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一种诊断昆虫微孢子虫病的简易方法

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一种诊断昆虫微孢子虫病的简易方法一种诊断昆虫微孢子虫病的简易方法 实璇 艋扬镰第33卷第5期(2007) PLANTPR0TECT10NVo1.33No.5(2007)?133? [23 [3] [4] [5] [6] [7] GuiderC].CommonWealthScientificandIndustrialReseareh ()rganization.1999:197. MARTINJH,MIFSUDD,RAPISARDAeThewhiteflies (Hemiptera:Aleyrodidae)ofEuropean...

一种诊断昆虫微孢子虫病的简易方法
一种诊断昆虫微孢子虫病的简易 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 实璇 艋扬镰第33卷第5期(2007) PLANTPR0TECT10NVo1.33No.5(2007)?133? [23 [3] [4] [5] [6] [7] GuiderC].CommonWealthScientificandIndustrialReseareh ()rganization.1999:197. MARTINJH,MIFSUDD,RAPISARDAeThewhiteflies (Hemiptera:Aleyrodidae)ofEuropeandtheMediterranean Basin[J].BullEntomolRes,2000,90:407—448. BROWNJK,FRClHLICHDR,ROSELLReThesweet potatoorsilverleafwhiteflies:biotypesofBemisiatabaciora speciescomplex[J].AnnRevEntomol,1995,40:511—534. PERRINGTMTheBemisiatabacispeciescomplex[J].Crop Prot,2001,2O:725—737. 张芝利,罗晨.我国烟粉虱的发生危害和防治对策J].植物保 护,2001,27(2):25—30. 罗晨,姚远,王戎疆,等.利用mtDNACOI基因序列鉴定我 国烟粉虱的生物型[J].昆虫,2002,45(6):759763. XURM.TheoccurrenceanddistributionofBemisiainChina [M]?GERLINGD,MAYERRBemisia1995:taxonomy, biology,damage,controlandmanagement.AndoverHants, UK:InterceptLtd,1996:125—131. [8]罗晨,张芝利.烟粉虱Bemisiatabaci(Oennadius)研究概述 [J].北京农业科学,2000,增刊(烟粉虱专辑),4—13. [9]臧连生,江彤,徐婧,等.烟粉虱B型与两个非B型种群的 SCAR分子标记[J].农业与生物技术,2006,14:208 — 212. [1O]吕志创,张桂芬,万方浩,等.天敌对烟粉虱捕食作用的 SCAR标记检测l_J].中国农业科学,2005,38:1167—1173. r11]ZHANGGF,LUZHCH,WANFH,eta1.Real—timePCR quantificationofBemisiatabaci(Homoptera:Aleyrodidae)B- biotyperemainsinpredatorguts[J/OL].MolEcolNotes, 2007.10.1111/j.1471—8286.2007.01819.x [12]褚栋,刘国霞,范仲学,等.烟粉虱复合种不同地理种群的遗 传分化[J].中国农业科学,2006,39:1571—1580. r13]DELEONJH,FOURNIERV,HAGLERJR,eta1.Devel opmentofmoleculardiagnosticmarkersforsharpshootersHo malodiscacoagulataandHornalodiscaliturataforuseinpred— atorgutcontentexaminations[J].EntomolExpAppl,2006, 119:1O9—119. 种诊断昆虫微孢子虫病的简易方法 问锦曾,王音,王海鸿 (中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100094) 摘要介绍一种利用鉴别寄主感染组织形态特征的变异来诊断昆虫微孢子虫病,鉴 别微孢子虫种的方法. 关键词微孢子虫;鉴别;组织;形态学特征 中图分类号S476.14 Asimplemethodfordiagnosis0fmicr0sp0ridi0sisinfectinginsects WenJinzeng,WangYin,WangHaihong (StateKLaboratoryforBiologyofPlantDiseasesandInsectPests, InstituteofPlantProtection,CAAS,Beijing100094,China) AbstractItwasfoundthatthevariationsinmorphologicalcharacteristicsoftheinfectedtissue sondifferenthosts mightbeusedtodistinguishthespeciesofmicrosporidia. Keywordsmicrosporidia;distinguishtissue;morphologicalcharacteristics 微孢子虫病是昆虫的常见传染病,尤其在人工 饲养昆虫,如养蚕,养蜂,养试验昆虫和天敌昆虫时 发生较多.感染微孢子虫病的昆虫,一般外 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 无明 显征状,轻病虫群只是取食减少,活动迟钝,发育大 小参差不齐,生存率和繁殖力降低,虽影响养虫效率 和试验的准确性,但因为害不明显,常被忽视;重病 虫群则因相互传染而陆续死亡,甚至全部毁灭,才引 起注意.在害虫治理中,微孢子虫病被认为昆虫种 收稿日期:20070424 基金项目:国家自然科学基金(39970508) 群密度自然平衡因素之一,受到重视和利用.因此 农林工作中经常遇到昆虫微孢子虫病问题.因为一 种昆虫感染的微孢子虫常不止一个种,首先需要鉴 别其种类.鉴别昆虫微孢子虫病的常规方法是用 光,电镜观察微孢子虫各个发育阶段的形态特征,产 孢方式,寄主专化性,寄生组织专化性[1],近年还发 展利用免疫学方法和分子技术如测定核酸序列特征 的方法来鉴定形态相似的种l3].操作程序相当繁 ? 134? 扭扬铱第33卷第5期(2007) PLANTPR()TECTIONVo1.33No.5(2007)实验瓣 复,费用高昂,只能在设备完善的实验室中进行,对 田间工作者来说困难较大.现介绍一种比较容易操 作的鉴别方法. 这种方法是选择一种能感染多种微孢子虫的昆 虫作为鉴别寄主,例如玉米螟就是一种适于鉴别微孢 子虫,尤其是鳞翅目昆虫微孢子虫的鉴别寄主,因为 它能感染许多种微孢子虫,虫源易得,易于用人工饲 料饲养.感染方法可采用待鉴别的微孢子虫系列浓 度孢子液涂在玉米螟即将孵化的黑头卵块上接种,在 适合的浓度下,幼虫孵化后即能感染,长成的幼虫组 织病理形态特征比较明显,观察时,将幼虫浸在抗氧 化剂DIECA0.01mol/L溶液中,用解剖针拉出体腔 内组织,在1O×解剖镜下即可看到一系列组织病理形 态特征(图1).根据其寄生组织的病理形态特征,结 合孢子形态,大小,自然寄主,实验寄主和组织专化 性,即可鉴别一些常见的农林昆虫微孢子虫病(表1). 表1几种微孢子虫的鉴别特征 1)数字代表的特征为0:不感染;1:丝腺局部或全部呈雪白色均匀肿胀;2:丝腺呈淡 白色云雾状肿胀;3:丝腺,涎腺均畸形,具泡状肿胀;4:丝 腺具白色不规则成串肿块;5:涎腺局部或全部呈白色不规则肿胀;6:涎腺具白色串 珠状肿块;7:涎腺具白色虚线状肿块;8:马氏管局部或 全部呈白色肿胀;9:马氏管局部弯曲部膨大呈球状;i0:脂肪体全部或局部呈白色松 散破棉絮状;ii:脂肪体呈白色大小不一的融蜡状团 块.(十小菜蛾变形孢虫主要感染中肠壁和背纵肌,表内未列人).孢子均为姬姆萨染 色. 表1中仅列出病理形态特征比较明显的组织, 感染后特征不明显的如血细胞,肌肉,中肠等组织均 未列入.寄主专化性是另一项重要鉴别特征,包含 生态寄主专化性(自然寄主范围)和生理寄主专化性 (实验寄主范围),因不同微孢子虫相同的实验寄主 较多,表中改用不能感染的昆虫表明其生理专化性 特征.孢子形态在微孢子虫鉴别上也很重要,Weis er曾列举了寄生物的7O种光镜形态特征,其中包括 孢子形态,来鉴别传媒昆虫微孢子虫,但没有涉及寄 主组织病理形态特征?l.Canning首次报道果园秋 尺蛾感染两种不同微孢子虫时丝腺病理形态特征有 明显不同,可以作为鉴别特征El2].笔者发现每种微 孢子虫在同一种寄主昆虫上的组织病理形态征状既 具有特异性,又有相当稳定性,可作为一种有用鉴别 特征.不同组织病理形态特征显然是寄生物与寄主 组织双方特异性酶和免疫系统等在寄生过程中相互 作用的产物,它反映了双方种的遗传基因特异性,这 种方法实际是将双方不可见的生化,免疫和遗传上 的特性表达为可见的形态特征,如果利用不同的鉴 别寄主,组织病理形态特征也就不同,甚至完全免 疫,因此需要像鉴别植物病原真菌生理小种那样建 立一套鉴别寄主来鉴别,这方面工作值得今后研究. 参考文献 [13LARSSONRUltrastructure.function,andclassificationofMicros— poridia[J].ProgressinProtistology,1986(1):325—390. E2]LARSSONR.Identificationofmicrosporidiangenera(Proto ? l36? 扛扬铱第33卷第5期(2007) PLANTPROTECTIONVolI33No.5(2007)应厢 zoa,Microspora)一aguidewithcommentsonthetaxonomy[J]. ArchProtistenkd,1988,136:1—37. [3]WEISSLM,VOSSBRINCKCR.Molecularbiology,molecu— larphylogeny,andmoleculardiagnosisapproachestotuemi crosporidia[M]//WITTNERM.WEISSL^,LTheMicrospo ridiaandMicrosporidiosis.NewYork:AlbertEinsteinCollege ofMedicineBronx,1999:129—171. [4]问锦曾,孙传信.微粒子虫属二新种[J].动物分类,1988, 13(2):1—7. [5]李社平,问锦曾.斜纹夜蛾微孢子虫一新种[J].中国农业科 学,1987,20(1):71—74. [6]问锦曾,孙传信.中国家蚕微粒子虫及其近缘种的考察[J].中 国农业科学,1989,22(2):15—19. [7]T杰,宿桂梅,问锦曾.中国柞蚕微粒子虫病病原的研究[J]. 蚕业科学,1992,18(2):88—92. [8]丁杰,宿桂梅,问锦曾.中国柞蚕微粒虫病病原研究续报 [J].蚕业科学,1994,20(3):161—165. [9]王音,问锦曾,雷仲仁.中国小菜蛾变形孢虫研究初报It]//中 国原生动物学会第11次学术讨论会论文摘要汇编.武汉: 2001:111—112. [1o]问锦曾,孙传信,李社平.槐尺蠖和银纹夜蛾寄生微孢子虫三新 种记述_J].动物分类,1990,15(3):257—261.图版I?. 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