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化学品+蜜蜂急性经口毒性试验.doc

化学品+蜜蜂急性经口毒性试验

壹個人孤單落寞
2017-12-26 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《化学品+蜜蜂急性经口毒性试验doc》,可适用于综合领域

化学品蜜蜂急性经口毒性试验ICS(:((A雪中华人民共和国国家标准GB,T化学品蜜蜂急性经口毒性试验oraltestChemicalsHoneybeesacutetoxicity发布实施宰瞀髁鬻瓣警糌瞥翼发中布”国国家标准化管理委员会仪GB,T言前本标准等同采用经济合作与发展组织(OECD)化学品测试导则No((年)《蜜蜂急性经毒性试验》(英文版)。口本标准做了下列编辑性修改:增加了范围将计量单位改为我国法定计量部分单位将附录中的术语和定义内容放入正文的术语和定义部分。)提出并归口。本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会(SAC,TC本标准负责本标准参加起草单位:宁波出入境检验检疫局。本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院。主要起草人:周新、陈会明、王军兵、于文莲、林振兴、马中春、郝楠、王立峰、孙鑫、王峥。GB,T引言本标准是被制定用来测定农药及其他化学品对成年工蜂的急性经口毒性的实验室试验方法。本标mellifern)产生准主要根据欧洲和地中海植被保护组织(EPPO)的为评估植被保护产品对蜜蜂(Apis副。本标准考虑到了年在Wageningen(荷兰)举行的植物与蜜蜂关系的国际研作用的指南文件EPPO测试方法的建议。其他现有的讨会的第五次关于农药对蜜蜂危害的讨论会上提出的改进指南也被考虑到见参考文献、和。在物质的毒性特征的评估中当化学品暴露于蜜蜂时必须包含对蜜蜂的急性经IZl毒性试验。急性经口毒性测试提供了确定农药和其他化学品对蜜蜂固有毒性的判断依据。这个试验结果可以作为进一步评估的必要性依据。特别是本标准可用于评估农药对蜜蜂危害的逐步回归程序中用以确定实验室毒性测试和野外试验的必要性见参考文献E。农药可以是一种活性成分(a(i()也可以是制剂产品。参比物用以核实蜜蜂的敏感性和试验的准确性。GB,T化学品蜜蜂急性经口毒性试验范围本标准规定了化学品蜜蜂急性经口毒性试验的范围、术语和定义、试验原理、试验的有效性、试验准备、试验程序、数据与报告。本标准适用于测定农药及其他化学品对成年工蜂的急性经口毒性。下列术语和定义适用术语和定义于本标准。(oral急性经口毒性acutetoxicity在最长到h的试验期间内经口单一剂量的受试物产生的有害影响。(剂量due受试物消耗的总量。剂量以受试物质量(g)或单个试验动物所用受试物的质量(g,只蜜蜂)来表达。当蜜蜂被集体喂养时实际的剂量无法计算但是可以用平均剂量进行估计(在一个笼中受试物被消耗的总量,受试蜜蜂的数量)。(lethaldose)oral经口半数致死量LD(median受试物以口服方式导致动物死亡达,经统计获得的唯一药量。LDs。值以“g,只蜜蜂”来表达。对(a(i()也可以是含有一种或多种活性成分的制剂产品。于农药受试物可以是一种活性成分(死亡率mortality死亡动物占供试动物的比率。试验原理成年工蜂通过取食蔗糖溶液从而食人受试物。而后用不含有受试物的同样食物饲喂蜜蜂。在至h,少h内记录死亡率并与对照组进行比较。如果在h之间死亡率持续增加而对照组死亡率h和h的LDs。以保持在不大于lo,的可以接受水平应考虑将试验期延长最长至h。计算及当试验延长后的h和h的LD。值。试验的有效性试验应符合以下条件才是有效的:在试验结束时对照组的平均死亡率不超过,参比物的LD。值满足特定的范围。试验准备(蜜蜂的选择供试蜜蜂要求营养状况良好健康、抗病毒能力强年龄相同。供试蜜蜂可以不是来自同一群蜂但其家族背景应清晰已知。在使用当天早晨或试验的前一天晚上采集并在实验条件下饲养一直到试验开始。尽量避免在早春或晚秋采集蜜蜂。如果在此期间进行试验则应经孵化器使GB,T蜜蜂羽化并用花粉和蔗糖溶液饲养l周。如果使用经抗生素、抗螨剂等化学物质处理过的蜜蜂自最后一次处理后的周内不能用于毒性试验。(试验笼使用易于清洁通风性良好的笼子。可采用任何合适的材料如不锈钢、金属丝、塑料、一次性木笼等。试验笼的大小要与蜜蜂的数量相适应以提供足够的空间。(操作和喂养条件白天(光照下)进行的处理和观察:以最终浓度为g,L的蔗糖水溶液作为食物。在给予试验剂mm宽FDm底端量后可不受限制提供食物并对每笼的食物摄人量进行记录。喂食采用长开口处直径为mm的玻璃管。(蜜蜂的准备h以保证在将采集的蜜蜂随机分配到实验室里随机放置的试验笼中。试验开始前使蜜蜂饥饿试验开始时蜜蜂腹内食物含量相同。试验前用健康的蜜蜂替换出垂死的蜜蜂。(受试物剂量的准备g,L的蔗糖水溶液中。对于有技术如果受试物是易于与水混溶的化学品则可以直接分散到要求的产品和一些水溶解性较低物质可以使用毒性较低的有机溶剂、分散剂或乳化剂(如丙酮、二甲亚砜、二甲基甲酰胺)作为助溶剂。助溶剂的浓度可根据受试物的溶解性来决定并且各个浓度组的助溶剂浓度应一致。但助溶剂的浓度一般不应超过,。应准备适当的溶剂对照即当使用了助溶剂和分散剂时应分别准备两组溶液对照一组为水溶液对照一组为含溶剂的蔗糖溶液对照溶剂浓度与受试组中的浓度相同。试验程序(试验组和对照组试验浓度以及平行试验数量的设置应满足在,置信限下确定LDs。的统计需要。通常在进行试验时要求在含有LD。。的浓度范围内至少设置个按几何级数排列的浓度浓度组距比值不应超过第章中规定范围。另外稀释因子和受试物浓度数量的设置还应考虑以浓度对死亡率表示的毒性曲线斜率的相关性以及进行结果分析所选用的统计分析方法。应先进行预试验以确定正式试验的浓度范围。最低要求:每个浓度组设三个平行每一试验容器各放只蜜蜂。对照组最少设个平行各只蜜蜂与处理组同时进行。对照组还应该包括助溶剂或载体对照。(参比物参比物应该包括在测试系列里。参比物浓度至少应选择覆盖预期LDso值的个剂量。每个剂量h急性经毒性LDso值的范围为:(个平行各只蜜蜂。首选的参比物是乐果其报道的pg(a(i(),只蜜蜂,o(g(a(i(),只蜜蜂见参考文献E。若有充分的数据来证明预期的剂量反映也可以接受其他的参比物。(暴露((剂量处理g,L的蔗糖水溶液。对于低在每个蜜蜂试验组中加入pL,pL含有一定浓度受试物溶解度的物质则要求加大体积如果受试物为低溶解性、低毒或在制剂中浓度较低则要求使用较高比h,h内消耗完。一旦食物消例的蔗糖水溶液。对每组经处理食物消耗量进行监测。食物通常在耗完将食物容器从笼中取出换上只含有蔗糖的食物不限量。对于一些受试物在较高试验剂量下h后用蔗糖溶液将剩余的经处理的蜜蜂拒绝进食从而导致食物消耗很少或几乎没有消耗。最长到食物换掉。对经处理食物的消耗数量进行估算(即检测经处理的食物残存的体积或质量)。,GB,T((试验条件蜜蜂应该放在黑暗的实验室内室温。C土。试验过程中还应记录相对湿度通常为,,,。((持续时间h。如果在第一个h后死亡在投给含有受试物g,L的蔗糖水溶液后开始记时试验持续h同时对照组死亡率不得超过,。率持续增加了,以上则需要延长试验最长至(观察h、h、h记录死亡率。如果需要延长观察时间则以h为在试验开始后(即在加入剂量后)时问间隔进行进一步的评估最长至h。对照组死亡率不得超过,。估计每一组的食物消耗量。在给定的h内对处理组和未处理组的食物消耗率进行比较可以得出关于经处理的食物适口性的信息。在整个试验过程中记录观察到的所有异常行为。(限度试验pg(a(i(),在预计一种受试物为低毒等情况下应进行限度试验以确定u)s。是否大于限度值即只蜜蜂。试验要求同如上所述的程序。限度试验中若有死亡发生须进行完整试验。如果观察到亚致死效应则应进行记录。数据与报告数据应该以表格形式表达给出每一个处理组、对照组以及参比物组的数据所使用的蜜蜂(数据数每一观察时间的死亡率以及行为异常蜜蜂的数量见参考文献和。采用适当的统计分析方法分析蜜h、h、h、(即h)的剂量一效应曲线图计算曲线的斜率以及在蜂的死亡数据画出每一观察时间,置信限下的平均致死剂量(LD。)见参考文献和。如果经处理的食物没有完全被消耗光LD。。以每只蜜蜂消耗受试物量来表达单位pg,只蜜蜂。则应该确定每组中受试物的消耗量。(试验报告试验报告必须包括以下信息:((受试物:物理性质和相应的理化特性(如:水溶解度、蒸汽压)化学鉴定数据包括分子式、结构式、纯度(如对于农药而言活性成分的特征和浓度)。((供试生物:学名周龄采集方法采集日期采集的供试蜜蜂蜂群的信息包括健康状况、预处理等。((试验条件:实验室的温度及相对湿度试验容器的条件包括类型、大小以及材料试验溶液以及贮备液的准备方法(如果使用助溶剂给出浓度)试验设计例如所使用试验浓度和数量对照组的数量。对于每一个试验:包括浓度以及对照平行数以及每笼中蜜蜂的数量。((结果:如果进行了预试验其浓度范围每一观察时间死亡率的原始数据试验结束时的剂量一效应曲线图在每一观察时间受试物以及参比物在,置信限下的LD值GB,T确定LD。的统计分析方法对照组死亡率观察或检测到的其他生物效应例如蜜蜂的异常行为(包括受试物达到一定剂量时蜜蜂拒食的情况)处理组和对照组食物的消耗率有关偏离操作方法及其他相关信息。GB,T参考文献rEPPO()(GuidelineTestMethodsforEvaluationtheSideEffectsofPlantProtecontiononProductsOEPP,EPPOBulletin(Honeybees(No()(BulletinoftheFifthInternationalontheHazardsEHarrisonE(G(()(ProceedingsSymposiumofProtectionNetherlands(PesticidestoBeesOetoberPlantReportServiceWageningenTheIUBBS。ppAppendicespp(fortheofPestiEnvironmentalFateandSETAC()(ProceduresEcotoxicityAssessing(cides(EditedDr(MarkR(Lynch(PublishedbySETACEuropeBelgium(MarchbyvonPflanzenschutzmittelnaufdietlinienEStuteK(()(AuswirkungenHonigbiene(RichftirdievonPflanzenschutzmittelnimBundesanstaltPrafungTeilVIBiologischeZulassungsverfahrenftirLandundBraunschweigGermany(Forstwirtschaft(BBA)BeeAcuteusTest(OPPTSContactHoney()(Ecological(EPA()ToxicityofAmerica(EffectsTestGuidelines(EPADCUnitedStates一(>WashingtontheEnvironmentalRiskofforSchemeEPPO,CouncilEurope(()(DecisionMakingAssessmentofPlantProtectionbulletinv(No(ProductsHoneybeesEPPO((March(asauseofdimethoateEGoughH(JMcIndoeE(CLewisG(B(()(ThereferenceinacutetestsonmelliferaL()(JournaIofcompoundlaboratorytoxicityhoneybees(ApisResearch(ApicuhuralofdoseeffectWilcoxonF(()(AmethodLitchfieldJ(T(andsimplifiedevaluatingexperiments(Jour(Pharmac(andExper(Ther((NewandYork()(ProbitAnalysis(rded(CambridgeLondonFinneyD(J((methodfortheeffectivenessofancomputingA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