2010版药品GMP《实验室控制系统GMP实施指南》真正word版

2010版药品GMP《实验室控制系统GMP实施指南》真正word版 实验室控制系统GMP实施指南 1前言 作为质量管理体系的一部分，质量控制实验室管理是确保所生产的药品适用于预定的用途，符合药品 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 和规定的要求的重要因素之一。 为了帮助制药企业中的实验室更好地满足GMP的要求，本指南主要参照国内外相关法规和标准及指南对于实验室管理的阐述和要求，描述一个全面的实验室管理体系，以起到一定的指导作用。 本指南的内容不具有法律约束性，超出现行GMP规定的内容是建议性和参考性的，而非强制性要求，可以有选择地使用。 企业在运用本指南过程中，涉及到剂型特点或相关公用系统的内容时，还应参考其它配套指南(见下表)，并结合本企业的实际情况和现行法规要求开展相关工作。 水平有限，不足之处，恳请指正 。 2目的 建立、实施并维护一个有效的实验室管理体系能够有效支持企业整体质量管理体系的有效实施，持续稳定地生产出符合满足顾客、法律法规等方面所提出的质量要求如有效性、可靠性、安全性的产品，从而实现公众和个人的共同目标，即:为患者提供高质量的药品，具体表现在以下方面: 及时放行合格的生产物料用于药品的制造，为生产出合格的药品提供必备的前提条件。 有效的药品生产过程中间控制保证了各个阶段生产产物的正确性和质量符合性，准确的终产品的检验数据为产品最终放行提供了重要的质量依据。 有效的稳定性数据和趋势分析指导企业确定药品正确的有效期、包装材料、运输/贮存条件等，并确保在市产品处于有效的质量保证状态。 通过实验室各个方面的有效管理，使质量系统始终处于受控状态，例，通过试验数据证明对工艺运行和产品质量的有效监控，为工艺能力及其稳定性提供保障。 本指南所描述的实验室管理是为了帮助企业的实验室更好地符合GMP的要求，推动整个企业有效地实施质量管理体系，达到长远发展的目的。企业可以根据自身的规模、工艺复杂程度和有限的资源等特定的条件，在符合法规的要求下，量身制定相应的实验室管理体系。 3范围 质量是指为符合预定用途所具有的一系列固有特性的程度。依此，药品质量是指，为了满足药品的安全性和有效性的要求，产品所具有的成分、含量、纯度等物理、化学或生物学等特性的程度。产品质量是在科学合理的设计的基础上，通过对所需的物料和生产过程进行控制管理实现的。因此，药品质量管理体系应包 括影响药品质量的所有因素，以及确保药品质量符合预定用途所需的有组织、有计划的全部活动。其关键因素之一-质量控制实验室管理亦应适用于产品生命周期过程中，产品质量形成全过程的各个环节。包括产品研发、产品/技术转移、商业生产、产品运输、在市考察甚至产品退市等。各阶段所设计的技术活动包括: 产品研发阶段:主要在原料药及制剂产品开发过程中，针对处方的选择，分析方法的确定以及稳定性研究过程。 产品/技术转移:着重于产品转移过程中的工艺过程监控，方法转移等。一般涵盖新产品由开发转移至规模生产、不同的生产厂或实验室之间的转移。 商业生产:重点指对原辅料、包装材料、中间产品、待包装产品和成品进行取样、检查、检验及产品的稳定性考察，以及必要时的环境监测。 产品贮存/运输过程:根据产品的特性及稳定性研究数据确定不同的条件。 产品在市期:持续的稳定性研究监控在市产品的质量。 产品的退市期:包含产品留样的考察及相关文件/样品的处理 本指南所描述的质量控制管理应着重于药品生产企业的中间控制和质量控制实验室，包括原料药和制剂生产;化学药和生物制剂生产等。 4指南内容结构 质量控制包括组织机构、文件系统和取样、检验、产品批准放行等。其工作内容包括专业技术和管理技术两个方面，围绕产品质量形成全过程的各个环节，对影响工作质量的人、机、料、法、环五大因素进行控制，并对质量活动的成果进行分阶段验证，以便及时发现问题，采取相应措施，防止不合格重复发生，尽可能地减少损失。因此，质量控制应贯彻预防为主与检验把关相结合的原则，必须对干什么?为何干?怎么干?谁来干?何时干等?做出规定，并对实际质量活动进行监控。而且，因为产品质量要求是随时间的进展而在不断变化，为了满足新的质量要求，就要注意质量控制的动态性，要随工艺、技术、材料、设备的不断改进，研究新的控制方法。 基于质量控制的上述工作内容，本指南就以下方面加以陈述和建议: 质量控制实验室总体描述 取样 试剂及试液的管理 标准品及对照品的管理 实验室分析仪器的确认 实验室分析仪器的校准与维护 分析方法的验证及确认 稳定性实验研究 超出质量标准或超出趋势的实验室调查 原始数据的管理 物料及产品的检验 微生物检验 5.质量控制实验室总体描述 5.1职责 【背景介绍】 质量控制涵盖药品生产、放行、市场质量反馈的全过程，负责原辅料、包材、工艺用水、中间体及成品的质量标准和分析方法的建立、取样和检验，及产品的稳定性考察和市场不良反馈样品的复核工作。质量控制的职责也可涵盖产品过程控制。 质量控制实验室的具体工作包括但不限于以下内容: 确保实验室安全运行，并符合GMP管理规范。 根据药典、申报标准，各种法规及企业内部要求制定原辅料、包材、工艺用水、产品过程控制、中间体及成品的质量标准及分析方法。 组织取样、检验、记录、报告等工作。 对于检验过程中发现的异常现象应及时向质量保证部及相关生产负责人通报，并调查是否为实验室原因。如确认不是或无可查明的实验室原因，应协助查找其他原因。 保留足够的起始物料和产品的样品(即留样)，以便以后必要时对产品进行跟踪检测。 根据需要制定稳定性试验 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 ，并确保其具体实施。 确保用有效的体系来确认、维护、维修和校验实验室仪器设备。 参加与质量有关的客户审计。 参加与质量有关的投诉调查。 根据需要参与和支持生产工艺验证，清洁验证和环境监测工作。 5.2布局 5.2.1原则 实验室的设计应确保其适用于预定的用途，并能够避免混淆和交叉污染，应有足够的区域用于样品处置、留样和稳定性考察样品存放以及记录的保存。 5.2.2要求 质量控制实验室通常应与生产区分开，生物检定、微生物和放射性同位素的实验室还应彼此分开，无菌检查实验室、微生物限度检查实验室、抗生素效价测定实验室、阳性菌实验室也应彼此分开。 实验室的设计必须与生产要求相适应。必须有足够的地方避免混淆和交叉污染。同时还应有足够的区域用于样品处置、留样和稳定性考察样品的存放及记录保存。 必要时应设置专门的仪器室，使灵敏度高的仪器免受静电、震动、电磁波、潮湿等因素的干扰。 处理生物或放射性样品等特殊样品的实验室应符合特殊要求。 用于微生物检验的实验室应有符合无菌检查法和微生物限度检查法要求的、用于具有开展无菌检查、微生物限度检查等检测活动的、独立设置的洁净区或隔离系统，并为上述检验配备相应的阳性菌实验室、培养室、实验结果观察区、培养基及实验用具准备区、标准菌种储存区、污物处理区等。 实验室应设有专门的区域或房间用于清洗玻璃器皿，取样器具，以及其它用于样品测试的物件。 5.3人员 5.3.1组织架构 质量控制部负责人必须由具有相应的资格和经验的人员担任，可以根据生产规模设立一个或几个化验室，例如微生物实验室、化学实验室、原辅料实验室、包材实验室等。 5.3.2资质要求 负责质量检验的人员应受过适当教育，并经专业技术培训，具有基础理论知识和实际操作技能。 质量控制实验室所有人员的职责应当书面规定。 5.3.3培训 应有经质量管理负责人审核或批准的有关培训的SOP、方案或计划，培训记录应保存。 应当由有资格的人员进行有计划的培训，内容至少包括员工所从事的特定操作及和其职能有关的GMP知识，并应对培训效果进行评估。 进入洁净区域的人员需按规定进行相关培训。 培训的分类: 新化验员的培训:分配到实验室的新员工(包括转岗人员)应接受岗前培训，考核合格后方可进行独立操作。岗前培训的内容至少涵盖以下内容:部门统一的GMP管理培训;指定岗位的岗位职责;指定岗位应知应会的标准操作规程、质量标准和分析方法的学习等。 在岗化验员的再培训:应定期组织化验员进行GMP、其他法规要求，以及专业技术知识、标准操作规程等的培训;应组织化验员对新发布的标准操作规程的学习;质量控制部负责人可以根据工作需要安排化验员参加权威机构或仪器供应商组织的专业知识培训;如有必要，质量控制部负责人或其授权的人员可定期组织进行化验员知识及技能的考核。 5.4文件系统 5.4.1分类 质量控制实验室的文件应符合GMP第八章《文件管理》的原则。大体可分为以下几类文件: 质量标准及分析方法。 取样操作规程和记录。 实验室样品的管理规程。 检验记录、原始数据、超标结果的处理。 检验报告或证书。 环境监测操作规程和记录。 生产用水的监测操作规程和记录。 检验方法验证方案及报告。 实验室分析仪器的使用、校准和维护的操作规程及记录。 实验室分析仪器的确认方案及报告。 实验室试剂的管理规程及配制、使用记录等。 标准品的管理规程及标定、使用记录等。 菌毒种的管理规程及记录。 实验室剧毒物品易制毒的管理规程及记录。 5.4.2要求 质量控制部实验室的所有文件应受控管理，包括起草、修订、发放、存档、销毁等。下面对5.4.1中的内容逐项描述: 质量标准和分析方法应和注册/申报中的一致或高于注册/申报标准，可以增加注册/申报标准以 外的附加检验项目。 应该有关于原辅料、包装材料、生产中间过程、中间体及成品的取样规程，应包括经授权的取 样人、取样方法、所用器具、取样量、取样后剩余部分及样品的处置和标示，以及为避免因取样过程产生的各种风险的预防措施等。应做好取样记录，内容至少包括样品名称、批号、取样日期、取样量、取样人等。 应该有样品的管理规程，包括样品的接收、传递、储存和销毁过程。 检验记录是检验人员对其检验工作的实时记录，检验的内容必须和质量标准/分析方法一致，检 验记录应涵盖检验过程的所有信息。所有检验记录应该受控管理。 全部的原始数据和计算必须受控管理，不得随意转抄，更不能擅自将受控 记录更换或销毁。检 验记录必须由第二人复核，负责对原始记录的准确性、完整性和与规定标准的符合性进行复核。如因意外情况将某页原始记录污染或损坏，需要更换和转抄原始数据时，必须经主管人员认可后到记录管理员处领取新的空白记录(新的记录编号要与原来的加以区分)进行更换。所有转抄数据必须有另外一人进行复核，转抄人及复核人应在转抄记录上签名、签日期。原记录须保存在该转抄记录的后面，作为本批记录的一部分，不得丢弃或销毁。 如果以纸质记录为存档文件，原始数据如色谱图、光谱图等应打印出来，签字并附在批检验记 录中。由仪器打印的数据(如;水分滴定结果、温湿度记录等)，化验员应在最终结果后签字确认。易褪色打印数据，如热敏打印数据，应及时复印，并将原件和复印件一并保存。 如使用电子数据处理系统、照相技术或其它可靠方式记录数据资料，应有 所用系统的详细规程; 记录的准确性应经过核对。如果使用电子数据处理系统，应建立系统受权管理，任何更改情况均应有记录便于追踪;应使用密码或其它方式限制数据系统的登录;关键数据输入后，应由他人复核。用电子方法保存的批记录，应采用磁带、缩微胶卷、纸质副本或其它方法进行备份，以确保记录的安全，且数据资料在保存期内应便于查阅。 与批记录相对应的所有控制记录必须至少保存至产品有效期后一年，确认和验证、稳定性考察 的相关记录和报告等重要文件不得销毁。 实验室偏差和超标结果应如实记录，并进行相应的调查。详细要求可见第14章《超出标准的实 验结果》。 检验报告或证书 根据需要对每一批所检验产品出具检验报告单。 检验报告单应当提供所检验产品的名称、批号，必要时包括其规格和报告日期。有有效期的产 品，可以在标签或分析报告单上提供失效期。有复验期的产品，可以在标签或分析报告单上提供复验期。 检验报告单应当列明按药典或客户要求所做的各项测试，包括可接受的限度和得到的结果。 检验报告单应当由指定的质量部门人员签名、签日期。如有要求，检验报告还应注明原制造商 的名称、地址和电话。 如果由重新包装者/重新加工者、代理人、中间人或由其代表出具新的报告 单，这些报告单上应 当注明做分析的实验室的名称、地址和电话。还应当附注原制造商的名称和地址，以及原制造商的报告单的复印件。 有洁净厂房或(和)实验室的工厂应该有环境监控的规程，包括取样方式、取样频率、取样点、 警戒限、行动限及异常结果的调查及处理等内容。环境监控记录至少包括取样点、取样日期、取样方式、取样人、结果等内容，并应定期做趋势分析。 工厂的生产用水应在制定规程的基础上定期监测，，包括生产用水的种类、 取样点、取样方法、 取样频率、检验项目、接收标准及异常结果的调查及处理等内容。生产用水的检验记录至少包括取样日期、取样点、检验日期、检验项目等内容，每次检验都应有检验报告单。应定期对其关键项目进行趋势分析。 分析方法验证方案和报告应该包括验证目的、适用范围、职责、验证项目及标准、方法描述、 验证结论等。具体要求参见第,,章《分析方法验证》 应该有实验室仪器的使用、校准及维护的规程及记录。使用规程应包括仪器的开关机、具体操 作步骤、使用注意事项等;校准规程应包括校准周期、校准内容、校准项目及标准，还应规定校准失败后应采取的措施等等;仪器的维护规程应包括维护项目、维护周期等内容。仪器的使用、校准及维护都应如实记录。 实验室仪器的验证包括设计确认(DQ)、安装确认(IQ)、运行确认(OQ)、性能确认(PQ)等内 容。具体要求参见第10章《实验室分析仪器的验证》。所有验证文件应长期保存。 实验室应有试剂的管理规程，包括试剂的领用、登记、储存、使用等规定。实验室配制的试剂 应有配制记录。 实验室应有标准品的管理规程，包括法定标准品和工作标准品的管理。来源于CP、EP或USP/NF 的标准品不需要进一步标定，对使用前有预处理要求的标准品(如:干燥处理)，应按照标签或证书的要求进行。非官方来源的标准品应当通过合理的工作获得最高的纯度，应当全面测定确保其鉴别、效力、质量、纯度、和效价。标准品的管理应涵盖标准品的使用、内部标准品的标定、标准品的保存等内容。工作标准品应该用法定标准品进行标定，并做好记录。所有相关标准品都应建立使用记录。 实验室如果使用菌毒种，应该有相应的规程规定菌毒种的领用、登记、储存、使用及销毁等， 并应有详细的记录。 实验室用到的易制毒品/剧毒物品如砷化物、可溶性钡盐等应有相应的管理规程，必须严格按照 易制毒品/剧毒物品的管理规定执行，并建立试剂配制记录、使用记录和销毁记录等 6取样 【背景介绍】 6.1定义 为确定药品或物料的质量是否符合预先制定的质量标准，需要根据制定的取样方案对药品或物料进行取样，取样方案中应明确取样的方法、所用的取样器具，确定取样点、取样频率以及样品的数量和每个样品的重量，盛装样品用的容器等。取样是整个质量控制过程中非常重要的一个环结，对于从一批产品中取出的样品，虽然数量很小，但是对该批整批产品的质量来说却是具有代表性的。因此有必要非常仔细的制定取样计划、执行取样程序。 6.2应用范围 药品生产的各个环节都有可能需要取样进行质量检查，但是制程验证、清洁验证和环境监测相关的取样不会在此论述，因为制程验证和清洁验证的取样很难一概而论，应根据相应的验证草案进行取样，而环境监测的取样则将在微生物章节进行论述。取样操作主要服务于以下生产阶段的质量控制: 原材料(包括辅料、活性成分和包装材料) 中间产品 中间过程控制的取样 成品(包括留样的取样) 【技术要求】 6.3要求 6.3.1人员 选择取样人员时应该考虑以下几方面: 良好的视力和对颜色分辨、识别的能力 能够根据观察到的现象做出可靠的质量判断和评估(例如检查要取样物料的包装状况) 有传染性疾病和在身体暴露部分有伤口的人员不应该被安排进行取样操作 取样人员还要对物料安全知识、职业卫生要求有一定了解 取样人员应该接受相应的培训使其熟悉取样方案和取样流程，他们必须掌握取样技术和取样工具的使用，必须意识到在取样过程中样品被污染的风险并采取相 应的安全防范措施，同时应该在专业技术和个人领域得到持续的培训。 取样人员的培训应该涵盖以下方面: 取样方案的制定(取样指南) 取样程序，包括样品的采集方案 取样技能以及取样器具的使用(取样工具和样品容器) 取样时应采取的安全措施(包括预防物料污染和人员安全防护) 样品外观检验的重要性(样品观察的第一眼原则) 对异常现象的记录(例如包装被污染或破损) 取样器具和取样间的清洁 6.3.2取样器具 应该根据要取的样品选择合适的取样器具。取样器具应该具有光滑表面，易于清洁和灭菌。取样器具使用完后应该立即清洁，必须在清洁、干燥的状态下保存，再次使用前应进行消毒，用于微生物检验样品或无菌产品取样时必须先灭菌。破损的取样器具必须有明确标识并立即停止使用。一般用来取原辅料的取样器具有浸取式吸管、分层取样器、吸管、塑料勺、标签和密封条等，生产单位应该尽可能从有资质的供应商处购买此类取样器具。 6.3.3样品容器 取样用样品容器一般需满足以下要求: 易于装入样品 易于倒出样品 容器表面不吸附样品 易于密封和存储 重量轻、便于携带 如需要应该能够避光 6.3.4取样间 取样间不能使用易产生颗粒物的材质，应易于被有效清洁和消毒。取样间室内表面(天花板、墙面和地板)应尽可能的保持光滑无痕。取样间一般应在特殊房间或特别设计的房间(包括生产区间里的取样间)，取样间的洁净级别应等同生产区域，如需要应该有防爆功能，取样间应装备有良好的灯光、满足取样时对温湿度的要求和充分的通风设施(例如装备抽气单元、高效滤膜和层流单元)。只有经过授权的人才有权限进入取样间，同时必须准备相应的规程以规定取样间的清洁程序和清洁频次，以及取样间环境的监测。 【实施指导】 6.4流程实施 6.4.1取样方案 取样方案是根据物料或药品中要取的样品数量(一个或多个样品)而预先制定的取样程序。其中包括取混合样品，例如从n+1个包装中取样混合进行微生物或理化分析;同时亦包括基于取样量和应取样包装数确定的各初始样品，例如从不同包装中取样的单一样用于鉴别实验;还应该包括留样的取样。样品必须是从整批物料中取出的具有代表性部分(随机样品)。一般来说，取样方案应该清晰定义以下内容: 取样的方法 取样的器具 样品量(一般为2-3倍的全检量)以及需要取的样品数量 是否有特殊取样要求，例如分包样品 样品容器 取样完成后被取样包装上的标签 避免交叉污染应该采取的措施，特别是对无菌产品 对人体毒害的防护措施 样品的贮存条件 清洁程序以及取样设备的储存方式 需要取的样品数量应该根据相关标准，例如国标GB/T2828和ISO2858等，基于统计学原理进行计算确定以确保样品有代表性。中间过程控制的样品应该至少从工艺流程的开始、中间和结束过程进行取样。 6.4.2取样 取样方法必须明确说明，其中信息应该包含样品数量(一个或多个)及每个样品的取样量、样品取样位置(例如底部、下面、里面、外面、上面、中间或者是周边)。如果要取多个样品，应该在取样方法里说明样品是否应该混合。一般用于物料的逐桶鉴别实验的样品不允许被混合。 中间过程控制样品的采集一般由中间控制实验室的人员执行，生产单位应制定相应工艺的关健控制点和取样检测频率。 6.4.3标识 取回的样品必须要有明确标识，标签上至少应该包括以下信息: 样品名称 样品批号 取样日期 样品来源(应具体到包装容器号) 样品储存条件 如需要，应标明取样时间和样品测试允许时间 取样人 取完样之后，被取样的包装容器应该贴上取样标签，同时密封以使贮存阶段内容物产品质量受损的风险降至最小。 6.4.4取样记录 取样过程应该被记录在取样报告或取样记录中。取样记录上应该包含取样计划中的所有内容，如样品名称、批号、取样日期、取样量及样品来源(即样品取自哪个包装)、取样工具以及取样人等信息应该清楚的记录在取样记录中，必要的时候还应在取样记录上注明取样时的温度、湿度以样品暴露时间等信息。 6.4.5取样的异常处理 取样时，取样人员需要对产品(物料)外包装和物料外观进行现场检查，需要检查核对标签，如品名、生产日期和失效日期等信息。如果发现不符合的现象，取样人员应立即停止取样，将观察到的不符合现象记录在取样记录中，并通知公司质量管理相关部门进行调查处理，调查可与采购人员和供应商/生产商一起进行。 6.4.6留样 A.原则 用于留样的样品要能代表整批物料或产品的质量，也可以抽取其它样品来监控 生产过程中最重要的环节(如生产的开始和结束环节)。成品留样应该是最终市售包装形式，原料药的留样如不采用市售包装形式的，可采用模拟包装。用于药品生产的活性成份、辅料和包装材料均需要留样。 B.数量 一般来说，成品留样量应至少为全检样品量的两倍。对于活性成份、辅料和包装材料的留样量，应至少足够进行鉴别检验。 C.储存条件 成品留样应该根据批准的储存条件进行储存，至少储存至效期后1年。原始物料应按照生产商/供应商要求的条件储存，如果稳定性许可的话应储存到物料最后使用日期后2年。生产过程中用到的溶剂、气体和制药用水不需要留样。 D.使用 留样的使用可以分为主动使用和被动利用两种类型，主动使用是指公司内部主动对留样进行质量追溯。被动使用是指有客户或政府监查机构投诉或其它非预期事件发生，用于质量调查时对物料或产品的质量确认。留样使用之前必须得到所在公司授权部门的批准。 E.文件 留样应有相应的留样记录，记录留样的名称、批号、数量，取样日期，产品(物料)失效日期、储存条件、储存期限以及留样管理人员的签名等信息。 对于成品留样，应至少每年一次对留样外观进行检查并留下检查记录，一般应每年至少对同一产品的3批留样进行外观检查。外观检查不应损坏留样包装。在效期内出现外观异常时(例如外包装变形、褪色、字迹不清淅或掉字等)，公司质量管理部门应对异常现象进行全面彻底调查并采取相应纠正和/或预防措施。 【实例分析】 某药厂的取样计划示例 该药厂将供应商根据其历史供货状况将供应商分成批准级(Approval)、授权级(Qualified)和认证级(Certified)三个不同等级。接收物料时，对于来自不同等级供应商的物料需要进行不同程度的取样和检验。以下是该药厂一份针对批准级供应商提供的固体原料药A的取样方案，该原料要求储存于2-8?的环境中: 取样量和取样数量的确定 基于统计学原理对来货进行取样，每一个包装都需要分别取样2g，并根据现行控制方法进行鉴别实验;从n+1个包装中取样混合进行微生物限度实验，总取样量20g，每个取样包装取平均量;从个包装中取样混合进行理化全检实验，总取样量40g，每个取样包装取平均量;从任意一个包装中取样50g作为留样。 取样工具 不锈钢勺、不锈钢插入式取样枪，其中用于微生物取样的不锈钢勺须先灭菌并且在灭菌后一周内使用。 盛装样品用的容器 2#自封袋用于装鉴别样品，5#自封袋用于装理化样品，经过灭菌的玻璃瓶用于装微生物样品，适当体积的棕色玻璃瓶用于装留样。 取样程序 取样之前，根据现行SOP准备样品标签，标签信息包含样品名称、样品类别、数量、批号、取样日期、取样人等。根据现行SOP对取样工具进行消毒并做好消毒记录。 取样过程严格按照现行SOP执行，佩戴口罩、手套、套袖等防护设施，每一件取样工具只能用于从一个包装中取样。样品取回后应储存于2-8?冷藏冰箱。留样交由留样管理员登记接收并尽快转移至冷藏库中储存。 从上述示例可以得到整个取样操作所需要的全部信息，任何一个合格的取样操作员都可以根据描述取回样品。这正是一个完善的取样计划所应该达到的目的。 【要点备忘】 任何时候都必须清楚理解以上提到的各个方面，没有代表性的样品，其分析结果并不能得出整批产品质量的准确结论。取样错误会让质量控制程序的余下所有阶段处于令人怀疑的状态。在实际工作中，要确定分析结果不符合质量标准的根本原因是由于取样错误造成的是非常费时和费事的。 所以，有代表性的样品将是实验室能否提供准确可靠的实验结果的最重要前提。为了获得有代表性的样品，实验室应该重点关注以下方面: 建立取样操作规程 明确和完善取样计划 严格执行取样计划 建立取样员的培训 制度 关于办公室下班关闭电源制度矿山事故隐患举报和奖励制度制度下载人事管理制度doc盘点制度下载 ，既有新员工的取样技能培训，还应有持续性的取样技能和相关法规的 培训计划。 7试剂及试液的管理 【法规要求】 【背景介绍】 7.1定义和应用范围 试药或试剂是实验室对物料或产品进行质量控制的重要组成部分。正是考虑到试剂在质量控制程序中的重要性，要求在试剂准备、配制和文件记录方面应视同标准品或对照品进行管理。欧盟GMP实施指南明确要求，不管试剂将用于定量分析还是定性分析，都应该确保试剂质量并按批准的方法配制试液。。化学试剂用于质量控制的各个分析阶段，根据使用领域不同，可以选择不同级别的试剂。本章主要讨论化学类试剂和试液，培养基的管理将在第17章中详细论述。 【技术要求】 7.2要求 7.2.1采购接收和标识 实验室在接收试剂、试药时，应在每个试剂瓶或包装箱上贴上标签，标签上应 注明接收日期和试剂的失效日期。如果试剂生产厂家给出有效期的可以采用厂家的效期，厂家没有明确给出有效期的，使用单位应规定使用效期。实验室配制的试剂，标签上还应标明试剂名称、贮存条件以及试剂配制人和配制日期，若是滴定液还需要标明浓度、校正因子以及标定条件。 试剂的第一次开瓶使用者，应将试剂的开瓶日期同时标注于试剂标签上并签名。 试剂标签上的试剂名称可以使用规定的编码代替，但是必须确保编码是唯一的，防止引起试剂与试剂之间或者同种试剂不同批次的混淆。 对于剧毒或易制毒试剂的采购和管理应符合国家相关法规的要求，应该在申请采购之前向相关部门提出申请，接收时应有专门的可控区域进行储存。 7.2.2储存和使用 如果试剂瓶上有明确的储存条件要求，必须遵照执行。否则，试剂应储存在密闭容器中，避免 阳光直射并置于干燥、温度可控的环境中，且试剂库温度应有记录。 原则上，试剂均用于特定的实验目的，如果不能采购到，试剂的配制过程应尽可能详细的描述作为试剂配制指南。 剧毒或易制毒试剂的储存应有专人进行管理，使用应有记录，进行物料数量平衡管理，确保剧毒或易制毒试剂被用于预定用途。 使用试剂时，其名称或代号、生产商的名称、生产日期和有效期都应包括在质量控制测试过程的记录中，以保证其可追溯性。 7.2.3试剂使用效期的管理 实验室用到的所有试药和试剂，都应该有合理的有效期。试剂的有效期应该是基于历史数据的总结或者是稳定性研究的结果，并经过质量管理部门的批准。对于采购的试药和试剂，应该遵守生产厂家规定的有效期。对于生产厂家没有规定有效期的试剂，使用单位可以根据合理的科学依据规定试剂的有效期，一般来说试药自开瓶之日起最长推荐有效期不应超过5年。 7.2.4报废 实验室应该制定相应的试剂报废处理流程，根据不同的试药、试剂特性和相应的法规要求制定相应的报废流程。 7.2.5文件管理 试剂管理的文件一方面应涵盖试剂的接收与配制，另一方面也应涵盖试剂在实验室的使用。 试剂的配制程序必须精确描述，最好是使用同公司实验指南一致的格式。配制程序中应规定使用试剂的质量等级。试剂配制记录应包含配制日期以及所用试剂的生产厂家、批号等信息。对于实验室配制滴定液，使用单位应该有相应的程序规定其配制和标定，并明确标定与复标的接受标准。 8标准品/对照品 【法规要求】 【背景介绍】 8.1定义 标准品是通过特殊合成工艺单独合成或者是用正常流程生产的通过额外的提纯工艺得到的物质。标准品在用作标准品/对照品之前须经检定确认其质量和最高可能达到的纯度。 国家药品标准品、对照品是指国家药品标准中用于鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质检查等的标准物质。 企业可以选择相应的物质，对照国家标准品进行标定，标定后的物质可以在企业内部用作标准品，是为企业自制工作标准品。 8.2分类 标准品按照纯度可以分为以几类: 基准标准品纯度达到原子重量级标准的物质。 一级标准品市售的纯度达到99.98%的标准品。 工作标准品市售的纯度达到99.95的物质。 二级标准品用一级标准品标定的、纯度较一级标准品稍低的物质。 8.3应用范围 标准品、对照品应用于药品鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质等药品检验的各方面。 【技术要求】 8.4要求 企业应建立对标准品、对照品的管理规程，明确对其的管理和使用。 8.4.1接收 质量控制部门应安排有专人负责接收和管理标准品并建立标准品接收记录。接收标准品时对于有储存温度要求的标准品应该立即放到符合温度要求的环境中。标准品负责人在接收时应该检查标准品名称、批号、数量、有效期等信息并将其记录在标准品接收记录中。第一位开瓶者应该在标签上注明首次开瓶日期，并签名签日期。 8.4.2标识 购自官方或有资质厂家的标准品、对照品一般都会有明确的标识。 企业自制的标准品、对照品应该有明确的标识，标签中应该至少包含标准品的名称、批号、纯度、有效期或复检期、数量和贮存条件等，如有必要，还应包括处理指南、安全指南等信息。 企业自制的标准溶液也应该有明确的标识，标签中应该包含标准溶液名称、配制人、配制日期和溶液有效期。为了便于标准溶液使用的追踪，标准品溶液标签中还可以定义标准品液的编号，编号的形式可以根据情况由使用单位自行定义，实验记录中应能体现标准品溶液的编号。 对于企业自制的工作标准品，还应在标签中明确标定日期，标定人及标定浓度。 8.4.3标准溶液的稳定性研究 药典或者其它标准品、对照品的提供机构一般不会明确规定标准品的有效期，特别是对开封的标准品或配制的标准溶液使用期限，原则上来讲，不推荐重复使用标准溶液，如果需要重复使用同一份标准溶液，使用单位应对其稳定性和使用效期进行研究。在进行标准品溶液的稳定性研究之前，应起草该标准品溶液稳定性研究草案，并获得公司质量管理部门的批准。稳定性研究草案里应明确标准品溶液的配制程序、储存条件、稳定性研究方案、稳定性结果的记录和判断程序。对于标准品的有效性的判断，可以根据不同时间点的标准品检查结果，比如HPLC的峰面积、UV的吸收值或者TLC展开图中斑点大小和颜色深浅等。稳定性研究结束后，需要对实验结果进行总结、分析，根据评估给出溶液的内部推荐效期，同时征求质量管理部门的意见并获得其批准。批准后的标准品溶液效期可用于实验室内部对标准品溶液的使用。 8.4.4标准品、对照品的使用、处置和贮存 使用单位应该有SOP对标准品、对照品的储存、处置和分发等流程进行规定。SOP中应该规定有正确的处置方式、文件的处理，对于不在室温贮存的标准品还应规定从储存区域取出后恢复至室温的时间。 SOP还需要规定标准品的使用注意事项，例如是否需要在称量使用前干燥、是否需要重新测定标准品、对照品的LOD或者有其它应规定的流程，最后还应规定用于计算的数值。 应根据标准品、对照品的特性决定其储存条件。有些可能需要冷冻储存，有些可以是冷藏储存，还有一些性质比较稳定，只需要储存于常温环境中即可。从标准品稳定性角度来说，对标准品、对照品最好的储存方法是将其分装成合适的小包装单独标识进行储存。 8.4.5文件管理 标准品、对照品的管理的文件应包括标准品的接收、标识，标准品和标准品溶液的储存和使用，以及过期标准品和标准品溶液的处置。 9实验室分析仪器的确认 【法规要求】 与国外法的比较 新版中国GMP中第七章“确认与验证”对企业确认和验证工作进行了较详细的描述，这些与欧美法规中的要求基本一致。 下表中列出了美国和欧盟指南中涉及实验室分析仪器和实验设备确认的相关指南 【背景介绍】 近年来，自动化程度高，构造复杂的分析仪器的应用日益增加，分析仪器确认在实验室管理系统越来越重要。虽然过去也进行仪器、设备的测试和检定，来确保仪器的准确，但随着全面确认体系的发展建立，国际上对于生产设备、设施的确认指南和要求也逐渐被应用于分析仪器的确认。 适用的分析仪器是获得准确可靠实验数据的基础。分析仪器的确认是证明仪器的安装，运行和 性能满足使用要求，并建立相关校验和维护程序的过程，通常包括设计确认，安装确认，运行确认和性能确认。 9.1应用范围 分析仪器的确认适用于质量控制实验室(QC)和中间过程控制实验室(IPC)的实验设备和分析仪器。 现代制药工业的实验室有很多种类的仪器设备，包括从简单的熔点仪到程序化高的高效液相色谱仪，近红外分析仪等。复杂程度不同的仪器所需要的确认级别和范围也不一样。用户可以根据仪器的复杂程度和使用需要，将仪器分为不同的类别，确定不同的确认级别。目前国内还没有实验室仪器设备分类的标准，参考美国药典第1058章>分析仪器的确认<，根据所需的确认级别，可以分为以下3类: ,类，不具备测量功能，或者通常只需要校准，供应商的技术标准可以作为用户需求。 例如:磁力搅拌器，离心机，摇床。 ,类:此类仪器具有测量功能，并且仪器控制的控物理参数(如温度，压力或流速等)需要校准，用户需求一般与供应商的功能标准和操作限度相同。例如:熔点仪，分析天平，,,计，折射仪，滴定仪，干燥箱等。此类仪器或设备通常需要进行安装确认和运行确认，并制定相关操作和校验,,,。 ,类:此类仪器通常包括仪器硬件和其控制系统(固件或软件)，用户需要对仪器的功能要求，操作参数要求，系统配置要求等详细描述。例如:溶出仪，紫外分光光度计，高效液相色谱仪，气相色谱仪，恒温恒湿箱，近红外分析仪，红外光谱仪，等等。此类仪器和设备需要安装确认，运行确认和专门的性能确认，并制定相关操作、校验和维护SOP。 需要指出的是仪器类别的划分及其适应的确认程度应由实验室根据仪器的使用需求确定，可以将分类的原则在仪器确认的,,,中描述。根据仪器的使用不同，不同实验室的仪器分类也可能不同。 9.2确认实施 9.2.1验证总计划 分析仪器确认和验证与其他确认活动一样，应按照公司确认或验证总计划进行管理和实施。确认或验证总计划全面介绍了公司确认的方针策略，组织实施，以及确认活动的范围包括厂房、设施、设备、检验仪器、生产工艺、操作规程，分析方法，计算机系统等;再确认、变更控制的要求，计划和时间安排也是确认或验证总计划的重要内容。根据不同公司确认管理的要求，分析仪器确认可以作为 公司确认或验证总计划的一部分，也可以制定单独的确认或验证总计划。确认总计划的制定可参见公用系统指南确认和验证章节。 9.2.2确认方案 在确认实施前，应由确认负责人编写方案。确认方案要对确认各个阶段(设计确认，安装确认，运行确认和性能确认)的要求进行规定，对于比较复杂的仪器设备，每个阶段可以准备单独的确认方案;对于相对简单的仪器，所有阶段可以包含在同一个方案中。 在确认方案中，应对仪器的使用目的，主要功能，关键构造进行描述，详细定义需要确认的项目、测试程序和接受标准，通常确认方案要包括以下内容 确认目的 确认过程的职责 仪器介绍，包括仪器的生产商，型号，序列号，操作系统，关键构造和主要功能的描述 设计确认的程序和接受标准 安装确认的程序和接受标准 运行确认的程序和接受标准 性能确认的程序和接受标准 仪器的校准要求 确认过程中的培训，包括使用，校准和维护的培训 相关SOP的制定，包括仪器操作，校准和维护标准操作规程 确认过程中偏差的处理 确认报告的编写 如果确认方案是由仪器供应商提供，在确认实施前，确认方案应由确认负责人和质量部门审核批准，以确认符合本公司确认的要求才能使用。如不符合，应和供应商进行沟通并修改或增加确认项目或要求。 9.2.3确认实施 确认活动要依照已批准的确认方案实施，所有确认活动应进行实时记录。实施过程中如果出现偏差，应对其进行及时调查和评估。 A.设计确认DQ(Design Qualification) 设计确认是根据用户需求标准(URS)的要求检查仪器的设计规格，包括仪器的功能，配置，操作参数的范围是否满足使用要求，以及对仪器供应商提供确认，维护，培训资质能力的确认。设计确认通常在仪器采购前进行。 设计确认主要有以下活动和文件: 检查仪器的设计，包括仪器的主要配置，功能原理，参数范围，操作系统，安装、使用环境以 及与其他系统的连接等 如需要，检查仪器及其配件的材质证明，如溶出杯的材质 确认供应商的资质能力。如需要，可对供应商进行审计，形成审计文件 主要配件列表 图 实验室仪器大部分为市售的非订制仪器(commercial off-the-shelf)，此类仪器已经由制造商在出厂前完成设计和生产，对于实验室用户不必再进行单独的设计确认，但仪器确认负责人和使用者应检查和评估供应商提供的设计确认文件或规格标准是否满足要求。并应确认供应商有能力提供仪器安装，确认，维护以及培 训的要求。 B.安装确认IQ(Installation Qualification) 安装确认是提供文件性的证明，确认仪器是按照规定的要求安装的，并且安装环境满足运行要求。并且检查仪器及其配件是否与订单一致，使用手册、出厂证明是否齐全。 安装确认主要包括以下内容和文件: 交付物检查，检查仪器的型号与订单一致，仪器配件，软件，操作手册齐 备，没有遗漏和破损。 检查并记录仪器的相关信息，型号，序列号，操作系统的种类和版本号，以及安装房间号等。 通常使用表格或安装图。 检查并记录安装环境及相关动力系统是否满足规定的要求，包括环境的温湿度，电力系统，压 缩空气等。例如对于天平，溶出仪检查安装实验台的水平度是必须的。 仪器的安装，包括硬件和软件的安装。通常由供应商和实验室确认人员共同完成。按照确认方 案的要求，安装并记录仪器安装过程。确保仪器主体，测量仪表，传感器，管路，电源电缆等被正确连接，需要时应对关键部件和管路进行标识。对于需要计算机软件控制的仪器，安装前要确认计算机的配置满足控制软件的要求。 网络和数据存储:一些仪器需要连接网络或者数据存储器，比如HPLC，应按要求连接，并检查 其功能。 C.运行确认OQ(Operation Qualification) 在仪器安装确认完成后，测试仪器的功能能否满足设计要求和用户需求的过程。测试的种类和范围依赖于仪器的复杂性和功能性。如需要，仪器所采用的操作系统的功能也在此阶段进行测试.运行确认的草案应包含测试项目，详细地测试过程，使用的标准仪器或标准品等，以及接受标准。每个测试结果应被清晰的记录，并由专人复核。 主要测试内容和文件要求如下: 校验:关键仪表、传感器应在运行确认前或在运行确认中进行校验。校验范围应满足用户使用 的范围。如HPLC的流速，若实际使用范围是0.5-3.0ml/min，则校验范围应至少涵盖0.5-3.0ml/min。 仪器功能测试:用户需求中所有规定的功能都应该被测试，特别是对于质量控制和安全有关键 影响的功能是非常重要的。应根据用户需求的操作范围，对操作参数的范围进行试确认，而不能仅仅对典型的情况进行测试。如果可以，应进行挑战性试验。 报警测试，如冰箱温度超出要求，恒温恒湿箱的温湿度超出规定范围。 如果操作系统有登录权限的设定功能，应进行测试。不同级别的权限如管理员、使用者应在使 用SOP中进行规定。 数据的保存、备份和存档----基于对操作系统和数据处理系统的需要，数据的处理如安全性， 存储，备份，恢复,审计追踪等应按照规定的程序进行测试。 培训，应由供应商对使用人员，维护人员进行培训。 此外，如果适合，仪器的操作标准规程，校验和维护程序也应该在运行确认阶段制定。 D.性能确认PQ(Performance Qualification) 性能确认的目的是确认仪器能够按照用户需求持续运行。在安装确认和运行确认完成后，通过性能确认证明仪器的在正常操作环境中的适用性，主要活动包括: 性能测试:根据用户的使用要求，设计一个或多个测试确认仪器满足预期的使用要求，如培养箱的性能确认，应根据用户要求的温度范围进行空载和最大负载实验。系统适用性实验，或其他测试检查也可用于性能测试，如TOC可以依照药典进行系统试用性试验。水分滴定仪可以进行重现性测试证明仪器的稳定性。有些仪器的运行确认和性能确认可以在一个阶段进行并记录的，如HPLC的OQ/PQ测试，UV-Vis的OQ/PQ测试 在OQ/PQ中进行的测试，可以规定在仪器的操作或校验SOP中，在日常使用过程中定期执行，以检查和确认仪器持续始处于受控的状态，建立日常使用中的测试项目和频率是OQ/PQ的一部分。测试项目和频率的设定应基于下列因素和必要的风险评估: 法规要求 测试功能的关键程度 仪器供应商的推荐 仪器的操作环境 仪器本身的稳定性，或基于此类仪器的历史数据分析 9.2.4确认报告 所有测试项目完成后，应由确认人员根据确认记录起草仪器确认报告，用来总结确认活动，并确认方案中的所有项目是否完成，评估测试结果以及对仪器状态明确的阐述和结论。确认报告主要包括以下内容: 对确认结果的总结概述 设计确认，安装确认，运行确认和性能确认的结果和记录 确认支持性文件，如标准仪器或标准品的证书，供应商工程师的证书等文件应被附于确认报告。 对确认过程中偏差的总结。 确认结论。清晰的阐述仪器是否满足使用要求。 仪器的操作、校验和维护的SOP的制定作为确认活动的一部分，应在确认报告中予以描述并确 保在仪器使用之前得到批准。仪器操作程序，校验频率、项目及接受标准，维护内容和频率，以及人员的职责应在SOP中详细规定。 性能测试项目，系统适用性试验的要求:如果在确认过程中，一些测试项目需要在日常使用中 定期检查，应在报告中描述。通常可以统一在使用或校验SOP中规定。使用、维护的培训情况，应有相应的培训记录 仪器再确认的要求:可以根据法规和使用要求，供应商的推荐或历史数据规定再确认的周期。 9.2.5系统适用性试验 系统适用性试验通常在仪器使用过程中进行，是证明仪器或系统在使用时满足预期使用要求的测试，逻辑上可以认为是仪器确认的持续。 美国药典中定义系统适用性试验是用来确认仪器或系统的性能能够满足既定标准，这些测试与样品测试一起进行，以确保仪器或系统的性能在使用时是被接受的。系统适用性试验是液相和气相色谱法必须的组成部分。是用来证明色谱系统在使用时满足预期的实验要求，是对仪器性能，分析操作，色谱柱条件及被测 R)，系统精密度(RSD)，托尾试样品的综合 评价 LEC评价法下载LEC评价法下载评价量规免费下载学院评价表文档下载学院评价表文档下载 。主要评价指标包括:分离度( 因子(T)等。评价指标的标准通常来自方法确认的规定，所以这种系统适用性试验认为是基于实验方法的系统适用性试验，是实验方法的必要组成。 有些系统适用性试验的测试项目来源于仪器确认。例如，水分滴定仪，可以用酒石酸钠二水物测量器准确性和精密性，如果测量结果满足要求，说明仪器满足日常使用的要求;PH计使用前需要进行标准液的校准。TOC的系统适用性试验。该试验的项目和标准通常来自于仪器确认的性能测试项目，可以被规定在仪器使用或校验的SOP中。 9.2.6实验室仪器控制系统和数据处理系统的确认 美国药典第1058章>分析仪器的确认<将实验室应用的软件分为3类:固件;仪器控制，数据获取、处理的软件;独立软件。 固件系统(firmware) 固件系统内置于系统的集成芯片中，仪器的操作通过集成芯片完成。用户通常不能改变固件的设计和功能，只能进行简单的参数选择或设置，如果固件出现问题，仪器也不能正常操作。因而，固件和仪器硬件是一体的，而不是独立于仪器的软件。毫无疑问，当仪器进行确认时，其集成固件的功能已经被确认，所以不需要进行单独的固件确认。如果可能，应在IQ过程记录固件的版本号。当仪器固件的版本升级或改变时，应通过仪器的变更系统进行控制。 仪器控制，数据获取、处理的软件 这类软件通常安装在与仪器连接的专用电脑上，比如HPLC的化学工作站，UV的操作软件等。仪器的操作，数据的获取和处理都通过软件操作完成，只有很少的操作需要通过仪器硬件。软件和仪器的功能是紧密配合，难以分开的，对产生可靠的分析数据都是至关重要的。因而，对于系统整体的确认要比单独进行软件确认更有效。用户在系统测试时，如果仪器操作和数据处理都是满足要求的，则证明软件的功能也是适合的。但当有专门的要求，或软件重新安装或升级是，应进行软件的安装确认和运行确认。 在仪器初始确认时，仪器的供应商应提供软件设计和经过确认的证明。安装软件的电脑和操作系统应满足软件的配置要求，应按照供应商的要求进行软件安装，安装后确认安装是否完全。 无论是软件和固件，根据仪器的功能和使用的需要，权限控制，数据的保存，备份，存档或审计追踪应该按照批准的方案在运行确认中进行确认。 独立软件 独立的软件系统，例如LIMS，实验室色谱处理系统等的确认可参照质量系统指南计算机系统确认的规定执行。 9.2.7再确认 再确认通常分为定期再确认和基于仪器变更等引起的再确认。 仪器变更等引起的再确认 当仪器有下列情况时，其确认状态受到影响应进行再确认， 经历重大维修，或更换关键部件 仪器的安装地点需要变化， 软件或硬件升级， 由偏差，数据超出标准或数据趋势分析引起 这类再确认的范围应建立在风险评估、变更控制和偏差文件的基础上，根据评估结果，重新进行安装确认，运行确认或性能确认。仪器变更应该有记录，再确认应按照要求准备确认方案和报告。 定期再确认 仪器定期再确认的目的是为了提供证明在仪器日常使用过程中，仪器本身或使用环境的变化(有意的或无意的)没有影响仪器的整体性能，确保分析数据的可靠性。定期再确认通常重复初始确认过程中PQ的全部测试或部分测试。再确认的时间间隔和测试内容应规定在确认报告或仪器的使用SOP中，制定时应考虑下列因素: 法规要求， 仪器类型， 供应商的建议， 使用环境， 日常的维护和校验的程度。 一个很好的方法是，定期对实验室仪器进行确认状态的回顾评估，根据评估的结果，决定再确认的执行和范围。回顾和评估应至少包括以下内容: 上次确认的方案和报告 是否有新的法规要求 仪器相关的技术文件是否齐备 校验和维护是否按规定执行，历史记录和趋势回顾 操作SOP是否被正确执行，使用日志的回顾 仪器相关的偏差情况 仪器变更控制，一系列微小变更的累积会产生关键性的影响 【实例分析】 某实验室购买一台新的溶出仪，需要进行仪器确认。下面介绍自动取样溶出仪的IQ,OQ和PQ的主要测试项目和要求: 【技术要点】 用户需求说明(URS) 用户需求标准:在购买仪器前，通常由仪器使用者起草用户需求标准，并由相关技术部门和质量部门审核批准。用户需求标准的内容主要包括仪器的功能性要求，系统配置要求，以及供应商的服务要求等。用户需求标准不但是选择仪器的标准，也将作为仪器确认的基础。 所以对于仪器功能描述，参数的使用范围要根据实际需求规定明确，以便在确认过程中测试，例如:温度范围，流速范围等。 风险分析(Riskanalysis) 风险分析已经被很多公司应用于确认过程。作为确认活动的组成，风险评估可以被用来对仪器的功能或GMP风险进行分析，根据分析的结果，可以确定所需要的确认活动和相关文件。如采用失效模式和效果分析(FMEA)工具,详细介绍请参见质量体系指南第六章。 确认SOP 实验室应建立仪器确认的,,,，对确认的流程，职责，文件的准备与批准，确认的实施，偏差处理，再确认作出规定。可以是确认总则，也可以针对不同的仪器设定专用的,,,，如天平确认，溶出仪确认，高效色谱仪确认。 对于确认方案，确认报告，用户需求，风险分析制定相应模板，规范确认人员的编写。 10实验室分析仪器的校准与维护 本章中涉及以下问题: 哪些实验设备、分析仪器需要校准 分析仪器校准周期、校准项目和接受标准的制定 分析仪器的校准与维护的文件要求 10.1定义 校准(Calibration) 中国2010版GMP指南中的定义:在规定条件下，为确定一个测量、记录、控制仪器或系统所指示的量值(尤指称量)或实物量具所代表的量值，与对应的由参照标准所重现的量值之间关系的一系列活动。 欧盟的GMP指南中的附录18中校准的定义:校准是在适当的量程范围内，与一参比标准或可追溯标准比较产生的结果证明某一特定的仪器或装置产生的结 果在规定的限度范围内的过程。 维护可以分为预防性维护和非计划性维护(维修): 预防性维护:按照既定的程序，定期对实验设备或仪器的部件进行检查，清洗，修整，更换，确保仪器运行的可靠性，消除可能导致实验结果失败的系统性误差，降低仪器在使用中出现故障的可能。 非计划性维护(维修):是指仪器使用过程中发生故障，或校准不合格时，需要对其进行调整，维修或更换相关部件，使仪器功能满足使用要求。 对于实验室分析仪器，一些性能测试，例如HPLC定性、定量的重现性，基线噪音、基线漂移的测试，UV-VIS波长、透射比准确度和重现性的测试，水分滴定仪的重现性测试等也可以包含在仪器校准和维护的范畴内。 10.2应用范围 质量控制实验室(QC)和中间过程控制实验室(IPC)用于实验分析的设备、分析仪器，测量仪表都应该进行校准，包括简单的测量仪器如温度计，密度计，熔点仪，和复杂的分析仪器如HPLC，TOC等，关键的设备和仪器应有预防性维护计划。 10.3要求 10.3.1人员 A.资质 只有经过培训并授权的人才能进行仪器的操作、校准和维护，相关培训包括: 国家或国际计量的相关规则及法规、专业知识和技能的培训 公司内部标准规程的培训 仪器供应商提供的培训 B.职责 实验室应指定相应的仪器负责人或校准小组，负责按计划安排仪器的校准和维护，确保校准和维护工作能够及时执行，使仪器始终处于良好的运行状态。 仪器的使用者应按照仪器的标准操作过程进行仪器分析，在使用前检查仪器是否在校准有效期内。当仪器发生故障时，应及时通知仪器的负责人。 10.3.2分类 分析仪器的校准可以分为内部校准和外部校准: 内部校准是指由公司内部人员进行的校准活动，通常由具有资质的工程人员或实验室校准人员按照公司的标准操作规程执行，并填写相关校准记录或报告。 外部校准是由具有校准资质的外部机构进行的校准，外部机构如国家权威机构:中国计量研究院， 各省市计量院;国外校准机构:瑞士SGS校准机构，德国DKD和PTB校准机构;或有资质的仪器生产商的实验室等。外部校准要提供有校准结果和有可追溯性的证书。 它包括了:国家强制检定、参比仪器的校准以及由外部权威机构人员执行的其他校准等。如有必要，外部校准结果需要由公司校准负责人评估确认后，方可放行使用。 10.3.3实施指导 实验室应建立总的仪器校准标准规程，规定校准的基本原则，主要内容如下: 校准的分类， 校准计划表或仪器校准 目录 工贸企业有限空间作业目录特种设备作业人员作业种类与目录特种设备作业人员目录1类医疗器械目录高值医用耗材参考目录 的更新， 校准文件的要求， 标准仪器或标准品的来源和管理， 校准结果的评估， 校准失败的处理， 仪器的校准标识， 人员职责 对于一些简单，不需要专门的操作规程的仪器，比如温度计，卡尺，砝码等，其校准周期和接受标准也可以描述在此规程中。 对于配置复杂的仪器，应该建立专门的校准标准操作规程，比如高效液相色谱仪，分析天平，溶出仪等。规程应对校准的项目，校准方法，可接受标准，标准仪器或标准品，校准周期进行详细的规定。 A.校准的周期，校准项目和可接受标准的制定 对于国家强制校准的设备、仪器、仪表，应由国家执行部门根据国家计量检定规程进行校准。 对于非国家强制校准的项目，校准周期和可接受标准应在仪器校准规程中详细规定，并由校准负责人按规定程序执行。对于配置复杂的仪器，应选择仪器的关键参数进行校准，可以为不同的模块或校准点设置不同的校准间隔。通常关键参数来源于仪器验证时对仪器功能和参数的评估。 校准的项目和周期还应考虑以下因素: 可适用的相关标准和法规 仪器的类别 制造商的推荐 相类似的仪器的历史信息和经验 每一个校准项目，必须有对应的接受标准。接受标准应该根据计量法规、使用需求、药典或供应商的推荐而定，但必须以满足实验分析的准确度和精密度为依据。 B.评估和放行 校准结果应经过审核或评估，只有校准结果满足接受标准的仪器才能放行使用。 当校准没有在规定的日期前完成，或校准结果不合格时，仪器应有明显的禁止使用标识。 当有下列情况发生时，应及时通知质量部门根据公司的偏差处理程序进行偏差调查，并对使用该仪器所产生的实验数据进行相应评估: 定期校准结果超出接受标准 超出校准期的仪器被使用时 C.标识 仪器应有明显的校准状态标识，以便仪器使用者检查，比如可以使用不同颜色的标签: 当仪器校准合格，校准报告被批准后，则发放校准合格标签，标签至少应有仪器编号、此次校准的日期，下次校准日期，签发人签字。 止使用标识，表示仪器不能使用。禁止使用标识应有仪器编号、日期和签发人签字。 10.3.4文件 A.仪器使用、校准、维护日志 关键的实验设备和分析仪器应建立仪器使用、校准、维护日志，仪器使用、校准和维护行为都应在日志上记录。日志通常设计成表格，应至少包含以下内容: /校准/维护日期 仪器名称、仪器编号 仪器位置(如适用) 使用 工作描述:实验产品，分析项目，或校准或、维护活动的描述 仪器状态 使用人 B.校准记录和评估报告 内部校准记录或报告:对于由工厂工程师进行的内部校准应设计专用的校准记录或报告，校准记录或报告应具有可追溯性，一般包括: 仪器名称、编号、位置(如适用) 校准记录或报告编号 校准方法或校准操作规程编号 校准数据原始记录 如果原始数据需要计算，也可以将计算公式规定在校准记录中。 校准的接受标准 所用标准计量器具名称、编号、校准有效期和计量合格证明编号，或标准溶液的名称，批号，有效期限，证书编号。也可以将标准仪器计量合格证明或标准溶 液的证书作为校准记录的附件 校准结论及再校准日期 校准人和审核人签名 表10-2校准记录示例 某公司实验室溶出仪水浴和溶出杯内的温度测试记录 仪器名称校准记录编号 仪器编号校准日期 校准人: 日期: 外部校准评估报告 审核人: 日期: 对于由外部机构进行的校准，收到校准证书后，应由校准负责人根据证书评估校准结果 是否符合企业要求，并出具评估报告，评估报告的内容应至少包括: 仪器的名称、编号、位置(如适用) 校准证书编号，校准日期，校准机构名称 评估结果 评估人和审核人签名 仪器的维护 仪器的维护和校准是紧密联系的，维护程序和校准程序可以规定在同一篇操作规程中。 一般情况，仪器进行预防性维护后，应按预定的规程对相关部件进行校准或其他性能测试。例如UV-VIS更换紫外灯后，应进行波长、透射比准确度和重现性测试。 当仪器经历重大维修后，应根据对仪器功能的影响程度进行评估，以确定需要进行校准或再验证的项目。 仪器的维护活动应该被记录在仪器校准、维护日志中。对于比较复杂的仪器可以设计专用的维护记录表格，维护记录表格可以逐项列出需要检查和要更换的项目，记录维护结果，维护日期，执行人和复核人签名。 【要点备忘】 实验室应建立仪器的年度校准和维护计划，设定仪器的校准和维护日期，确保按时完成仪器校 31 准或维护工作。此外，也可以建立仪器目录，将仪器关键信息归纳在目录中，便于仪器的校准和维护的执行，仪器目录应包括:仪器名称，编号，生产厂商，型号，序列号，校准状态和日期，下次校准日期，关键仪器的维护信息等。仪器目录应定期更新，一般为每季度或每半年。 质量控制实验室和中间控制过程实验室所用的计量容器如滴定管、容量瓶、量筒等应由经过培训并获得资质的分析师或有资质的外部机构依照以下计量规程进行检定: 中华人民共和国国家计量检定规程JJG20,2001:标准玻璃量器 中华人民共和国国家计量检定规程JJG10,2005:专用玻璃量器 中华人民共和国国家计量检定规程JJG196,2006:常用玻璃量器 实验室应建立仪器档案，便于仪器的管理与追溯，与该仪器相关的的文件和记录可以在仪器档案中保存，包括仪器的购买信息，供应商资料，使用说明书，使用日志，校准维护记录等。对于比较简单的仪器，例如秒表，密度计，温度计等，可以按类别建立统一的档案。仪器档案应标识仪器的名称，唯一编号。 每台仪器应标有仪器编号(投资号或其他编号)。仪器使用、校准和维护日志，仪器档案，校准报告，检验报告等仪器文件中应使用该仪器编号作为追溯。 只有经过培训的分析师才能进行仪器操作，使用者要确保仪器使用时的状态，检查仪器是否在校准周期内。 分析仪器经过维护，维修或升级后，在重新投入使用前应进行相应的校准或再 验证，以确认其性能满足使用的要求 仪器报废 实验室应建立仪器设备的报废程序，应考虑以下方面: 采用一些合适的方法对分析仪器的性能进行确认，如可进行校准，以确认上一个校准周期所产生数据的有效性。 GMP相关的原始数据的存档和保存时间 相关仪器档案如校准维护记录的存档和保存时间 更新仪器目录，将报废仪器从仪器目录 有些仪器报废时还需考虑EHS的影响 公司资产的处置要求 【实例分析】 分析天平 分析天平 称量是分析实验过程中最普遍的操作之一，准确可靠的分析天平是实验室必不可少的仪器。下面列举了分析天平校准需要考虑的因素: 根据>JJG1036-2008电子天平检定规程<分析天平至少每年检定一次，主要检定项目: 天平的偏载误差 天平的重复性 线性误差(示值误差) 许多技术领先的天平生产商提供了具有校准功能的天平，内置自动/手动校准功能和使用外部标准砝码进行校准。可以定期执行天平的自动/手动校准功能，但不能完全代替外部性能测试。 美国药典>41<章规定对于定量分析的称量操作，称量不确定度(随机和 系统误差)不能超过0.1%，例如称量50mg的物质，则误差不能超过0.05mg。 美国药典>1251<章规定为减少天平的准确度随时间的漂移对称量准确度的影响，应每天对天平32 用标准砝码进行日检，即每天第一次称量前，分析师称量标准砝码，检查称量值是否在已制定的限度内。通常根据天平的称量范围选择两个不同重量标准砝码。 下表为某实验室METTLERAX205分析天平的校准要求: 200g METTLERAX205分析天平:可读性:0.00001g，称量范围10mg, 说明:(1)偏载，重复性，线性测试时间与国家检定时间可间隔6个月安排进行，这样保证天平每半年进行一次该项目测试。 (2)根据天平的精度，METTLERAX205分析天平的校准和日检应使用E2等级标准砝码。 天平的使用与维护示例: 环境:天平应放置在稳定、水平、无振动的位置，应避免强风(来自空调或门窗)和过大的温度波动。保持天平及其周围的干净整洁。 称量前后，分析师应检查天平的清洁，用软毛刷对天平内部进行清洁。如果需要移开天平的称量托盘进行清洁，则应十分小心的将托盘移走，用软毛刷仔细清洁托盘下部残留物质，不要用力触碰天平的机械装置，清洁后重新放置托盘后，应稳定几分钟或更长时间，进行天平日检确认后再使用。 称量前，分析师应检查天平的水平，确认水平传感器的气泡是否在内圈中。 每天第一个使用天平的分析师应按上表进行天平日检，检查称量值是否在制定的限度内，并记录在使用日志上。 每个分析师在使用前应检查使用日志确认天平日检已经被完成，并确认校准标签是否在检验期内。 称量物质和称量盅的总重不能超过天平的最大称量范围。 称量被冷藏的物质时，应放置到室温再打开瓶盖进行称量操作，以避免吸潮。 称量结束后，及时用软毛刷对天平进行清洁，清理所使用的称量纸或称量盅。 移动后的校准或检查 33 天平移动后应使天平稳定到新环境的温度，应至少进行天平日检的检查。根据天平的精度和移动的程度，可能需要重新进行偏载、重复性和线性误差的检查。 断电后的稳定和检查 通常天平应保持通电状态，如果断电或重新开机应根据天平使用说明书的要求稳定一段时间(如AX205需要稳定2个小时)，并按天平日检程序检查合格后，方可使用。 以下列举出天平称量误差通常的影响因素: 天平的防风门未关闭(气流影响度数) 称量物质的重量变化(吸潮) 静电影响(冬天经常发生) 天平和被称量物质的温度不一样 气流影响(没有防风装置) 天平水平未调节好 其他操作造成的震动(影响天平的稳定性) 实验室温度波动 天平移动后没有足够的平衡和稳定 天平断电，重新开机后没有足够的稳定 天平托盘放置不合适，或称量纸接触托盘的周围 高效液相系统校准和维护举例: 以1100高效液相系统为例介绍HPLC系统的维护与校准: 1100HPLC系统包括脱气机，四元泵，自动进样器，柱温箱和检测器5个模块，以及仪器控制、数据处理系统。液相系统的校准是一系列比较消耗时间测试，通常仪器厂商提供校准(验证)的软件包，验证结束后用户可以选择哪些项目需要定期校准并确定校准周期及接受标准。 1100HPLC校准软件包的项目: 某公司 QC实验室选择的校准项目及周期: 表 10-5 HPLC 校准项目及周期示例 34 说明:进样精密度，流速和柱温箱温度的校准应涵盖实际使用范围。 HPLC 的使用与维护举例 操作SOP 的建立 实验室应建立HPLC系统的操作 SOP，对以下方面进行规定: 流动相的准备 依据分析方法的要求配制流动相，通常流动相需要经过0.45um的滤膜过滤并经超声脱气。 系统运行程序 系统登录:只有经过培训的分析师才有权使用工作站。分析师使用自己的用户 名以操作员级别登录工作站进行造作。只有主管或授权的分析师有权使用管理员级别登录，进行分析方法的编辑或修改。 分析方法的建立 根据使用说明书，描述对进样器，泵，柱温箱，检测器的设置方法，规定方法命名和数 据保存的命名方式。 样品命名和序列表设置 应对样品的命名原则进行规定，对序列表的命名和设置进行规定，例如: 色谱图的打印的基本要求 应设计固定的模板供图谱打印使用，模板一般包含以下内容: 通用信息:数据名称，样品名称，检测项目，检测时间和实验者用户名等 方法名称:数据采集方法和分析方法名称 液相信息:仪器名称，色谱柱编号，检测波长，进样体积，流速等。 35 色谱图和积分结果，如需要也包括分离度，对称因子等 实验结束 实验结束后，应使用规定的方法对色谱柱进行冲洗。可以建立专用的清洗程序，设置在序列表的最后。 为延长紫外灯的寿命，应选择“序列结束后仪器自动关闭” 清洁表面 色谱柱的管理 色谱柱的性能对高效液相色谱分析至关重要，维护并监控柱效有利于分析实验的一致性，实验室应制定色谱柱的管理和维护要求，一般包括: 将色谱编号，制定色谱柱使用日志，记录每次实验的项目，标准品峰值，分离度，拖尾因子等。 制定色谱柱平衡要求，如对于新的色谱柱，应按照说明书的要求进行平衡。 色谱柱的清洗和保存，如对于手性色谱柱，应该首先用纯化水短时间冲洗随后用10%的异丙醇冲洗3个小时，并且要保存在2-8度冰箱中。 某公司HPLC1100年度预防性维护举例 表 10-6 HPLC 年度预防性维护示例 说明:以上维护工作必须由经过培训并授权的分析师进行。维护完成后应进行仪器分析方法的验证和确认 36 【法规要求】 【背景介绍】 除中国药品生产质量管理规范对分析方法验证和确认有明确的要求外，下表所列法规中均有“分析方法需验证”的要求。 37 下表中列出了国分析方法 分析方法是为完成检验项目而设定和建立的测试方法，它详细描述了完成分析检验的每一步骤。一般包括分析方法原理、仪器及仪器参数、试剂、供试品溶液与对照品溶液的制备，测定，计算公式及检测限度等。 分析方法可采用化学分析方法和仪器分析方法。这些分析方法各有特点，同一分析方法可用于不同的检验项目，但验证方法验证 在建立药品质量标准时，分析方法需经验证。 定义:方法验证就是根据检验项目的要求，预先设置一定的验证内容，并通过设计合理的实验来验证所采用的分析方法是否符合检验项目的要求。 目的:证明采用的分析方法科学、合理，符合检验要求并能有效控制药品的内在质量。 作用:方法验证在分析方法建立过程中具有重要的作用。只有经过验证的分析方法才可以可靠有效地用于控制药品质量，因此方法验证是制订质量标准的基础。 11.3方法确认 在应用已验证的药典方法和其他法定方法前，应在当前的实验室条件下进行方法确认来证明方法在该实验室的适用性。 11.4适用范围 适用于: 化学药品的物料，中间产品，中间过程控制和产品的理化分析方法的验证 和确认 清洁验证方法的验证 不适用于: 化学药品的微生物方法(微生物方法的验证参见第17章) 生物制品分析方法验证 【实施指导】 11.5方法验证的一般原则 通常情况下，分析方法需进行方法验证。外观、崩解时限、密度、重量、pH值、硫酸盐、灰分、装量不需进行方法验证。 方法验证的内容应根据检验项目的要求，结合所采用分析方法的特点确定。 同一分析方法用于不同的检验项目会有不同的验证要求。 11.6需要验证的检验项目 检验项目是为控制药品质量，保证药品安全有效而设定的测试项目。根据检验项目的设定目的38 和验证版中规定了不同的检验项目需要验证不同的表 11-1 检验项目和验证已有重现性验证，不需验证中间精密度; 2. **:如一种方法不够专属，可由其它分析方法予以补充。 3. ***:视具体情况予以验证。 4.‘是’代表该项内容需要验证，‘否’代表该项内容不需要验证 39 有关欧盟，世界卫生组织，美国药典，ICH和中国药典 2010 版对方法验证的要求详见下表。 表11-2 方法验证对比表 11.7 方法验证药品质量标准分析方法验证 指导原则。 11.7.1 准确度 准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。一般用回收率表示。准确度应在规定的范围内测试。 A. 验证方法 准确度应在规定的范围内建立，至少用 9 个测定结果进行评价。例如，设计 3 个不同浓度，每个浓度各分别制备 3 份供试品溶液，进行测定。应报告已知加入量的回收率(,)或测定结果平均值与真实值之差及其相对标准偏差或可信限。 准确度是定量测定的必要条件，因此含量测定、杂质定量测定均需验证准确度。原料药与制剂所用的具体方法详见下表。 表11-3 准确度方法验证示例 40 120%配制三个浓度的溶 例如:测定含量的准确度, 按标示量的 80%, 100%和 液，每个浓度各分别制备 3 份供试品溶液，进行测定。根据测定结果与配制浓度计算出平均回收率以及相对标准偏差。 B. 数据要求 需报告已知加入量的回收率(,)，或测定结果平均值与真实值之差及其相对标准偏差或可信限。 11.7.2 精密度 精密度系指在规定的测试条件下，同一均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。 精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。 精密度与准确度不同，下图形象地描绘了精密度和准确度之间的差别(A=准确度，P=精密度)。精密度测定了一系列重复性的被分析物之间的接近程度，但它不能表达与已建立的真值之间的符合程度，后者由准确度来测定。通过一系列的测定值，可以得到良好的精密度，但是由于所用分析方法存在的偏差，所得的平均值不一定与真实值(请看图中左下角的较低的打靶环数)相符，在这种状况下，需要修改方法以消除偏差。 图11-1 精密度与准确度关系图 A. 验证方法 精密度可从重复性、中间精密度、重现性三个层次考察。详见下表。 表11-4 精密度验证方法 41 验 日 期 分析人员 仪 器 表 11-5 中间精密度的设计方案 实 色 谱 柱 1 1 A M T 2 2 B N U 3 3 A N U 4 4 B M T 5 5 A M U 6 6 B N T B. 数据要求 均应报告标准偏差、相对标准偏差和可信限。 11.7.3 专属性 专属性系指在其他成分(如:杂质、降解产物、辅料等)可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的特性。 通常, 鉴别反应、杂质检查、含量测定均应考察其专属性。如一种方法不够专属，可由其它分析方法予以补充。例如检测具有旋光特性的活性物质, 除采用非手性薄层色谱法或高效液相色谱法外,还应增加旋光度的检查。 A. 验证方法 表 11-5 专属性方法验证 42 11.7.4 检测限(LOD) 检测限系指试样中的被分析物能够被检测出的最低量。 药品的杂质测定，应通过测试确定方法的检测限。 A. 验证方法 表 11-6 杂质测定检测限验证方法 除信噪比法外，ICHQ2 R1 中还介绍了根据响应因子的标准偏差和斜率计算出检测限的方法 s = 响应因子的标准偏差 S = 校正曲线的斜率 3.3s S 斜率 S 根据分析物的校正曲线评估而来，响应因子 s 可采用不同方法获得，如: (1) 根据空白溶液的标准偏差 测定分析背景的响应就是通过分析适量空白溶液并计算其响应值的标准偏差 (2) 根据校正曲线 用样品建立校正曲线，其中含有检测限范围的分析物，其回归线的剩余标准偏差或或回归线截距的标准偏差作为标准偏差。 B. 数据要求 应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。 11.7.5 定量限(LOQ) 定量限系指试样中的被分析物能够被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定的准确度和精密度。 杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定方法的定量限。 A. 验证方法 43 表 11-7 杂质定量测定验证方法 除信噪比法外，ICHQ2 R1 中还介绍了根据响应因子的标准偏差和斜率计算出定量限的 方法: s = 响应因子的标准偏差 S = 校正曲线的斜率 斜率 S 根据分析物的校正曲线评估而来，响应因子 s 可采用不同方法获得，如: (1)根据空白溶液的标准偏差 测定分析背景的响应就是通过分析适量空白溶液并计算其响应值的标准偏差 (2)根据校正曲线 用样品建立校正曲线，其中含定量限范围的分析物，其回归线的剩余标准偏差 或或回归线截距的标准偏差作为标准偏差. 11.7.6 线性 线性系指在设计的测定范围11-8 线性验证和准确度验证需涵盖的最低浓度范围 44 B. 数据要求 应列出回归方程、相关系数和线性图。 11.7.7 范围 范围系指能够达到一定的精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定，要求见线性耐用性 耐用性系指测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度,为使方法可用于常规检验提供依据。 开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。经试验，应说明小的变动能否符合系统适用性试验要求，以确保方法有效。如果通过耐用性研究发现分析方法对某个或某些测试条件敏感或要求苛刻，则建议在方法中予以写明。 表 11-9 方法耐用性影响因素示例 【实例分析】 含量方法耐用性考虑因素 下表列出了在评估 HPLC 含量方法耐用性中部分需考虑的因素及变化范围, 仅供参考，实际变化范围可依据使用条件设计 表 11-10 HPLC 含量方法耐用性考虑因素及变化范围示例 45 溶液的稳定性研究 溶液的稳定性研究用来证明根据相应方法制备的样品溶液和标准品溶液在规定的储存条件下在一定时间样品溶液和标准品溶液依据方法进行配制和分析。在室温或其他条件下(如冰箱2-8?)条件下储存适当的时间。每个间隔点，用新鲜配制的标准品溶液做对照，测定储存的样品溶液和标准品溶液。测定结果与初始结果进行比较，符合接受标准便可确认样品溶液和标准品溶液在规定的储存条件下在规定储存时间是稳定的。 分析方法验证接收标准 下表为某制药公司分析方法验证的接受标准，仅供参考。 表 11-11 分析方法验证接受标准示例 46 47 (1)截距的绝对值 (2)指回归线的 y值对应于完全溶出(x=100%)时的浓度 (3)指回归线的 y值对应于标示量(x=100%)时的浓度 (4)指回归线的 y值对应于允许限度(杂质的标准)时的浓度 (5) 3个浓度，每个测3次。 在 FDA 质量控制实验室检查指南“15.方法验证”中指出许多含量和杂质的方法采用高效液相 色谱法, 对于这些方法的精密度的要求希望小于或等于系统适应性试验的相对标准偏差. 在美国药典<621> 色谱法中对系统适应性试验的相对标准偏差有如下规定: “对用于含量测定的标准溶液或其他标准溶液重复进样分析，比较其结果来确认精密度是否符合要求。连续进样 5 次，除在方法中已明确规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于 2.0%。 如果5针的相对标准偏差大于 2.0%，可连续进样 6 次，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于 2.0%。” 11.8 方法确认 适用于药典方法和其他已验证的法定标准。因为药典方法和其他法定标准被认为是验证过的分析方法，不需要验证，但需要通过方法确认来证明方法在该实验室条件下的适应性。 不适用于:实验室日常测试操作步骤不需要进行方法确认，例如(包括但不限于)干燥失重，炽灼残渣，各种湿法化学步骤如酸值和简单的仪器方法如 PH 计，除非有特殊要求。 11.9 方法再验证 在某些情况下，如原料药合成工艺改变、制剂处方改变、分析方法发生部分改变等，均有必要对分析方法再次进行部分或完整的再验证，以保证分析方法可靠。 当原料药合成工艺发生改变时，可能引入新的杂质，杂质检查方法和含量测定方法的专属性就需要再进行验证，以证明有关物质检查方法能够检测新引入的杂质，且新引入的杂质对主成份的含量测定应无干扰。 当制剂的处方组成改变、辅料变更时，可能会影响鉴别的专属性、溶出度和含量测定的准确度，因此需要对鉴别、含量测定方法再验证。当原料药产地来源发生变更时，可能会影响杂质检查和含量测定的专属性和准确度，因此需要对杂质检查方法和含量测定方法进行再验证。 当质量标准中某一项目分析方法发生部分改变时，如采用高效液相色谱法测定含量时，检测波长发生改变，则需要重新进行检测限、专属性、准确度、精密度、线性等内容的验证，证明修订后分析方法的合理性、可行性。 48 再验证原则:根据改变的程度进行相应的再验证。 当这种改变到达一定程度时，则需要完整的验证。如分析方法完全改变时，则应视为新方法并需要完整的验证。方法再验证是对分析方法的完善过程，应根据实际改变情况进行再验证，从而保证所采用的分析方法能够控制药品的文件管理 必须制订方法验证和确认的标准操作规程。 在开始验证分析方法之前，必须依据操作规程起草一个验证方案。对于方案存在的需求，有两 个重要的原因:其一是要被执行的程序在方案中能够详细地描述，其二是每个被测参数的接受标准能被具体地规定。 进行方法验证或确认前，应确认如下条件已符合 从事分析方法验证或确认的分析师是合格的分析师。 所用分析仪器已通过验证和校验。 实验必须依据批准的方案进行。 实验过程中任何失败的测试，过程中的偏差或异常均需复核和评估并查出原因。过程中的 偏差或异常需通过正式的体系(如调查报告，验证或确认报告中偏差的鉴定和批准)进行 记录和批准. 验证的结果应以报告的方式给出，它包括了某一产品所有方法的验证， 这 与方法描述的要求一 致。作为一种可供选择的方法，可以将测试规程与分析方法验证部分附在一起，这样做的优点是相关的文件总是和分析方法在一起。 【实例分析】 以下为某制药公司分析方法验证/确认的文件管理流程，仅供参考 (1)分析方法验证或确认的方案 对于分析方法的验证或确认，应制订方案并由相关人员批准后方可进行。 验证或确认方案通常含有以下信息 49 唯一的方案号. 分析方法的版本号以及物料/产品的名称 验证或确认的实验项目 验证或确认的原则和目的 验证或确认的参数以及接受标准 验证或确认实验中所用标准品，检验样品信息 分析仪器的相关信息 所用仪器的信息，如已确认的情况下 方案起草者，复核人和批准者需签字确认 (2)方法验证或确认的执行 进行方法验证或确认前，应确认如下条件已符合 从事分析方法验证或确认的分析师是合格的分析师。 所用分析仪器已通过验证和校验。 实验必须依据批准的方案进行。 实验过程中任何失败的测试，过程中的偏差或异常均需复核和评估并查出原因。过程中的 偏差或异常需通过正式的体系(如调查报告，验证或确认报告中偏差的鉴定和批准)进行记录和批准. (3)报告的起草与批准 分析方法验证或确认结束后，需起草报告相关人员批准。报告中通常含有如下信息: 唯一的报告号 相关方案号 分析方法的版本号以及物料/产品的名称 验证或确认的实验项目 验证或确认实验中所用标准品，检验样品以及分析仪器的相关信息 结果汇总，并与方案中规定的接收标准进行评估 偏离方案的偏差汇总及处理结论 结论，需对方法验证或确认是否成功进行正式描述。 报告起草者，复核人和批准者需签字确认 (4)分析方法验证或确认的方案与报告的存档 方案与报告均集中存档，并长期保存 关于分析方法验证例如:2000年 FDA发给中国一企业的警告信: ........ 2. 用于稳定性检测的分析方法不指示稳定性。另外，没有确立 xx 的杂质框架。 我们的检查显示你们公司在使用的检测 xx 的 USP 滴定法不是一个稳定性指示的方法。另外，你们公司没有确立这个 API 的杂质框架。 在你们的答复中，你们制定和验证了一个指示稳定性的 xx的分析方法，它将包括强制降解研50 究。请在这封警告信的答复中提交分析方法验证和你们降解研究的结果的拷贝件。 我们注意到你们的答复仍然没有解决 xx 杂质谱确立的问题。FDA希望生产厂家确立每个 API的杂质谱，说明用控制工艺生产的典型批次中出现的鉴定杂质和未鉴定杂质。杂质谱架包括鉴定或者定性分析界定(如保留时间)、可检测到杂质的范围和每个鉴定杂质的分类(如，无机、有机或溶剂)。杂质的框架应该在适当的间隔与历史数据进行对比，以发现因原料、设备运行参数或者生产工艺的改变引起的 API 的变化。请在这封警报信的答复中解决这个问题。 【要点备忘】 在进行方法验证或确认前，应已建立分析方法。 分析方法应经验证或确认。 分析方法验证或确认的方案与报告应长期保存。 分析方法在实际使用过程中，应与验证或确认报告中确定的内容一致。 51