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甲肝1.检验目的 血清抗HA V抗体IgM是HA V急性感染的标志,在感染的早期即已出现,是早期诊断甲型肝炎的依据。感染后3个月内可维持较高滴度,6个月后逐渐消失。 2.方法原理 采用ELISA架桥法,反应板的琼脂微孔包被兔抗人-IgMμ链,加入待测样本,同时加入HA V Ag、抗-HA V-HRP,当样本中有抗-HA V-IgM时,会与包被在板上的兔抗人-IgMμ链结合,并被HA V Ag捕获、再与抗-HA V-HRP联接成复合物,加入底物TMB产生显色反应,反之则无显色反应。 3.性能指标 此方法快速简...

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1.检验目的 血清抗HA V抗体IgM是HA V急性感染的标志,在感染的早期即已出现,是早期诊断甲型肝炎的依据。感染后3个月内可维持较高滴度,6个月后逐渐消失。 2.方法原理 采用ELISA架桥法,反应板的琼脂微孔包被兔抗人-IgMμ链,加入待测样本,同时加入HA V Ag、抗-HA V-HRP,当样本中有抗-HA V-IgM时,会与包被在板上的兔抗人-IgMμ链结合,并被HA V Ag捕获、再与抗-HA V-HRP联接成复合物,加入底物TMB产生显色反应,反之则无显色反应。 3.性能指标 此方法快速简便、特异性强、检测灵敏度度0.5ng/ml。 4.标本收集 4.1 标本类型:静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本(抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠、ACD、CPDA-1或EDTA,抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯或分析纯,使用的比例以厂家推荐为准);其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹水、乳汁等体液可以作为检测标本,但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为检测标本。4.2标本留取:以空腹为宜,收到标本后最好立即离心留取血清或血浆(凝固血应待其充分凝固后收集血清),不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝,使用肝素治疗的病人宜在肝素治疗前抽血。 4.3 标本保存:留取的标本最好在3小时内检测,不能立即检测的应放置于2-8℃最长达14天(可以含有凝块但要密闭以防蒸发),或者-10℃最长达14天(不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞)。 4.4标本容器:盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管 4.5标本外送:如涉及到需要外送的标本,必须以 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 的容器(0.5ml塑料离心管)存放并密封,并根据邮寄规则和要求进行包装,运送时还要放入冰袋(2-8℃)或干冰(-10℃)由专人运送至指定地点指定接收人。 4.6拒收标本:凡与4.1-4.5所述内容不符的标本,检验人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因,并提出解决的 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 或建议。 5.分析系统 5.1分析仪器:为美国BIO-RAD公司提供的MODEL550型酶标仪,仪器校准请参见仪器操作规程。 5.2分析试剂:为上海科华公司提供的配套的HA V-IgM试剂盒,规格为48test/盒,2-8℃贮存,有效期12个月;在效期内使用试剂。 5.3 质控试剂:为上海公司提供的配套的HA V-IgM试剂盒中所附带的阴、阳性对照,2-8℃贮存,有效期12个月每月一次质控小结,失控要有 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 及纠正的结果。 6.操作方法 6.1待测标本用生理盐水作1:1000稀释后加100μl于反应板微孔中。 6.2充分混匀,封板,置37℃孵育20分钟。 6.3手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置5秒,甩干,重复5次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤5次程序洗板后拍干。 6.4每孔加入HA V Ag、酶结合物工作液各1滴,充分混匀,封板,置37℃孵育20分钟。 6.5手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置5秒,甩干,重复5次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤5次程序洗板后拍干。 6.6每孔加显色剂A液、B液各1滴,充分混匀,封板,置37℃孵育才10分钟。 6.7每孔加入终止液1滴,混匀。 6.8用酶标仪读数,数值取波长450nm(建议使用双波长的酶标仪比色,参考波长630nm),先用空白孔校零,然后读取各孔OD值。 7.质量控制操作程序 7.1每次实验设阴性、阳性各2孔,并设空白对照1孔随常规标本一起检测。 7.2质控结果登记到本年度的“免疫室定性检测项目室内质控登记表”。 7.3一旦发现失控,应即时查找和分析原因,并在该结果栏作详细的批注和记录解决的过程;失控情况处理及原因分析详见8“失控处理”。 7.4每月进行质控小结。并将原始数据打印和存盘留档。 8.失控处理操作程序 8.1失控情况处理:操作者在分析质控结果时,如发现质控违背了控制规则,应填写失控 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 单,上交专业室主管(组长),由专业室主管(组长)做出是否发出或重测与质控品相关的该批次病人标本检验报告的决定。 8.2失控原因分析:失控信号的出现受多种因素的影响,这些因素包括操作上的失误、试剂、对照物的存贮条件改变、仪器维护不良以及采用的质控规则、控制范围、一次测定的质控标本数等等。失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的该批病人标本报告可能作废,此时首先要查明导致失控的原因,是对照物本身的原因还是对照物以外的原因。如是对照物以外的原因则应判为真失控,与对照物相关的同批次病人标本重新检测;如是对照物本身的原因,则判为假失控,与对照物相关的同批次病人标本不必重测,可以发出报告。当失控信号出现时,可以采取以下步骤去寻找原因: 8.2.1立即重测同一对照物。此法主要用于查明人为误差,每一步都应该认真仔细的操作,以查明失控的原因;另外,这一步还可以查出偶然误差,如是偶然误差,则重测的质控结果应在允许范围(在控),可以认为该批次的病人标本不必重测。如仍不在允许范围则可以进行下一步。 8.2.2新开一瓶对照物,重测失控项目。如果新开的对照血清结果正常,那么原来那瓶对照血清可能过期或在室温放置时间过长而变质,或者被污染,此时可以认为该批次病人标本不必重测。如仍不在允许范围则可以进行下一步。 8.2.3进行仪器维护,重测失控项目。检查仪器状态,检查光源是否更换,对仪器进行清洗维护,然后再测质控品,如在控,则说明是仪器原因,该批次的病人标本应重测。如仍不在允许范围则可以进行下一步。 8.2.4更换另一试剂盒,重测失控项目。检查试剂是否过期或贮存环境,更换试剂盒重新检测对照物,如在控则说明试剂存在问题,该批次病人标本应重测。如仍不在允许范围则可以进行下一步。 8.2.5请专家帮助。前4步都未能得到在控结果,如果其他同类型检验项目在控,则需要联系试剂厂家寻求技术帮助;如果其他同类型项目也失控,则需要与仪器厂家工程师取得联系了。 9.注意事项 9.1从冷藏环境中取出的试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔反应条应置37℃平衡30分钟后方可使用,余者应及时封存于冰箱中以备后用.在平衡试剂的同时,待测标本应需置平衡30分钟后再行测试。 9.2使用前试剂应摇匀,并弃1~2滴后垂直滴加。 9.3封片不能重复使用。 9.4结果判断需在反应终止后10分钟内完成。 9.5不同批号的试剂不能混用。 9.6待测标本不可用NaN3防腐,腐烂如需稀释标本,请用小牛血清稀释。 9.7本试剂盒应视为有传染性物质,请按传染病实验室检查规程处理。 10.结果计算 10.1 样品OD值/阴性对照OD值≥2.1为阳性,反之为阴性。 10.2阴性对照OD值低于0.05以0.05计算,高于0.05按实际值计算。 11.警告值 11.1当HA V Ag-IgM的OD值在2.1-2.5之间一般视为低浓度区或灰区。 12 结果解释 12.1标本的HBcAg-IgM值≥2.1为阳性,反之为阴性。 12.2对处于灰区或可疑标本,应重复检测或进一步做确证试验。 12.3 对于假阳性结果的原因可能有:血清标本中含有颗粒性物质(红细胞)或纤维蛋白丝、前一份血清标本含有高滴度的HA V-IgM使得在加样时存在携带污染、非特异性反应存在。 12.4诊断急性甲型肝炎或了解慢性甲型肝炎活动情况,HA V-IgM检测必须同时结合甲型肝炎其他血清标志物及病人的临床表现进行综合判断。 12.5由于灵敏度的局限性,对含极低浓度HA V-IgM(低于检测限)的标本不能检出而出现假阴性,或感染正处于早期的窗口期。 12.6对于其他体液标本和血库库存血的检测结果只能作为参考。 12.7对于反复冻融的血标本或含有颗粒性物质的血标本应离心后再进行检测。 12.8肝素治疗病人的血标本可能由于部分凝固而存在潜在的纤维蛋白丝,因此可能产生错误的结果。 13.安全防护 13.1对任何一份标本(包括质控品、 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 品及检测试剂等)都应视其为具有传染性,操作人员在工作时应戴乳胶手套、穿工作服。 13.2一旦发生标本容器划破手或身体、液体溅进眼睛等粘膜处,应立即用大量的水冲洗,同时向上级医师或科领导报告,必要时施以丙种球蛋白预防。 14.常见的误差源 14.1仪器原因:仪器的性能、仪器的校准等。 14.2试剂原因:试剂过期、定标液过期等。 14.3标本原因:标本处理、收集不符合要求等。 14.4人为原因:结果填写错误等。 15.参考文献 15.1 上海实业科华生物技术公司甲型肝炎病毒IgM抗体诊断试剂盒。
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分类:小学体育
上传时间:2019-05-19
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