医学毕业论文hplc法测定脑乐康胶囊及人参提取物中人参皂苷rg1含量

医学毕业论文hplc法测定脑乐康胶囊及人参提取物中人参皂苷rg1含量 X X 大学 毕业论文 HPLC法测定脑乐康胶囊及人参提取物中人参皂苷Rg1含量 姓 名:__________ 2014年6月25日 HPLC法测定脑乐康胶囊及人参提取物中人参皂苷Rg1含量 作者:高苏莉，张三奇，陈建宗，丁志青，顾宜 【关键词】 人参皂苷Rg1 【Abstract】 AIM: To establish a method of HPLC determination of the content of ginsenoside Rgl in Naolekang Capsules and that in ginseng extract. METHODS: After ginsenoside Rgl in Naolekang Capsules was extracted, other substances in the capsules were removed by ether and macroporous resin column. The content of ginsenoside Rgl in Naolekang Capsules and that in ginseng extract were assayed by HPLC using C18 column with methanolwater(52?48, V/V)as the mobile and detected at 203 nm. RESULTS: An excellent linear relationship was obtained between the peak area and the concentration of ginsenoside Rgl (R2=0.9996). The average recovery rate of ginsenoside Rgl was 98.6% and the RSD was 1.7%. CONCLUSION: This method, accurate and reproducible, can be applied to the quality control of Naolekang Capsules and to the analysis of commercial ginseng extract samples. 【Keywords】 ginsenoside Rgl; naolekang capsules; HPLC 【摘要】 目的: 建立用高效液相色谱法测定脑乐康胶囊中人参皂苷Rg1 含量的方法. 方法: 用大孔树脂吸附柱除去样品中干扰物质. 采用C18色谱柱， 甲醇?水(52?48)为流动相，流速1.0 mLmin-1, 203 nm为检测波长，对脑乐 康胶囊进行含量测定. 结果: 人参皂苷Rg1的峰面积与其浓度线性关系良好 (R2=0.9996);样品平均回收率为98.6%;精密度RSD为1.7%(n=5). 结论: 本方法准确、重现性好，可作为脑乐康胶囊的质量标准和商品化人参提取物中人 参皂苷Rg1含量的测定方法. 【关键词】 人参皂苷Rg1;脑乐康胶囊;高效液相色谱法 0引言 脑乐康胶囊由人参等益气活血中药组成，含有人参皂苷Rgl，它是珍贵传 统中药人参的主要活性成分，常被用来作为人参制剂中定量指标. 对人参皂苷组分的 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 ，测定方法已有薄层扫描法,1,、比色法,2,、分光光度法. 近年来高效液相色谱法以其分离效果好、准确、快速、样品制备简单等优势而广泛用于人参制品中人参皂苷Rgl的质量标准研究,3,. 我们先将中药提取物进行前处理后，除去样品中干扰物质，再用高效液相色谱法测定了脑乐康胶囊及人参提取物中人参皂苷Rg1的含量，得到较满意的结果. 1材料和方法 1.1材料高效液相色谱仪:LC10Avp高效液相色谱仪(日本岛津);色谱柱:Kromasil C18柱，5.0 μm, 4.6 mm×150 mm;保护柱:10 μm(大连伯瑞);RE52旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);BP190S电子天平(德国赛多利斯). 对照品:人参皂苷Rg1(中国药品生物制品检定所). 脑乐康胶囊和缺人参阴性样品由本院制剂室制备. 人参提取物为吉林宏久公司生产. D101大孔树脂为西安蓝深公司产品. 甲醇、乙醇均为市售分析纯. 1.2方法色谱流动相:甲醇?水(52?48)，流速1.0 mLmin-1;紫外检测波长:203 nm;室温. 人参皂苷Rg1对照品色谱图见Fig 1A. 取缺人参脑乐康胶囊阴性样品1 g，按样品测定方法处理后，吸取10 μL进样，结果见Fig 1B，在人参皂苷Rg1的保留时间处未见干扰峰出现. D101大孔树脂柱制备使用1.5 cm× 30.0 cm玻璃柱，D101大孔树脂湿重15 g放入柱内，柱高12 cm，上盖脱脂棉少许，用水洗，再用乙醇清洗，最后用水平衡待用. 取人参皂苷Rg1对照品用甲醇配成1 gL-1的对照品溶液. 准确吸取此对照品溶液2, 6, 10, 12, 16和20 μL，依次进样，按上述色谱条件测定峰面积，以平均峰面积的积分值(n=2)为纵坐标，对照品进样量(μg)为横坐标，进行线性回归. 取上述对照品溶液，重复进样5次，每次10 μL，求峰面积的RSD. 精密称取人参皂苷Rg1对照品用甲醇溶解配成2 gL-1的对照品溶液. 精密称取5份脑乐康胶囊约1 g，分别加2 gL-1对照品溶液1 mL，按样品测定方法处理后，取10 μL进样测定，计算平均回收率. 取脑乐康胶囊20粒 内容 财务内部控制制度的内容财务内部控制制度的内容人员招聘与配置的内容项目成本控制的内容消防安全演练内容 物，精密称取1 g，置带塞三角烧瓶中，精密加入甲醇20 mL，密塞振摇10 min，过滤，弃去初滤液，精密吸取续滤液5 mL，于旋转蒸发仪上蒸干，残 留物用水约5 mL和乙醚10 mL分次溶解，并转入带塞试管中，萃取，再用乙醚20 mL分2次萃取，合并乙醚液于分液漏斗中，以5 ml水分两次洗涤. 洗液并入水液中，转移至圆底烧瓶于旋转蒸发仪上浓缩至约1 mL. 转入净化吸附大孔树脂柱内，放置5 min. 先以水15 mL洗脱，再以700 mLL-1乙醇30 mL洗脱. 流速2 mLmin-1，收集乙醇洗脱液，浓缩至干. 精密加入甲醇5 mL，溶解残渣，过滤作为供试品溶液，精密吸取10 μL进样. 色谱图见Fig 1C. 取人参提取物约50 mg，1 mL水溶解后转入净化吸附大孔树脂柱内，放置5 min. 先以水15 mL洗脱，再以700 mLL-1乙醇30 mL洗脱. 流速2 mLmin-1，收集乙醇洗脱液，浓缩至干. 精密加入甲醇6 mL，溶解残渣，过滤作为供试品溶液，精密吸取10 μL进样测定，计算含量. A: Standard ginsenoside Rgl; B: Naomaikang capsules without ginseng; C: Ginsenoside Rgl in Naomaikang capsule. 图1人参皂苷Rg1色谱图(略) Fig 1Chromatogram of ginsenoside Rgl(略) 2结果 依次进样1 gL-1人参皂苷Rg1对照品溶液2, 6, 10, 12, 16和20 μL，得峰面积的平均积分值分别为522066, 1584199, 2640332, 3188422, 4164032, 5330765. 线性回归方程为:Y=-1.083×104+2.651×105X, R2=0.9996， P0.01, Y为峰面积的平均积分值，X为对照品进样量(n=6). 连续进样1 gL-1对照品溶液10 μL，得峰面积积分值分别为2640332, 2619074, 2614435, 2666751, 2642582, 2630983, RSD为0.72%(n=5). 平均加样回收率为98.6%, RSO为1.7%. 三批脑乐康胶囊(批号011008，011018，011029)，人参皂苷Rg1含量分别为每粒1.68 mg, 1.75 mg和1.97 mg;人参提取物含量为209.5 mgg-1. 3讨论 HPLC法已成为测定中草药有效成分的重要方法，但如何更好地和其他精制手段结合，发挥其优势值得研究. 脑乐康胶囊成分复杂，如果不经前处理，直接采用HPLC法测定人参皂苷Rg1的含量，杂质多，干扰严重，加上人参皂苷Rg1仅在低波长处有紫外吸收，测定无法进行. 因此我们在分析测定步骤中，先 用乙醚萃取以除去脑乐康胶囊提取液中的大量脂溶性物质，再通过吸附大孔树脂 柱以除去大部分水溶性干扰物质，取得了满意的效果. 大孔树脂是近20年发展 起来的一类具有网状结构的交联聚合物，对不同性质的有机物有选择性吸附作 用，从而达到分离提纯的目的. 该法具有操作简单，吸附稳定，还可再生的优点， 它在药学领域的应用将越来越广泛,4,. 采用HPLC法测定脑乐康胶囊和人参 提取物中人参皂苷Rg1的含量，方法稳定，精密度高，重现性好，各批次含量 基本稳定，为脑乐康胶囊质量的有效控制和工艺研究提供了较简便、实用的方法. 【参考文献】 ,1, Zhang XQ, Zhou FR. Determination of Ginsenoside Rg1 in Ru Pixiao capsules by TLC scaning ,J,. Zhongguo Zhongyao Zazhi (China J Chin Mater Med), 1999;24(5):282-283. ,2, Wang L, Zhao CJ, Wang SH. Quantitative determination of ginseng saponing in Junchunle capsule by colormetric method ,J,. Zhongguo Yaoxue Zazhi (Chin Pharm J), 1995;30(6):364-365. ,3, Chen W, Hu GL, Wang YR, Wang XR. Determination of six ginsenosides in panax species by high performance liquid chromatography ,J,. Sepu (Chin J Chromatogr), 2000;18(5):439-441. ,4, Zhang H, Liu ZL, Wang HQ. Application of macroporous adsorbing resins in pharmaceutical science ,J,. Zhongguo Yiyao Gongye Zazhi (Chin J Pharm), 2001;32(1):41-44.