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性实验
温州医学院第一临床医学院
医学机能学课程
设计性实验
题 目: 决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究 设 计 人: 张倩莺 1001010018 班 级: 10级临?(1)班
指导老师: 陈醒言
提交日期: 2012年12月
设计性实验——决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究 研究题目:
决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究
理论依据与现状研究:
决明子为豆科一年生草本植物决明或小决明的干燥成熟种子。生于山坡、路边和旷野等处。分布于长江以南各省区。全世界热带地方均有。决明子也叫草决明、羊明等。
其味苦、甘而性凉,具有清肝火、祛风湿、清热明目,润肠通便。用于目赤涩痛,羞明多泪,头痛眩晕,目暗不明,大便秘结。归肝、肾、大肠经。有减肥之功效。治风热赤眼,青盲,雀目,高血压,肝炎,肝硬化腹水,习惯性便秘。
经调查,决明子提取物中含有的蒽醌类化合物具有降压降血脂的作用。近年来,决明子及其复方制剂在临床上已广泛运用于高脂血症的治疗。
本实验采用小鼠高脂血症模型,对决明子正丁醇溶剂提取物进行降血脂药效学研究。
研究内容:
本实验针对决明子正丁醇提取物中的成分,研究其降血脂作用。
研究方法:
高脂饮食喂养小鼠10 d,造成高脂血症动物模型,以决明子正丁醇
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设计性实验——决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究 提取物喂养高脂血症小鼠10 d,检测小鼠血中胆固醇、甘油三酯的含量。
实验对象:小鼠
规格:小鼠16只。雄性、体重 20-30g
实验组与对照组的处理:
1.将小鼠随机分为 4 组:高脂模型组(A)和低(B)、中(C)、高剂量(D)三个实验组。
2.自正式实验开始,各组动物换用高脂饲料,同时实验组分别给予0.5、1.0、3.0g/ kg*bw不同浓度的决明子正丁醇提取物,配制时分别取5g、10g、30g加蒸馏水定容至100ml,实验组体积均为1.0ml/100g.bw ,高脂模型组给予同体积的蒸馏水,连续喂养10天。
观察指标:
小鼠的血清总胆固醇(TC)甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量 。
实验步骤:
1.实验前准备:以基础饲料喂饲小鼠观察3d。禁食16h,取尾血,用生化分析仪测定受试动物实验前血清总胆固醇(TC )甘油三酯(TG )和高密度脂蛋白胆固醇(HDL- C )。
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设计性实验——决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究
2.建立高脂模型:将动物以高脂饲料喂养10 d。禁食16h,取尾血,用生化分析仪测定受试动物经高脂饲养后血清总胆固醇(TC )甘油三酯(TG )和高密度脂蛋白胆固醇(HDL- C )。
3.开始实验:将动物随机分为 4 组:高脂模型组(A)和低(B)、中(C)、高剂量(D)三个实验组。自正式实验开始,各组动物换用高脂饲料,同时实验组分别给予0.5、1.0、3.0g /kg.bw不同浓度的决明子正丁醇提取物,配制时分别取5g、10g、30g加蒸馏水定容至 100ml,实验组体积均为1.0ml/100g.bw ,高脂模型组给予同体积的蒸馏水,连续喂养10天。
4.测定结果:于10天实验后禁食16h,采尾血测定实验后血清血清总胆固醇(TC )甘油三酯(TG )和高密度脂蛋白胆固醇(HDL- C )的含量。
5.实验数据统计:用Excel 、SPSS13.0软件进行统计分析(本实验所用
记录
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表格
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见附录)。
仪器与药品:
清洁级小鼠;决明子正丁醇提取物(将决明子药材研成粗粉,按系统溶剂提取法,制得决明子正丁醇提取物);基础饲料;高脂饲料(78.8%基础饲料, 1%胆固醇、10%蛋黄粉、10%猪油、0.2%胆盐);生化分析仪;胆固醇(TC )甘油三酯(TG );高密度脂蛋白胆固醇(HDL- C )试剂盒。
实验期间实验环境温度21? ~24? ,湿度52%~58%。
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设计性实验——决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究
预期实验结果:
3 个实验组在喂饲高脂饲料的同时给予不同剂量决明子正丁醇提取物,其中C组小鼠(3.0g/kg.bw)血清 TC 、TG水平明显低于高脂模型组,证实决明子提取物对高血脂小鼠具有辅助降血脂的作用。
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设计性实验——决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究 附:实验结果统计记录
表
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表1.小鼠实验前后TC、TG、HDL-C的变化(个体)*
实验前-基础饲料喂养 实验前-高脂饲料喂养 实验后
TC TG HDL TC TG HDL TC TG HDL
(mmol/l) (mmol/l) (mg/dl) (mmol/l) (mmol/l) (mg/dl) (mmol/l) (mmol/l) (mg/dl) A1 A2 A3 A4 B1 B2 B3 B4 C1 C2 C3 C4 D1 D2 D3 D4 *备注:A、B、C三组为实验组,分别给予0.5、1.0、3.0g /kg.bw不同浓度的决明子正丁醇提取物。D组为对照组(高脂模型组),给予相同体积的蒸馏水。每组1-4号分别为四只小鼠的编号,将每只小组的情况记录表内。
表2.小鼠实验前后TC、TG、HDL-C的变化(成组)*
实验前-基础饲料喂养 实验前-高脂饲料喂养 实验后
TC TG HDL TC TG HDL TC TG HDL
(mmol/l) (mmol/l) (mg/dl) (mmol/l) (mmol/l) (mg/dl) (mmol/l) (mmol/l) (mg/dl) A B C D *备注:A、B、C三组为实验组,分别给予0.5、1.0、3.0g /kg.bw不同浓度的决明子正丁醇提取物。D组为对照组(高脂模型组),给予相同体积的蒸馏水。实验结果取表1中每组所有小鼠TC、TG、HDL-C浓度的平均值。
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