 25℃预热后,逐管加入0.3ml 0.1mol/L的H2O2,每加完一管立即记时,并迅速倒入石英比色杯中,240nm下测定吸光度,每隔1min读数1次,共测4min,待3支管全部测定完后,按下式计算酶活力。 五、计算 以1min内A240减少0.1的酶量为1个酶活单位(u)。 过氧化氢酶活力(u/gFW/min)= 式中 A240 = AS0- AS0—加入煮死酶液的对照管吸光值; AS1, AS2—样品管吸光值; Vt—粗酶提取液总体积(ml); V1—测定用粗酶液体积(ml); FW—样品鲜重(g); 0.1—A240每下降0.1为1个酶活单位(u); t—加过氧化氢到最后一次读数时间(min)。
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分类:理学
上传时间:2010-12-07
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