论慢性阻塞性肺疾病患者人类巨细胞病毒感染状态及与细胞免疫功能的关系.doc

论慢性阻塞性肺疾病患者人类巨细胞病毒感染状态及与细胞免疫功能的关系.doc 论慢性阻塞性肺疾病患者人类巨细胞病毒 感染状态及与细胞免疫功能的关系 --> [摘 要] 目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的人类巨细胞病毒 (HCMV)感染状态,及其与细胞免疫功能的关系。 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 :对60例COPD 患者及60例对照组的血清应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 HCMV-IgM、HCMV-IgG,用聚合酶链反应(PCR)方法检测血清中 HCMV-DNA,用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群的分布。 结果:COPD患者重度组的HCMV抗体阳性率、血清HCMV-DNA阳 性率均高于对照组,细胞免疫功能低下;COPD患者中HCMV-IgM阳 性者的细胞免疫功能低于HCMV-IgM阴性者。结论:绝大多数重症 COPD患者免疫功能低下,并伴有HCMV的感染,免疫功能低下与 HCMV的感染可互为因果。 [关键词] 肺疾病 阻塞性/并发症 巨细胞病毒感染 细胞免疫 Ralationship betan Cytomegalovirus Infectionin PatientsonaryDisease and Cell-mediated Immune [Abstract] Objective: To observe the HCMV infection in patients ediated immune. Methods: Serum HCMV-IgM and IgG 60 patients HCMV DNA phocytes subpopulation in peripheral blood etry. Results: HCMV antibody positive rate and the serum HCMV-DNA positive rate of severegroup of COPD patients munologicfunction in severe group of COPD. Cellular immunologic function of patients having positive HCMV-IgMmunologic function and HCMV infection in severe COPD patients. It could be of mutual cause and effectbetmunologic function and HCMV infection. [Key egalovirus infections; Cellular Immunity 人类巨细胞病毒(HCMV)为双链线状DNA病毒,属疱疹病毒科,具有 潜伏-活动的生物学特性。 HCMV在人群中感染极为广泛,正常个体多为无症状的隐性感染, 但在免疫功能低下的个体,病毒易于播散而产生明显的临床症状。 HCMV的感染在妇产科、儿科及器官移植方面已有充分的研究,但在 慢性阻塞性肺疾病(COPD)时HCMV的感染率,以及与细胞免疫功能之间的相互关系却鲜为人知。本研究对60例COPD患者血清用ELISA法检测HCMV抗体,用PCR法检测HCMV-DNA,并对患者的细胞免疫功能进行检测,了解COPD时HCMV的感染率,并探讨与细胞免疫功能低下之间的相互关系。 1 材料与方法 1.1 实验对象 60例COPD患者均系本院住院患者,其诊断分期、分级均按中华医学会呼吸病学分会制定的标准[1]执行,患者入院前2周内未曾应用肾上腺皮质激素,并未患心血管疾病、免疫缺陷疾病、高球蛋白血症、自身免疫疾病及其它肺部疾病。 将患者分为轻、中、重3组,每组20例。其中男性35例,女性25例,年龄在35~82岁之间,平均年龄59.2岁。60例正常对照组,为经健康检查确认的健康人,年龄50~65岁,平均55.3岁,男47例,女13例。 1.2 标本采集 患者入院当天采静脉血,其中3 ml不抗凝,分离血清-84?冰冻;抗凝血1 ml,采用枸橼酸钠抗凝,2 h内检测T淋巴细胞亚群。 1.3 病毒抗体的检测 应用ELISA方法检测血清中HCMV-IgM、IgG;PCR方法检测血清中HCMV-DNA,严格按试剂盒说明书操作。HCMV-IgM、IgG酶联免疫检测试剂盒购自北京现代高达生物技术有限责任公司,PCR试剂盒为伊利康生物技术有限公司产品。 1.4 T淋巴细胞亚群检测 毕业论文应用美国B-D公司生产的FACSCalibur型流式细胞仪检测CD3、CD4、CD8,所用试剂盒异硫氰酸荧光素(CD3FITC)、藻红蛋白(CD4PE、CD8PE)均由美国Couter公司提供,用淋巴细胞自动 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 软件(Cellquest)获取数据文件进行FSC-SSC-Gating分析。 1.5 统计学处理 计量资料采用χ2检验,组间比较采用t检验。 2 结 果 2.1 COPD患者与对照组HCMV-IgM、IgG检测结果 60例COPD患者,HCMV抗体阳性者共43例(71. 67%),对照组抗体阳性者32例(53.33%),两组比较差异有显著性。COPD患者组中HCMV-IgM阳性者11例(18.33%),其中10例伴有HCMV-IgG阳性,只有1例HCMV-IgG阴性;HCMV-IgG阳性者42例(70%)。对照组中有31例HCMV-IgG阳性(51. 67%),其中HCMV-IgM阳性者有1例(1.67%)。COPD 患者的 -->轻、中度组与对照组比较无差异,而重度组与对照组比较差异有显著性。 2.2 PCR检测COPD患者与对照组血清中HCMV-DNA结果 60例COPD患者HCMV-DNA阳性者49例(81.67%),对照组HCMV-DNA阳性者36例(60%),两组比较HCMV-DNA阳性率差异有显著性。COPD患者的轻、中度组与对照组比较无差异,而重度组与对照组比较差异有显著性。 2.3 COPD患者轻、中、重度组与对照组T淋巴细胞亚群测定结果 见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1。 2.4 HCMV-IgM(+)与HCMV-IgM(-)COPD患者的T淋巴细胞亚群检测结果 见表2。 3 讨 论 HCMV检测方法目前主要有以下几种:?从受检者的血、尿、唾液或组织等任何一种中分离出CMV;?在组织细胞中见到典型的包涵体;?用特异的单克隆抗体从组织或细胞中检测到CMV抗原;?用分子杂交或PCR法从受检材料中检出CMV mRNA或DNA特异片段,此法敏感且特异性高;?血清学检查HCMV-IgM、IgG,人体感染HCMV后3~5 d即可出现HCMV-IgM,持续12~16周左右[2],出现早,消失快,是诊断HCMV近期活动性感染的可靠指标[3]。HCMV-IgG常在原发感染后2~3周出现,并相对恒定地在宿主中终身存在,因此HCMV-IgG阳性说明曾感染过HCMV。由于HCMV可以通过细胞融合扩散病毒,避免与中和抗体接触,因此HCMV-IgG阳性还表明可能处于潜伏感染状态。本文采用第4种及第5种方法检测血清,除了这两种方法的上述优点外,血清易得也是重要原因。本研究中,抗体检测HCMV抗体阳性者为71.67%,PCR检测HCMV-DNA阳性者为81.67%,而且全部抗体检测阳性者PCR检测均为阳性。不过由于PCR可检出体内无复制的DNA片段,因此不能区分出HCMV是处于潜伏状态或活动状态[4]。有资料显示,有些带毒者HCMV-IgM始终阴性,但体内确有潜伏的可传播的HCMV病毒存在[5]。如果配合抗体(IgM及IgG)检测,则能更好地表明HCMV的感染状态。 本研究中虽然COPD组HCMV抗体阳性率及HCMV-DNA阳性率均高于对照组,但如果将COPD患者再分为轻、中、重3组,则发现只有重组的HCMV感染明显高于对照组,差异有显著性,因此重度COPD应考虑有HCMV感染。在COPD患者中HCMV-IgM阳性者 11例。其中1例IgG阴性,考虑为原发感染;另外10例IgG阳性,则为继发活动性感染,说明在COPD人群主要为感染复发或再次感染;其余的IgG阳性32例由于DNA检测均为阳性,因此考虑为潜伏感染。 在本研究中,应用流式细胞术检测外周血中T细胞各亚型所占比例来反映机体的细胞免疫状态检测结果表明,COPD患者的轻、中度组与正常对照组比较,T淋巴细胞亚群无差异,而重度组与对照组比较,CD3、CD4、CD4/CD8,CD3CD4均降低,即T细胞总数降低,Th细胞减少, Th/Ts比值下降,而Ts数量变化不明显。CD4/CD8比值降低主要是CD4数量下降的结果。本研究结果显示COPD患者的轻、中度组不是免疫功能低下群体,而重度组存在细胞免疫功能低下。如将HCMV-IgM阳性的COPD患者与HCMV-IgM阴性的COPD患者的T淋巴细胞亚群进行比较,前者的CD3、CD4、CD4/CD8及CD3CD4的数值均低于后者,显示前者的细胞免疫功能低于后者,显然HCMV的感染与免疫功能有着负相关关系。免疫功能低下时易发生HCMV的感染,这一点已被公认。有研究表明HCMV的感染又可影响机体的免疫系统,进一步加重了COPD患者的免疫功能紊乱[6],其机理尚待研究。有学者认为HCMV感染抑制了CD4细胞的激活[7],同时其产生IL-2和IFN降低,从而影响产生抗HCMV的效应细胞。另外HCMV感染易累及外周血单核细胞,降低其所引起的CD4对PHA的增殖反应[8],使CD4细胞降低,同时单核吞噬细胞功能也受到影响,IL-1分泌减少,IL-1是激活CD4细胞的第二信使,所以IL-1降低可致CD4进一步降低,从而CD4/CD8比例失调。 总之,本研究结果表明,绝大多数重症COPD患者免疫功能低下,并伴有HCMV的感染。免疫功能低下与HCMV的感染可互为因果。对重症COPD的治疗应辅以抗HCMV药物,并采取提高免疫功能的 措施 《全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观软件质量保证措施下载工地伤害及预防措施下载关于贯彻落实的具体措施 。 [-->vels of cylcins, phosphorylated Rb, and p53,leading to cell cycle arrest [J]. J Virol, 1995, 69 (11): 6697-6704.