蒽酮比色法测定大豆乳清废水中总糖含量

大 豆 通 报 2OO6年第 3期(总第 82期) 文章编号：1009—2765(20o6)03一O024—02 中图分类号：$377 文献标识码：A 蒽酮比色法测定大豆乳清废水中总糖含量 毕颖 刘燕 张平 孙树坤 朱秀清 邵弘 (1．北京市宣武区疾病预防控制中心，北京 100053；2．国家大豆工程技术研究中心，哈尔滨 150050) 摘要：本文研究了用蒽酮比色法测定大豆乳清废水中可溶性总糖含量，本法可溶性总糖测定的回 收率为98％一105％， 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 偏差 1、032×10～，本法灵敏度高，可靠性强，误差小，而且设备简便、迅 速、准确。 关键词：大豆乳清废水；蒽酮；试剂；可溶性总糖 大豆制品是深受我国人民喜爱的传统食品，利 用大豆生产豆腐、腐乳、酱油等食品，至今已有2000 多年的历史，在生产豆制品的过程中，会排放大量的 乳清废水，据统计每加工 1 t大豆将排放2 5 t的乳 清废水，据研究 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明，大豆乳清废水中含有原料大豆 蛋白质的 8．2％，脂肪 的 2．2％，总糖 的 1．o4％ 3．22％，BOD高达 10 000 mg／L以上，因此设法回收 其有用组分不仅可以提高原料利用率而且将大大减 轻废液对环境的污染。 总糖的测定方法较多⋯，但对于总糖含量为 1％一2％的大豆乳清废水来说，蒽酮比色法比较适 于测定，因为此方法最大的特点是灵敏度高，显色稳 定，操作简便，适于微量测定。 大豆乳清废水中含有水苏糖、棉子糖等可溶性 糖类，利用蒽酮可以和单糖、双糖、多糖作用，生成蓝 绿色化合物的这一性质，将大豆乳清废水中蛋白质 沉淀除去，糖类与浓硫酸作用，脱水缩合成糖醛。糖 醛和蒽酮作用显色，在一定浓度下，颜色的深浅与糖 的含量是直线关系，其反应如下： 1 材料与方法 1．1 材料 大豆乳清废水 1．2 试剂 Ba(OH)2、ZnSO4、蒽酮试剂。 1．3 仪 器 U一1901紫外分光光度计，水浴锅。 1．4 方 法 收稿日期：2OO6—01—06；修回日期：2006—04—13 *通讯作者：张平 1．4．1 试验方法 蒽酮比色法(在参照前人方法 和本文作者研 究的基础上形成的方法)，其中蒽酮试剂：准确称取 0．2g蒽酮和 1g硫脲(阻氧化剂)置于烧杯中，缓缓加 人 100mL浓硫酸，边加边搅拌，溶解后呈黄色透明 溶液。 1．4．2 标准曲线制作 1．4．2．1 葡萄糖标准溶液配制 先配成 1 g／L的葡萄糖溶液，然后分别吸取 1、 2、4、6、8、10、12、14 mL分别置于 100 mL容量瓶中， 用水定容至刻度，可得到 0．01、0．02、0．04、0．06、 0．08、0．10、0．12、0．14 n mL的葡萄糖系列浓度。 1．4．2．2 葡萄糖标准曲线制作 吸取系列标准葡萄糖溶液，蒸馏水各 1 mL，分 别置于 9支试管中，加人5 mL冷蒽酮试剂，混匀，于 试管口盖上玻璃球，在沸水浴中加热 7 min，取出后 用冷水冷却 20 min后，测 A(620nm处的吸光光度 值)，以吸光度为纵坐标，糖标准溶液浓度为横坐标， 绘标准曲线。 1．4．3 样品前处理方法 1．4．4 样品测定方法 1．4．4．1 准确吸取 1 mL乳清废水原液，移人 100 mL 容量瓶中，用水稀释至 50 mL混匀，加人过量的 Ba (OH)：溶液，生成蛋白质沉淀，等完全沉淀后再加人 过量的 z~so,溶液除去剩余的 Ba(OH)：，最后定容 摇匀，过滤，滤液作为待测液。 1．4．4．2 吸取 1 mL样品待测液于试管中，加人 维普资讯 http://www.cqvip.com 2006年第 3期(总第 82期) 大 豆 通 报 5 m 的蒽酮试剂，混匀，于试管口盖上玻璃球，在 沸水浴中加热 7 min，取出后用冷水冷却 20 rain后， 测 A(620nm处吸光光度值)。 1．4．5 计算 可溶性总糖(％)：型堡缝 ×分 取倍数 ×100 2 结果与讨论 大豆乳清废水可溶性糖含量分析表 平均偏差 d：0．006 2／8=0．000 775 标准偏差d：~／7．46x 10-6： =1．032×10一 标准偏差 = 6 rl = = ～6 二．63 = 0．0364 7×l0一 可溶性总糖含量 ．95=0．713 4±t×0．364 7 ×10I3(％) 当自由度为 7，可溶度95％，查 t表得 t=2．365， 代入得： 可溶性糖含量 ．95=0．713 4 4-2．365×0．364 7×10～ =0．713 4 4-0．000 9 试验说明0．712 5 0．714 3蒽酮比色法测量乳 清废水中可溶性总糖含量，精密度高，重现性好。 回收率的试验 加入不同量的葡萄糖回收率的情况表 经多次试验，蒽酮比色法比较适合大豆乳清废 水中可溶性总糖的测定，回收率试验在 95％ 一 105％之间蒽酮比色法最大特点是灵敏度高，显色稳 定，重现性好 ，操作简便，适用大批样品分析 ，但必须 严格按照操作规程进行。 3 注意事项 (1)加入 Ba(OH) 充分摇匀后，才能加过量的 ZnSO4 o (2)吸取待测的数量应视样品中糖的含量而定 ， 先可做预测试验。 (3)0．2％蒽酮试剂用浓硫酸定容装入棕色试剂 瓶中，并放入冰箱中，但最好现用现配。 (4)试验过程中，应严格把握呈色时间和沸水浴温 度。 参考文献： [1] 宁正祥．食品成分分析手册[M]．中国轻工业出版社， 1998．26． ． [2] 工业发酵分析[M]．天津轻工业学院、无锡轻工大学、 大连轻工学院编，1992． [3] 分析化学手册(第一册)[M]．化学工业出版社． Measurement of Total Sugar Content by Anthrone Reagent in Soybean W hey Waste W ater Bi Ying ，Liu Yan2 ， Zhang Ping ，Sun Shukun2 ， Zhu Xiuqingz ， Shao Hong2 (J．Disease Control Center ofXuanwu District，aei~ng 1000053； 2．National So~ o2"L and Technology Center，Harbin 150050) Abstract：The method to assay soluble sugar contained in soybean whey waste water by anthrone reagent was investigated． This method had higher sensitivity，better reliability and htfle elror．The recovery ration of investigated soluble sugar was 98％ to 105％ ：standard deviation was 1．032×10～ ． Key W ords：soybean whey waste water，anthorone reagent，soluble sugar 维普资讯 http://www.cqvip.com