系统性红斑狼疮患者自身抗体检测的临床意义

系统性红斑狼疮患者自身抗体检测的临床意义 日期:2010-06-13来源:作者: 点击:103次    0 条评论     作者单位：山东省潍坊医学院附属医院免疫风湿科，山东 潍坊 261031 【摘要】 目的：探讨抗核小体抗体(anti-nucleosome antibody,ANuA)、抗双链DNA抗体(anti-doublestrandedDNA，dsDNA)、抗史密斯抗体D1(Anti-SmD1antibody,SmD1)等特异性自身抗体联合检测在SLE的诊断及临床应用中的价值。方法：分别用酶联免疫吸附(ELISA)法和间接免疫荧光法检测SLE患者及对照组患者血清中的ANuA、抗dsDNA、抗SmD1抗体，并分析它们之间的关系。结果：70例SLE患者中单项检测抗dsDNA、抗SmD1、ANuA的阳性率分别为40.0%、75.7%、64.3%，三者联合检测后的阳性率为87.1%。结论：抗SmD1、ANuA、抗dsDNA联合检测提高了诊断的敏感性，对SLE的诊断和治疗有重要意义。 【关键词】 抗核小体抗体 抗双链DNA抗体 抗SmD1抗体 系统性红斑狼疮 Study on the relationship between autoantibodies and systemic lupus erythematosus 【Abstract】 Objective：To investigate the clinicalsinificance of determing anti-SmD1,anti-nucleosome(ANuA)and anti-double stranded DNA(dsDNA) in SLE and to analysis the relationship in SLE.Methods：ELISA and indirect immunofluorescence respectively method were used to measure the anti-SmD1,ANuA and anti-dsDNA in serum of 70 SLE patients,27 patients of other rheumatic diseases and 20 healthy people. Results：The positive rate of anti-dsDNA,anti-SmD1 and AnuA in the patients with SLE was 40.0%、75.7%、and 64.3% respectively. After combined determination of anti-dsDNA，anti-SmD1 and ANuA,the positive rate rose to 87.1%.Conclusion：The combined determination of anti-dsDNA.anti-SmD1 and ANuA may improve the sensitivity and efficiency of laboratory diagnosis of SLE and has an important significance in diagnosis and treatment of SLE. 【Key words】 Anti-nucleosome antibody;Anti-double stranded DNA antibody;Anti-SmD1 antibody;Systemic lupus erythematosus 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythemtosus,SLE)是一种常见的多系统损害自身免疫性疾病。其主要特征是体内产生多种抗核抗体(ANA)，如抗双链DNA抗体(抗dsDNA抗体)、抗史密斯抗体(抗Sm抗体)、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体(ANuA)等，而引起自身多组织、多器官以血管炎为特征的弥漫性损害的疾病。目前，SLE的实验室检查主要检测抗dsDNA抗体、ANuA、抗Sm抗体等。研究用抗Sm对应的抗原结构中一种蛋白组分(D1)的多肽顺序取代整个Sm分子作抗原，检测患者血清中的抗SmD1，提高了检测的灵敏度［1］。本文检测了70例SLE患者抗核小体抗体、抗双链DNA抗体、抗SmD1，讨论它们在SLE的诊断中的意义。 1 材料和方法 1.1 实验对象 70例SLE以及其他结缔组织病27例均来自2004年10月至2006年10月潍坊医学院附属医院免疫风湿科住院患者，其中男6例，女64例，年龄14～65岁，平均年龄33岁。均符合1982年美国风湿病学会修订的SLE诊断 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 。其他结缔组织病27例，男5例，女22例，年龄18～67岁，平均年龄42岁。其中，类风湿关节炎13例、雷诺综合征4例、多发性肌炎4例、干燥综合征6例，诊断均符合相应的诊断标准。我院正常健康体检者20例(均无肝、肾病史及结缔组织病)作为对照组，男17例，女26例，年龄14～66岁，平均年龄43岁。所有标本采集后分离血清-20℃保存备用。 1.2 实验方法 抗dsDNA、抗SmD1测定采用间接免疫荧光法；ANuA测定采用ELISA法。试剂均由欧蒙(德国)医学实验诊断股份公司提供。 1.3 统计学处理 组间率比较采用χ2检验。 2 结果 2.1 3种自身抗体在SLE及对照组中的阳性情况以及阳性率比较 70例SLE患者中血清抗dsDNA、抗SmD1和ANuA单项检测的阳性率分别为40.0%、75.7%、64.3%；抗dsDNA和抗SmD1联合检测的阳性率为82.9%(58/70)，抗SmD1和ANuA联合检测的阳性率为84.3%(59/70)，抗dsDNA和ANuA联合检测的阳性率为82.9%(58/70)；抗dsDNA、抗SmD1和ANuA 3种自身抗体联合检测(有一自身抗体阳性即为联合检测阳性)阳性率为87.1%(61/70)。由此可见，以3种自身抗体联合检测的阳性率最高。同样，3种自身抗体单项检测和联合检测在SLE中的阳性率与其他结缔组织病及正常对照组比较差异有显著性(P＜0.05)，而其他结缔组织病与正常对照组比较差异无显著性，见表1。表1 3种自身抗体在SLE及对照组中的阳性例数及阳性率注：与其他结缔组织病组比较，*P＜0.05；与正常对照组比较，#P＜0.05。 2.2 3种自身抗体诊断SLE的敏感性、特异性、预测值的比较 从表1得出，3种自身抗体联合检测和单项检测的敏感性、特异性、预测值。3种自身抗体联合检测与单项检测比较，特异性由100%降低到77.8%，但敏感性由40.0%提高到87.1%，见表2。表2 抗dsDNA、抗SmD1、ANuA诊断SLE的敏感性、特异性、预测值 3 讨论 SLE常累及全身多个脏器，临床表现多种多样，单根据临床表现难以特异性诊断，因此，自身抗体的检测对SLE诊断有非常重要的意义。抗Sm是一类抗核糖核蛋白粒子抗体，其相应抗原由U-RNA和共同核心蛋白(即B，B，N，D1，D2，D3，E，F，G蛋白)组成。目前公认抗Sm抗体几乎仅见于SLE，是SLE的特异性标志之一，在SLE诊断中特异性最高，在患者血清中出现后将持续阳性，可作SLE回顾性诊断指标［2］，不受病情活动及治疗的影响。但其阳性率偏低，一般为30%～40%。而D1蛋白是最重要的Sm抗原［1］，本文用D1蛋白的一个多肽顺序(83-119)来取代整个Sm抗原检测患者血清中的抗SmD1,阳性率达75.7%，特异性为85.6%，20例健康人也全部阴性，在其他结缔组织病中阳性率为14.4%，大大提高了诊断SLE的敏感性，因此，抗SmD1抗体可能是SLE的一个既敏感又特异的指标。 抗dsDNA抗体是SLE标志性抗体，几乎存在于所有患者的血清中［3］，与临床表现密切相关，它是SLE活动期的标志，但可能由于患者血清中有过多的游离DNA抗原，与相应的DNA抗体结合导致检测结果比较低。因此，抗dsDNA结果阴性，不能排除SLE的诊断。抗dsDNA对SLE诊断的特异性较高，但敏感性较低。本文结果显示，抗dsDNA只在SLE中出现，对照组均阴性，特异性高达100%，但阳性率只有40.0%，单靠抗dsDNA诊断SLE漏检率高。此外有研究证明，抗dsDNA和DNA结合成为免疫复合物在肾小球基底膜沉积，或抗体直接作用于肾小球抗原而造成SLE患者的肾损伤［4］。抗dsDNA对于SLE的诊断和鉴别诊断、监视治疗和病情追踪以及判断预后等有重要意义。 抗核小体抗体(ANuA)是1978年Hannested［5］等首先描述，核小体(Nuleosome)是细胞染色质的基本单位，且是SLE的发病过程中一种主要的自身抗原，其核心是由8个带正电荷的组蛋白分子(H2A、H2B、H3和H4各2个分子)组成，这种八聚体的复合物中，H3、H4位于中心，H2A、H2B位于两侧。当细胞受到致病因素损伤时，细胞的线粒体肿胀，胞膜破裂，核小体释放，刺激T细胞的增生活化，进而激活B细胞，产生抗核小体抗体、抗dsDNA抗体，并形成抗原抗体复合物参与SLE的发病［6］。本实验研究示，在SLE患者中ANuA阳性率64.3%。且抗核小体抗体与SLE患者的疾病活动性、肾炎和精神神经因素密切相关［7～9］，认为抗核小体可能成为SLE诊断新的标记性抗体［10］。ANuA对SLE诊断的敏感性高，特异性强可能是SLE诊断的标记性抗体之一；尤其对dsDNA抗体、Sm等抗体阴性的SLE的诊断具有重要意义［11］；ANuA可出现在疾病进程的各个时期，并与疾病的活动性密切相关。 本实验显示，抗dsDNA特异性好而敏感性差，抗SmD1敏感性高而特异性差，ANuA的敏感性、特异性介于抗dsDNA和抗SmD1之间，3种抗体两两之间联合检测的阳性率均低于它们同时检测的阳性率。虽同时检测后的特异性低于单项检测的特异性，但提高了SLE诊断的敏感性，避免因单项检测出现的漏诊情况。因此，3种自身抗体联合检测更有利于全面分析病情所处的阶段，提高SLE的检出率，对SLE病情的诊断、分型、治疗、追踪和预后判定有重要的意义。 【参考文献】［1］ Riemekasten G.Marell J.Trebeljahr G,et al.A novel epitope on the C-terminus of SmD1 is recognized by the majority of sera from patients with systemic lupus erythematosus［J］.J Clin Invest,1998,102(4):754-763.［2］ 唐福林.抗核小体抗体的临床意义［J］.中华风湿病学杂志，2003，7(8)：457.［3］ 吴 瑾.抗dsDNA抗体抗原识别及致病性分子基础［Ｊ］.中华风湿病学杂志，2001，5：380-381.［4］ 常玉荣，王元福，尹凤荣，等.抗双链DNA抗体与狼疮细胞检查对系统性红斑狼疮的诊断意义［J］.中国综合临床，2001，17(8)：643.［5］ Hannetad K，Stollar BD.Certain rheumatoid factor react with nucleosomes［J］.J Nature,1978,275：671-673.［6］ Bruns A, Bla,～s S,Hau～orf G,et al.Nuleosomes are major T and B cell autoantigens in systemic lupus erythematosus［J］.Arthritis Rheum,2000,43:2307-2315.［7］ Gutierrez Adrianzen OA,Koutouzov S,Mota RM,et al.Diagnostic value of anti-nucleosome antibodies in the assessment of disease activity of systemic lupus erythematosus:a prospective study comparing anti-nucleosome with anti-dsDNA antibodies［Ｊ］.J Rheumatol,2006,33(8):1538-1544.［8］ Min DJ,Kim SJ,Park SH,et al.Anti-nucleosome antibody:significance in lupus patients lacking anti-double-stranded DNA antibody［J］.Clin Exp Rheumatol,2002，20(1)：13-18.(下转第342页) (责任编辑：admin)