广药药理实验中枢神经兴奋药LD50实验报告
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中枢神经系统兴奋药对小鼠急性毒性研究
二级学院 药科学院
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指导教师
2015年12月
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中枢神经系统兴奋药对小鼠急性毒性研究
摘要:从未知药物筛选出具有中枢神经兴奋作用的目标药物,通过给药注射,观察药物对小鼠的兴奋作用,测定其LD50,以
评价
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该药物的有效性和安全性。方法:预实验:取三只小鼠,腹腔注射母液,筛选出目标药物,再将15只小鼠随机分为5组,测定LD0和LD100。正式实验:将50只小鼠随机分成5组,按计算的剂量注射稀释好的药物,观察小鼠死亡情况,以测定LD50。
关键词:LD50;中枢兴奋药
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目录
1 前言 .................................................................................................1 2 材料与方法 ......................................................................................2
2.1 实验材料...................................................................................................... .....2
2.2 实验方法........................................................................................................3
2.2.1预实验.............................................................................................................3
2.2.2正式实验.........................................................................................................4
2.3 数据处理方法.................................................................................. ................4
3 实验结果................................................................................................................5
4结论 ..................................................................................................5 参考文献..............................................................................................6
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1 前言
作用于中枢神经系统的药物主要影响递质和受体而发挥作用,而其药理效应主要表现是中枢神经系统功能的增强或抑制;通过观察动物的药物反应,可初步区分动物的特性。通过药物LD50的测定,
分析
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其安全性。
药物给药剂量与动物死亡率呈正态分布。以对数剂量为横坐标,累加死亡率为纵坐标作图,可得到一对称S型曲线,其两端较平坦,中间较陡,说明两端处剂量稍有变化时死亡率的改变不易表现出来,在50%死亡率处斜率最大,该处剂量稍有变动时,其死亡率变动最明显,即最灵敏,在技术上也最容易准确测得,故常选用LD50值作为反映药物毒性的指标。若将死亡率换算成几率单位,则对数剂量与几率单位呈直线关系,用数学方法可拟合其回归方程式,可精确地计算LD50及引起任何死亡率的剂量及相关数据。
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2 材料与方法
2.1 实验材料
动物:
动物名称:小鼠
体重范围:18~26g
动物来源:广东药学院实验动物中心
药品与试剂:
名称:中枢神经系统药物、生理盐水
来源:广东药学院药科学院药理系
2.2 实验方法
2.2.1 预实验
确定实验药物,大致探索该药物的LD100和LD0,以便正式实验时确定剂量。
实验过程:
1、确认主题,准备预实验
方案
气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载
,并在课前做方案
汇报
关于vocs治理的情况汇报每日工作汇报下载教师国培汇报文档下载思想汇报Word下载qcc成果汇报ppt免费下载
与探讨可能出现、需要注意的问题。
2、称量所取的18只小鼠,
记录
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其体重。
3、从18只小鼠中随机抽取3只小鼠,按0.1ml/10g的给药量分别注射实验提供的三瓶母液,筛选出目标药物中枢兴奋药。
4、将剩余小鼠分为5组,每组3只,进行药物兴奋致死量研究。根据小鼠体重以0.1ml/10g的剂量注射,以母液浓度为100%,初定了20%、40%、60%、80%、100%的五组不同浓度兴奋药。为避免所设置的最低浓度过高,从最低浓度开始试验,依次提高注射药物浓度,并根据实际情况调整浓度(如若在40%浓度小鼠全部死亡,则根据实际情况从新调整注射浓度)。在30分钟内观察小鼠的反应并记录死
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亡情况。
5、通过实验现象的观察,得出了我们组中枢兴奋药的LD0和LD100的所在范围。
2.2.2 正式实验
按照实验方案进行完成所选药物的LD50测定
实验剂量计算:r=(Dmin/Dmax)^(1/(n-1)) 根据预实验结果和正式实验剂量组数设计,计算出正式实验的剂量公比r为0.87,则各组剂量为:
1)262.5mg/kg
2) 262.5*0.87=228.38mg/kg
3) 262.5*0.87^2=198.6mg/kg
4) 262.5*0.87^3=172.86mg/kg
5)262.5*0.87^4=150.39mg/kg
实验过程:
1、取小鼠50只,称重,标记,随机分为5组,每组10只,进行下一步实验; 2、各组小鼠按0.1ml/10g给药量分别腹腔注射相应浓度药液,立即记录时间,观察小鼠情况,并在30分钟后记录各组死亡数量。
3、根据实验所得数据,计算LD50
2.3数据处理方法
实验结果将小鼠死亡情况,药物浓度等输入LD50数据处理程序,即可求得回归方程与LD50
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3 结果
表1 预实验筛选药物情况
组别 编号 现象 药物 1 1 小鼠无任何异常 生理盐水 2 2 小鼠跳动,呼吸加快,最后死亡 兴奋药 3 3 小鼠安静,嗜睡,最后死亡 抑制药
表2 预实验实验结果
组别 剂量(mg/kg) 现象 死亡率 1 600 小鼠兴奋,惊厥,最后死亡 100% 2 450 小鼠兴奋,惊厥,最后死亡 100% 3 375 小鼠兴奋,惊厥,最后死亡 100% 4 262.5 小鼠兴奋,惊厥,最后死亡 100% 5 150 小鼠跳动,呼吸加快 0%
表 3 正式实验实验结果
组别 剂量 现象 死亡率
小鼠跳动,呼吸加快,最后死亡 1 262.5 100%
小鼠跳动,呼吸加快,最后部分死亡 2 228.38 30%
小鼠跳动,呼吸加快,最后部分死亡 3 198.69 40%
小鼠跳动,呼吸加快 4 172.86 0%
小鼠跳动,呼吸加快 5 150.39 0%
表4 中枢实验药LD50测定
组别 剂量对数剂量动物数死亡动物数死亡率几率单位及95%可信度
(只) (只) (mg/kg) (X) (%) (Y)
1 262.5 2.419 10 10 100 33.000 =185.6062mg/kg
95%可信度: 2 228.38 2.359 10 3 30 4.480
3 198.69 2.298 10 4 40 4.750
4 172.86 2.238 10 0 0 0.003
4 5 150.39 2.177 10 0 0 0.003
4结论
预实验中测得引起死亡的最大无效量为150mg/kg,最小有效量为262.5mg/kg。 正式实验后求得该中枢神经系统抑制药的LD50为185.6115mg/kg。
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参考文献
[1] 黄胜炎 作用于中枢神经系统药物新制剂 上海医药 2008年09期 (第31-33页)
[2] 谭毓治 药理学实验 人民卫生出版社 广州 2008年12月 (第89-90 136-137页)
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