高效毛细管电泳法测定伪麻黄碱的人体血药浓度

高效毛细管电泳法测定伪麻黄碱的人体血药浓度 高效毛细管电泳法测定伪麻黄碱的人体血 药浓度 中国药师2006年第9卷第7期ChinaPharrnacist2006.v.1.9No.7 高效毛细管电泳法测定伪麻黄碱的人体血药浓度 刘刚王辉张先洲(武汉大学人民医院药学部武汉430060) 摘要目的:建立高效毛细管电泳法测定伪麻黄碱的人体血药浓度.方法:采用石英 毛细管柱(45cmx50m),运行电压 20kV,温度25?.30mB(3.15Pa)压力进样,时间15;缓冲液为0.05mol?L硼砂溶液;检 测波长为210nm.结果:线性范 围50,500ng?ml(r=0.9996).平均回收率79.20%.日内,日间RSD(5%.最低定量浓度 为25ng?ml,.结论:该法简便, 快速,准确,适用于伪麻黄碱药物动力学和生物等效性研究. 关键词伪麻黄碱;高效毛细管电泳法;血药浓度 中图分类号:R96文献标识码:A文章编号:1008-049X(2006)07-0617-02 DetrminationofPseud0ephedrineinHumanSerumbyHPCE l,IUGang,WangHui,ZhangXianzhou(DepartmentofPharmacy,RenminHospitalofWuha nUniversity,Wuhan430060.P.R.Chi- nd) ABSTRACTObjective:ToestablishaHPCEmethodfordeterminingthecontentofpseudoe phedrineinhumanserum.Method: HPCEwasusedwiththecapillarycolumn(45cm× 50ttm).Themobilephasewas0.05mol?L,boronicacidbuffer.Theapplied voltagewas20kVat25?.Theeletroinjectionwas3.15Pafor15sandthedetectionwavelengt hwasat210nm.Result:Linearrange was50—500ng-ml一 (r=0.9996),theaveragerecoverywas79.20%.Therelativestandarddeviationsofwithin-day andbetween-day werelessthan5%.Theminimaldetectableconcentrationinplasmawas25ng?ml,.Conclusi on:Thismethodisrapid.simpleand accurateforthedeterminationofPseudoephedrineleversinhumanplasma.Itwassuitablefor thepharmacokineticsandbioavailability studyofPseud0ephedrine. KEYWORDSPseudoephedrine;HPCE;Drugconcentrationinplasma 伪麻黄碱(pseudoephedrine,Pse)是麻黄碱的差向异构 体.可选择性收缩上呼吸道血管,消除鼻黏膜水肿.对全身血 管和血压的影响较弱,与抗组胺药配伍.可治疗感冒,过敏性 鼻炎等症.伪麻黄碱的检测大多采用气相色谱和液相色谱 法.].近几年来,高效毛细管电泳作为一种新颖的分离方 法,己被越来越多地应用到药物 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 当中.有关伪麻黄碱 的高效毛细管电泳的分离检测的文献报道较少,本研究采用 高效毛细管电泳法测定伪麻黄碱血药浓度,为临床用药提供 依据. 1仪器与试药 CAPEL一105毛细管电泳仪;石英毛细管柱(45cm×50 Ixm);Chrom&Spec1.5毛细管电泳数据工作站;WH一1微型 漩涡混合器;BF-2000氮气吹干仪. 美息伪麻片(白加黑,东盛科技启东盖天力制药股份有 限公司产品.批号20041022,规格:白片含伪麻黄碱30mg); 伪麻黄碱对照品(湖北省药检所提供,纯度99.7%);空白血 浆(孝感市中心血站提供);所用试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1电泳条件 检测波长210nm,运行电压20kV,温度25qc,30mB (3.15Pa)压力进样,时间15S.缓冲液为0.05mol?L硼砂 溶液(pH=9.3).在此条件下测得伪麻黄碱空白血浆,对照 品,血浆样品色谱图见图1.伪麻黄碱保留时间约为 7.2min . J,L— C-叫CaD~I A.阴性对照B.对照品c.样品1.伪麻黄碱 圈1血浆中伪麻黄碱高效毛细管电泳圈 2.2血浆样品预处理 精密吸取血浆0.5ml于10ml具塞试管中.加入2mol? LNaOH100,涡流1min,加正己烷.二氯甲烷.异丙醇 (100:50:5)3ml,涡流3min.4000r?rain离心15min,取上 层有机相2.5ml,于45qc氮气吹干,残留物加0.05mol?L 硼.5ml溶解. 2.3血浆标准曲线的制备 准确配制含伪麻黄碱浓度为50,100,200,300.4OO.500 ng?ml的系列标准血浆样品,按"2.2"项下操作,进样分析. 以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,进行线性回归,得回归方 程:A=3.35×10C+0.62,r=0.9996,线性范围50,500 ng?ml,.按信噪比为2计算.伪麻黄碱的最低检出浓度为 25ng?f|ll"... 作者简介:刘刚,男.硕士.主管药师,主要从事天然药物化学研究.Tel:(027)88041911 —8898E-mail:liugang_wh@126?corn 亏7 www?zgys?org研究报告 2.4精密度试验 准确配制含伪麻黄碱浓度为50,200,500ng?ml的标 准血浆样品,按"2.2"项下操作,所得结果代入回归方程,计 算精密度,结果日内,日间RSD均(5%. 2.5提取回收率试验 准确配制含伪麻黄碱浓度为50,200,500ng?ml的标 准血浆样品,一组按"2.2"项下操作,另一组不经预处理,按 两组峰面积之比计算回收率,结果见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf l. 裹1伪麻黄碱提取回收率结果(n=5) 2.6样品测定 l2名男性健康志愿受试者,试验前均签署知情同意 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf , 禁食12h后清晨空腹用温开水250ml吞服白加黑白片3 片,服药2h后自由饮水,服药4h后统一进低脂餐.分别于 给药后0.25,0.5.0.75,1.0,1.5,2.0,3.0,4.0,6.0,8.0,10.0 h,取前臂静脉血3lIll,将血标本置于肝素化试管中,3500r? rain离一I~,lOrain,分离血浆,一20?保存至测定.其平均药 一 时曲线见图2. f 菩 350 300 250 200 150 100 50 0 圈2健康志愿者单次口服90mg伪麻黄碱的 平均药一时曲线(n=12) 3讨论 3.1由于伪麻黄碱在人体内的血药浓度为ng级,为提高榆 测灵敏度,本法采用了碱化.萃取.酸化的提取方法,克服了 蛋白质沉淀不完全,回收率低的缺点.同时在实验过程中, 对有机提取溶剂进行了考察,发现使用正己烷?乙醚混合溶 剂时,提取效率较低,而使用正己烷.二氯甲烷.异丙醇混合 溶剂时,提取效率明显提高,且提取稳定. 3.2在实验中,还比较了伪麻黄碱在磷酸盐,硼砂及硼砂- NaOH等多种缓冲溶液中的分离情况,结果发现在硼砂缓冲 溶液中电泳效果最好.过高的硼砂浓度会导致电泳峰宽增 加,过低的缓冲溶液浓度由于缓冲容量偏低,不利于体系的 pH值维持稳定,同时过短的迁移时间也会缩小被分离组分 的迁移时间的差距.导致组分的分离度达不到分析的要求. 综合考虑上述因素选择0.05tool?L硼砂缓冲溶液(pH= 9.3)作为运行缓冲液.选择分离电压时耍兼顾分离效果和 迁移时间两方面.分离电压越高,样品的迁移时间越短,但 分离效果不如电压较低时好.分离电压太低,样品的迁移时 间过长,电泳峰随之展宽使得峰形劣化,定量误差加大.经 过试验比较和优化.选择20kV作为分离电压. 参考文献 l李惠敏,简淑娟,黄丹莹.HPI~法测定复方川贝片中盐酸麻黄碱的音量 [J].中田药师,2004,7(9):738-739 2周征.用HPLC法测定双扑伪麻片中盐酸伪麻黄碱的音量[J].中田药师, 2001,4(3):204-205 3邓开英,姚丽佳,王白露,等,RP-HPLC法测定咳停糖浆中盐酸麻黄碱和伪 麻黄碱的含量[J].中草药,2004,35(7):765-766 4朱萱萱.陈福林,茅咏雯,等.毛细管电泳法测定麻黄中生物碱的音量[?. 中国中药杂志,1996,21(10):587-589 5季一兵,陈玉英,吴如金.麻黄中生物碱类有效成分的非水毛细管电诛含量 测定[J].中革药,2003,34(12):1127.1129 6丁祥欢,楚清脆,叶建农.感冒药中盐酸伪麻黄碱和扑热息痛音量的毛细管 电泳电化学法测定[J].分析测试.2002.21(3):37-40 7郑一宁,谢天尧,莫金垣.等.非水介质毛细管电泳电化学检测日夜百服宁 中的有效成分[J].高等学校化学,2002,23(3):371-375 (2005-11-10收稿2006-01-25修回) 几种中药注射液的过敏性研究 鲍玉琳刘卫东(临沂市人民医院山东临沂276000) 摘要目的:研究参麦注射液,穿琥宁注射液和黄芪注射液在皮肤被动过敏试验(PCA)和全身主动过敏试验(ASA)中是否 有过敏反应.方法:按照《中药,天然药物免疫毒性(过敏性,光变态反应)研究的技术指导原则》的试验方法对以上3种中药 注射液进行皮肤被动过敏试验和全身主动过敏试验研究.结果:皮肤被动过敏试验麦参注射液和穿琥宁注射液高剂量组和 低剂量组均有过敏反应;黄芪注射液高剂量组出现过敏反应.低剂量组未见过敏反应.主动过敏试验只有穿琥宁注射液高剂 量组2只动物过敏反应弱阳性,其它未见过敏反应.结论:对于参麦注射液,穿琥宁注射液和黄芪注射液3种中药注射液而 言,与临床实际使用情况相比,大鼠皮肤被动过敏性试验具有比全身主动过敏试验更好的相关性. 关键词中药注射液;皮肤被动过敏性试验;全身主动过敏试验 中圈分类号:PO65.3文献标识码:A文章编号:1008-049X(2006}07-0618-03 HypersmceptibmtyStudyofSeveralChineseMaterialMedicalInjectiom BaoYulin,LiuWeidong(LinyiPeople~Hospital,Shandong,Linyi276000,P.R.China) A — BSTRACTObjective:TostudythePCAandASAofShenmaiinjectionandChuanhuninginj ectionandHuangqiinjection.MetIIod: 作者简介:鲍玉琳.女,主任药师.本科.主要从事医院药学方面的工作.Tel:(0539)8216013 艿