[doc格式] 芦荟总苷提取物对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

[doc格式] 芦荟总苷提取物对小鼠酒精性肝损伤的保护作用 芦荟总苷提取物对小鼠酒精性肝损伤的保 护作用 JournalofMedicalForumVo1.29No.20October2008 芦荟总苷提取物对小鼠酒精性肝损伤的 保护作用 李建平,张跃文,方晓艳,杨呖,王琳琳,杨文胜 河南中医学院中药药理与药理学教研室郑州市450008 ? 5? 摘要目的研究芦荟总苷提取物对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用及其作用机制. 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 采用昆 明种小鼠(18,22g),随机分为对照组,模型组,空白组和芦荟总苷提 ,低3个剂量组,分别灌胃给药. 取物高,中 连续酒精灌胃(空白组除外)造成小鼠急性酒精性肝损伤模型,测定血清谷丙转氨酶(A),谷草转氨酶(AST) 的活性和肝脏匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量.结果模型纽的肝脏过氧化反应 增强.肝组织匀浆中丙二醛含量明显高于对照组和三个剂量组,差异有显着性(P<0.01);对照组和高,中剂量 组SOD活性高于模型组(P<0.01).结论芦荟总苷提取物对小鼠酒 精性肝损伤具有较明显的保护作用. 关键词芦荟总苷;肝损伤;小鼠;酒精;肝脏保护 中图分类号:R一332文献标识码:A文章编 号:1672.3422(2008)20-0005-03 ProtectiveEffectsofAbstractionofAloeon AlcoholismLiverInjuryinMice LIJianping,ZHANGYuewen,FANGXiaoyan,etal HenanCollegeofTraditionalChineseMedicine,Zhengzhou450008,China ABSTRACTObjectiveTostudytheprotectiveeffectsoftheTotalGlycosideofaloeonetha— nol—inducedacuteliverinjuryanditsmechanism.MethodsMiceofKunming(18,22g)wereran— domlydividedintocontrolgroup,modelgroupandthreeTotalGlycosideofAloegroups(50g/kg, 100g/kg,200g/kg).ThenTotalGlycosideofAloeandAlcoholwasgiventotheanimalsbyforcedper— fusegastricallyfor15days.Theactivityofalanineaminotransferase(ALT),andaspartateaminotrans— ferase(AST)inmiceserumweremeasured,meanwhile,superoxidedismutase(SOD)andmalondial- dehyde(MDA)intheliverweredeterminedwhenthemicewerecontinuouslytreatedfor10days.Re- sultsThehepaticlipidperoxidationreactionwaspromotedten—dayadminist rationofethanolinmod— elgroup.Thelevelofmalondialdehyde(MDA)inmodelgroupwassignificantlyhigherthanthatof miceincontrolgroupandthreeAloetreatedgroups;TheSOD,whichwascontendedinthehighgroup, themiddlegroupishigherthanthatofthemodelgroup.ConclusionTheTotalGlycosideofAloehad significantprotectiveeffectOiltheliverinjuryofmice. KEYWORDSTotalGlycosideofAloe;Liverinury;Mice;Alcoholic;Protectiveeffectofliver 中药芦荟为百合科植物库拉索芦荟Aloe VeraL,好望角芦荟AloeferoxMill或其他同属 近缘植物叶的浓缩干燥物….其性味苦寒,归 肝,胃,大肠经,具有泻热,导积,杀虫,凉肝之功 效.芦荟提取物具有多种药理功效,如抗肿瘤, 抗炎,抗菌,泻下,抗动脉粥样硬化,增强免疫力 1新乡医学院量全学院新乡市453003 等作用J.近来研究还 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明,芦荟具有抗脂质 过氧化,减轻肝损伤的作用j.本实验以酒精 致小鼠急性肝损伤为模型,联苯双酯(Bif)为阳 性对照,以芦荟总苷提取物高,中,低不同剂量 给小鼠灌胃,观察芦荟总苷提取物对小鼠酒精 性肝损伤的保护效果,并对其保护肝脏的作用 机制进行初步探讨. ? 6?医药论坛杂志2008年10月第29卷第20期 表1芦荟总苷提取物对酒精性肝损伤小鼠血清转氨酶含量的影响(?s) 注:模型组比较P<005,P<0.Ol;与正常组比较JD<0Ol 表2芦荟总苷提取物对肝组织中MDA含量和SOD活性的影响(?s) 注:比模型组比较P<005,P<001;与正常组比较P<0.01 1材料与方法 1.1材料6,8周龄昆明种小鼠,早6各半,体重 18,22g,由郑州大学医学院动物实验中心提供;芦荟 总苷提取物由河南中医学院药理教研室提供. 1.2方法 1.2.1模型制备56度白酒0.1ml/kg每日分两 次灌胃,任意饮水,共l5d. 1.2.2分组与给药90只昆明种小鼠随机分为6组: 空白组,模型组,阳性对照Bif组,芦荟总苷提取物高, 中,低3个剂量组,每组15只.芦荟总苷治疗组给予受 试品,空白对照组和模型对照组灌胃给予等量蒸馏水. 给予受试样品的同时,模型对照组及芦荟总苷提取物 高,中,低3个剂量组灌胃给予56度白酒Qlml/kg,2 7欠/d;空白对照组给予等量蒸馏水,末次给药后禁食 12h,眼球取血处死,取血清与肝组织备检. 1.2.3MDA,SOD检测取小鼠肝组织冰浴匀浆, 按试剂盒说明操作(SOD试剂盒,批号20050201; MDA试剂盒,批号20050123南京建成). 1.2.4AST,AJJrr检测取小鼠血清按试剂盒说 明操作(AST试剂盒,批号20041021;AIJT试剂盒, 批号20050221;海荣盛生物技术有限公司). 1.3统计方法用SPSS10.0统计软件进行单因 素方差分析,q检验,检验水准=0.05,所有数据 以(戈?S)表示. 2结果 2.1对动物死亡率及体重 的影响模型组动物死亡5 只,死亡率为0.30;芦荟低, 中,高剂量组及联苯双酯组 动物死亡率分别为0.33, 0.27,0.27,有下降的趋势, 但各组之间比较,差异无统 计学意义(P>0.05). 模型对照组体重增加 较慢,而给药组除芦荟总苷 低剂量组外体重均增加较 快,芦荟总苷提取物中,高 剂量组和阳性对照联苯双 酯组与模型对照组比较,差 异有统计学意义 (P<0.05). 2.2芦荟总苷提取物对酒 精性肝损伤小鼠血清转氨 酶含量的影响与空白组比较,模型组血清A及 AST含量显着升高,说明造模成功.与模型组比较, 芦荟总苷高剂量组血清AST含量明显低于模型组; 联苯双酯组及芦荟总苷中剂量组小鼠AST含量低 于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),见表1. 2.3芦荟总苷提取物对肝组织中丙二醛(MDA) 含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响正常 组,阳性对照组和芦荟总苷提取物高剂量组的丙 二醛(MDA)含量均显着低于模型组,芦荟总苷提 取物低剂量组与模型组比较有统计学意义 (P<0.05);芦荟总苷提取物中剂量组与模型组 比较,差异有统计学意义(P<0.01);见表2. 3讨论 酒精性肝病(alcoholicliverdisease,ALD)近 年来在我国有明显增多的趋势,成为仅次于病毒 性肝炎的第二大肝病病因(酒精性肝病包括酒精 性脂肪肝,酒精性肝炎,酒精性肝硬化.其确切 的发病机制不清,但是免疫因素和自由基介导的 肝损伤被认为是最重要的致病因素l5].ALT,AST 主要存在于细胞核和线粒体内,当肝细胞明显受 损害时释放入血,血清ALT,AST的升高是反映肝 损伤的特异性指标,本研究表明,与模型组比较, 芦荟总苷高剂量组血清AST含量明显低于模型 组;联苯双酯组及芦荟总苷中(转9页) JournalofMedicalForumVo1.29No.20October2008 范围比较宽(pH=1.5,13)J.盐酸洛美沙星分 子结构中含有羧基和碱性的哌嗪基团,具有酸碱 两性的性质,易溶于酸,碱中,在中性溶液中溶解 度较小,故采用缓冲液溶解样品,提高重现性. 4.3pH值的选择对毛细管来说,在pH<2.5 时,硅羟基基本不解离,电渗接近于零;在pH>10 时,硅羟基基本完全解离,电渗变化很小;当pH在 4,10时,硅羟基的解离度随pH上升而迅速增加, 电渗亦迅速增加.我们将运行电解质依次换成pH 为1.86,3.04,4.00,8.34,9.86的缓冲液,根据出 峰时间的长短及峰形的好坏,发现在pH4.00时出 峰时间在5min左右,基线平稳,峰形较好,故选择 pH4.00的缓冲液作为运行介质. 4.4分离电压的选择从电压15kV开始,出峰 时问为12min,依次增大电压为18kV,20kV,22kV, 25kV,其中在25kV时5min即出峰,峰形尖且对 称,基线平稳.故选择25kV作为运行电压. 4.5进样方式及进样时间的选择通过比较毛 细管电泳的三种进样方式(电动进样,压力进样和 扩散进样),我们采用了压力进样.在实验过程 中,毛细管一经插入样品液,就应该立即开始进 样,否则将会产生毛细作用和虹吸现象,引起误差 并使谱带展宽.为了保证较好的重现性,每次应 尽量在相同的条件下进样.用50mg/L的洛美沙 星 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 液进样,进样时间依次设为10s,5s,3s,,时 间越长,峰形展宽,且拖尾.故选择进样3s. 4.6检测方式及检测波长的选择由于洛美沙 ? 9? 星分子结构含有苯环,羰基,羧基等共轭基团,在 紫外区有特征吸收,故采用紫外检测器.分别检 测275nm,282nm,287nm,295nm处的波长,通过三 维立体图发现,282nm处的吸收最大,故选择 282nm为检测波长. 5结论 本文采用高效毛细管电泳法测定盐酸洛美沙 星片的含量,并对实验条件进行优化,得到了满意 的结果.为该药的质量控制和临床监测提供了一 种简便,快速的方法. 参考文献 1陈义.毛细管电泳技术及应用[M].北京:化学工业出版 社,2000:46 2李好枝.体内药物分析[M].北京:中国医药科技出版 社,2001:354-356 3李端.药理学[M].北京:人民卫生出版社 4中华人民共和国药典委员会编.中华人民共和国药典 (2005版第二部)附录XVE.北京:化学工业出版社 5杜斌,吴春丽,张振英.HPCE法测定地塞米松磷酸钠注 射剂的含量[J].郑州大学(医学版),2006,41(1): 154—156 6陈瑞杰,朱晓燕,陈帆.高效毛细管电泳法测定盐酸洛 美沙星颗粒中洛美沙星的含量[J].中国医院药学杂 志,2005,25(6):538—540 2008-08-08收稿 (接6页)剂量组小鼠AST含量低于模型组.说 明芦荟总苷提取物可能对小鼠酒精性肝损伤有一 定的保护作用. 超氧化物歧化酶(SOD)对机体的氧化与抗氧 化平衡起着重要的作用,此酶能清除超氧阴离子 自由基,保护细胞免受损伤..MDA为脂质过 氧化产物,其含量可反映机体内脂质过氧化程度, 间接反映出肝细胞受损伤的程度.本研究表明, 芦荟总苷提取物高,中剂量组均可降低肝细胞损 伤后MDA的含量,阳性对照组和芦荟总苷提取物 高,中剂量组均可显着提高肝脏中SOD的活性. 表明芦荟总苷提取物的抗氧自由基作用,可能是 其对小鼠酒精性肝损伤保护作用的机制之一. 参考文献 1万金志,乔悦昕.芦荟的化学成分及其研究[J].中草 药,1999,30(2):151—153 2何池义(综述),吴万春,韩真(审核).芦荟的药理作用 [J].中国临床药理学与治疗学,2003,8(3):261—264 3翁锦树.芦荟素治疗原发性肝癌9例临床体会[J].实 用中西医结合杂志,1997,10(3):205 4陈宏慈,吴勇,甘爱萍.中医药治疗酒精性肝病的临床 与实验研究概况[J].湖北中医杂志,2000,22(1):51— 53 5HouYN,ZhuXY,LiangXL,ChengGF.Effectofstilbene Polymer(Gn一3)OI1experimentalliverinjuriesinmice [J].YaoXueXuebao,2001,36(2):81—83 6方允中,李文杰.自由基与酶(基础理论及其在生物学 和医学中的应用)[M].北京:科学出版社,1999:200— 205 7任岱,王一凡,姚银秀,等.芦荟对超氧阴离子自由基链 式反应的影响[J].中国现代医学杂志,1999,(9)6:22— 24 2008-08-08收稿