【doc】银杏叶中的黄酮醇苷类成分

【doc】银杏叶中的黄酮醇苷类成分 银杏叶中的黄酮醇苷类成分 II,3/,(I 药学ActaPharmaceuticaSinica2000.35(5):363366 银杏叶中的黄酮醇苷类成分 唐于平,王颖,楼凤昌,李延芳,王景华—'_'—'','..?.-_-, (中国药科大学,江苏南京210038) f})3争l y28~.a 摘要:目的对银杳(GinkgobilobaL)叶的化学成分进行分离,鉴定. 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 采用各种色谱技术进行分离.用 IR,uv,MS,HNMR,"CNMR和2DNMR光谱技术确定化台物的结构.结果分得8个黄酮醇苷类成分:槲皮素 1),山奈酚3一O—D一葡糖苷(2),芦丁(3).山奈酚一3一O3一O一D一葡糖苷( —D一芸香糖苷(4).异鼠李素?3一O一D一芸香 糖苷(5).槲皮紊.3一O一D一葡萄糖基(1-2)一L一鼠李糖苷(6).山奈酚一3-0一D.葡萄糖基(1-2)一L一鼠李糖苷(7),异 鼠李素一3一O一D一葡萄糖基(1—2)一n—L一鼠李糖苷(8).绪论化台物8为新化合物.. 关键词:!!差塑壁蔓;异鼠李素一3一.一}D一葡萄糖基(1—2)一nL一鼠李糖苷分. 中圈分类号:P.2841;R284.2文献标识码:A文章埔号:0513—4870(2000)05—0363—04 银杏科银杏属植物银杏(GinkgobilobaL.)又 名公孙树,为世界上仅有的一科一属一种的特殊植 物,主产于江苏,山东,广西等地.自60年代以来, 国内外学者对其化学成分,药理作用及临床应用作 了大量研究.银杏叶提取物(EBh)及其制剂成为近 代国内外研究开发的热点之一.特别由于EGb对 神经系统的独特作用.可作为中枢神经赋活剂而用 于早老性痴呆(AIzheimerdementia)的防治J.为 了进一步阐明其活性成分,本文对银杏叶提取物进 行了化学成分研究,采用各种色谱技术,从中分得8 个黄酮醇苷类成分,分别鉴定为:槲皮素.3.O.D一 葡糖苷(1),山奈酚3O,13.D葡糖苷(2),芦丁(3), 山奈酚,3,O,B—D.芸香糖苷(4),异鼠李素,3,O,—D. 芸香糖苷(5),槲皮索3,O—D一葡萄糖基(1—2)一L一 鼠李糖苷(6),山奈酚3—0一D一葡萄糖基(1,2)一L一 鼠李糖苷(7),异鼠李素_3_0一D.葡萄糖基(1,2)一 L一鼠李糖苷(8).其中化台物8为新化合物,其苷 元与糖的连接顺序为先鼠李糖后葡萄糖(见下图). 本文报道化合物结构解析工作. R Glc G1e Rutinose RutiBOSe RuLlBose — Rha{2—11一gle — Rha~2一l,一gle — Rha{2—1)一glc 收藉日期:199910邮 '南京市中国药科大学分部G一05#,Tel:(025)5322738 Fax:(025)5301528.E~mai[:ntdchem@cpuedu.曲 化台物8淡黄色粉末,mp169,171?,盐酸. 镁粉反应呈阳性,紫外光下呈淡棕色荧光,UVk娑UH Ilm:357,254为典型的黄酮类化台物的紫外吸收; 红外光谱数据显示有羟基(3415cm_.,宽峰),羰基 (1656cmI1)及苷键(1062cm_.,宽峰).将8酸水 解,通过TLC检查,与对照品对照表明有葡萄糖和 鼠李糖存在,通过TLC检查,与对照品对照以及 UV,HNMR谱与文献2对照表明有异鼠李素存 在.ESI.Ms谱显示其分子量为624.根据元素分析 及"CNMR.DEPT谱推定其分子式为8H32016 "CNMR及DEPT谱显示其有2个甲基(其中1个 为OMe),1个亚甲基,15个叔碳及10个季碳信号; ESI—MS谱中给出分子离子峰m/z623[M,H]及 碎片离子峰315[M,147—162],即失去1个葡萄 糖和1个鼠李糖后的苷元碎片离子峰."CNMR谱 表明8为黄酮醇苷 中8177.4为C-4羰基碳信号, 类化台物;HNMR谱812.57(s)表明含有5-OH,3 10.82(s)表明含有7-OH,另8974(s)还有1个酚 羟基信号,83.84(3H,s)表明含有1个甲氧基,由于 B环无AABB对称峰,故13环可能有两个取代基, 即甲氧基和羟基,与文献报道的异鼠李素,3,0,糖 苷的苷元光谱数据基本相同.在HNMR谱中鼠李 糖基的l—H信号在85.64(d,J=2.0Hz),葡萄糖基 的l—H信号在84.38(d,J:7.1Hz),H_IHCOSY 和TOcsY实验可对糖基的所有氢信号进行归属 (表1).在HMBC谱中,鼠李糖的1.H与苷元C-3 (8133.2)有相关关系,表明苷元的3位与鼠李糖的 1位相连接.从"CNMR谱中可见鼠李糖的C.2信 号(881.7)向低场位移l1.3HJ,在HMBC谱中,鼠 H洲丑州H 药学ActaPharmaceuticaSinica2000.35(5):363366 李糖的2-H(a4.10)与鼠李糖的C一1(a100.7)和葡 萄糖的C一1(6106.0)都相关.说明葡萄糖的1位连 接在鼠李糖的2位上.化合物8与糖基相同的同类 化合物山奈酚一3一O—D一葡萄糖基(1-2)一L一鼠李糖 苷的光谱比较.数据基本相同,进一步证明本文 结构推导的正确性.综上分析,推定化合物8的结 构为异鼠李素一3一O一阻D一葡萄糖基(1—2)一L一鼠李糖 苷[isorhamnetin一3一O一17一D—g[ueosyl(1-2)L—rham— noside]. Tab1CNMRandHNMRassignmentsand'H-Clong-rangecorrelationof 8byHMBCandHMQCinDMSO- 实验部分 熔点用X4型显微熔点测定仪测定,温度未校 正;IR用Impact一410CNicolet)型红外光谱仪测定, MeOH为溶剂;质谱用VGQuattro型质谱仪(ESI. MS)测定.H,"CNMR用BruckerACF一300.400 型核磁共振仪测定,内标为TMS,溶剂为DMsO— d;柱色谱用硅胶为青岛海洋化工厂产品.银杏叶 于1997年11月采自中国药科大学校园内,经中国 药科大学龚祝南博士鉴定. 1提取与分离 取干燥银杏叶10kg,捏碎,用95%EtOH30L 回流提取3次,提取液合并,减压浓缩,与硅藻土 1.0kg拌样后,置索氏提取器中,依次用石油醚, EtOAc和MeOH各3500mL回流提取,EtOAc提 取物经硅胶柱色谱分离,CHCI3一Me()H(9.5:0.5, 5:5)梯度洗脱,各馏分经硅胶柱反复色谱分离,纯 化,得到化合物1(200tag),z(3oomg),3(1.10g), 4(520mg),s(5omg),6(20mg),7(40rag)和8(15 mg). 2鉴定 化合物1淡黄色粉末,mp159,16012,盐酸, 药学ActaPharmaceuticaSinica2000.35(5)363—366 镁粉反应显粉红色,浓硫酸反应显黄色.IR(KBr) ern:3395,1656,1503,1360,1199,1062,1013, 931,804.uVnm:257(4.25),358(4.10). ESI—MSm/z:463[M—H].HNMR(DMSO-d) 8:12.60(5-OH),100(7-OH),9.65(3.OH). 9.14(4一OH),7.61(d,J=2.2,2H),7.58(dd,J= 2.2,9.0,6'-H),6.86(d,J=9.0,5.H),6.41(d,J = 2.0,8?H),6.21(d,J=2.0,6一H),5.47(d,J= 7.4,1"-H),3.10,3.60(m,sugarprotons). CNMR谱数据见表2.其理化性质,波谱数据与文 献报道一致,故鉴定该化合物为槲皮素.3.O.B_D一 葡萄糖:~(quercetin-3一O.B-D—glucoside). Tab2CNMRdataofcompoundsl,7inDMSO-d~ 化台物2淡黄色粉末,mp169,170?,盐酸. 镁粉反应显橙红色,浓硫酸反应显黄绿色.lR (KBr)cm,:3433,1658,1602,1499,1364,1266, 1180,1068,1018,990,846.UVXnm:266 (4.30),350(4.17).ESI.MSIn/z:447[MH]. HNMR(DMSO-d^)8:l2.62(5-OH),10.86(7. OH),10.17(4.OH),8.04(d,J:8.8,2,6.H), 6.89(d,J=8.8,3.5?H),6.45(d,J=1.6,8-H), 6.22(d,J=1.6,6-H),5.46(d,J=7.3,1.H),3.07 , 3.58(m,sugarprotons).CNMR谱数据见表2. 其理化性质,波谱数据与文献41报道一致,故鉴定 该化合物为山奈酚一3一O—BD一葡糖苷(kaempfer.1.3. O—B.D—glucoside). 化台物3淡黄色粉末,mp167,168?,盐酸. 镁粉反应显紫红色,浓硫酸反应显亮黄色.IR (Kgr)cril:3422,1658,1602,1502,1362,1296, 1062,1018,810,804.UVXnm:258(4.27), 357(4.11)ESI.MSm/z:609[M—H].HNMR (DMSo?d6)8:12.60(5-oH),10.82(7-OH),9.65 (3一OH),9.15(4"-OH),7.56(d,J=2.0,2.H), 7.55(dd,J:2.0,9.0,6'-H),6.85(d,J=9.0,5. H),6.39(d,J=1.9,8-H),6.20(d,J=1.9,6-H) 5.35(d,J=7.3,1"-H),4.40(d,J=1.3,1H), 3.73(In,sugarprotons),0.999(3H,d,J= 3.06, 6.2,6"-H).CNMR谱数据见表2.其理化性质, 波谱数据与文献l4报道一致,故鉴定该化合物为芦 丁(rutin). 化台物4黄色粉末,mp171,173?,盐酸.镁 粉反应显粉红色,浓硫酸反应显黄色.IR(KBr) ern:3416,1660,1489,1360,1288,1180,1068, 1012,970,836.uVnm:266(4.33),348 (4.14).ESI—MSIn/z:593[M—H].HNMR (DMSO.出)8:12.57(5-OH),10.89(7一oH),1O.16 (4OH),7.99(d,J=8.8,2,6"-H),6.88(d,J= 8.8,3,5?H),6.42(d,J=1.9,8.H),6.21(d,J= 1.9,6-H),531(d,J=7.3,1"-H),4.37(d,J=1.2, 1一H),3.05,3.70(nl,sugarprotons),0.979(3H, d,J=6.1,6"-H)."CNMR谱数据见表2.其理化 性质,波谱数据与文献l4报道一致,故鉴定该化合 物为山奈酚.3.O.口.D.芸香糖苷(kaempfero1.3一O一8. D.rutinoside) 化台物5淡黄色粉末,mp168,169?,盐酸. 镁粉反应显紫红色,浓硫酸反应显黄色.1R(K&) cm:3420,1659,1602,1503,1361,1290,1064, 1015,820.UVXnm:253(4.25),358(4.03). ESI—MSIn/z:623[M—H].HNMR(DMSO.d6) 8:12.59(5-OH),10.89(7一oH),9.83(4.OH), 7.86(d,J=18,2.H),7.51(dd,J=1.8,8.4,6. H),6.90(d,J=8.4,5.H),6.44(d,J=1.9,8-H), 6.21(d,J=1.9,6-H),5.44(d,J=7.1,1"-H),4.41 (d,J=1.4,1一H),3.83(3'-OMe),3.05,3.78(m, sugarprotons),0.982(3H,d,J:6.1,6?H). "CNMR谱数据见表2.其理化性质与波谱数据与 文献报道一致,故鉴定该化合物为异鼠李素.3.O 药学ActaPharmsceuticaSinJca2000.35(5):363—366 D-芸香糖苷(isorhamnetin-3一O一8_D-I-I1tinoside). 化合物6淡黄色粉末,mp168,16912,盐酸. 镁粉反应显紫红色,浓硫酸反应显黄色.IR(KBr) cm,:3422,1658,1602,1500,1360,1296,1061, 1020,810.uVrim:257(4.26),262(sh, 4.00),302(sh,3.35),350(4.09).ESI—MSm/z: 609【M—HJ.HNMR(DMSO.)8:12.6O(5. OH),10.80(7-OH),9.64(3'-OH),9.15(4一OH), 7.55(d,J=1.6,2'-H),7.54(dd,J=1.6,9.1,6一 H),6.84(d,J=9.1,5一H),6.39(d,J:1.1,8-H), 6.20(d,J=1.1,6-H),5.53(d,J=2.0,I"-H),4.38 (d,J=7.0,1胛_H),4.24(m,2"-H),3.07,383 (m,sugarprotons),0.994(3H,d,J=6.1,6"-H). "CNMR谱数据见表2.其理化性质,渡谱数据与文 献报道一致,故鉴定该化合物为槲皮素一3一O.B—D一 葡萄糖基(1-2)一L.鼠李糖苷[quercetin-3一O.B_D. glucosyl(1-2)一n-.L—rharnnoside]. 化合物7黄色粉末,mp170,17212,盐酸镁 粉反应显粉红色,浓硫酸反应显黄色.IR(KBr) cm:3415,1660,1488,1360,1287,1180,1069, 1010,971,835.uVnm:267(4.29),298(sh, 3.20),346(4.17).ESI—MSm/z:593[M—H]. HNMR(DMSO-)a:12.56(5一OH),10.82(7. OH),10.1O(4'-OH),7.99(d,J=7.0,2,6'-H), 6.88(d,J=7.0,3,5'-H),6.42(d,J=2.0,8-H), 6.21(d,j=2.0,6-H),5.64(d,J=1.3,1"-H),4.38 (d,J=7.3,1H),4.25(m,2"-H),3.O8,3.76 (m,sugarprotons),0.987(3H,d,J=6.2,6"-H). CNMRi~数据见表2.其理化性质,渡谱数据与文 献报道一致,故鉴定该化合物为山奈酚一3.O—B.D一 葡萄糖基(1—2)L一鼠李糖苷[kaempferol一3一O一8_D. glucosyl(1-2).L—rhamnoside1. 化合物8淡黄色粉末,mp170,172?,盐酸一 镁粉反应显紫红色,浓硫酸反应显黄色.ESI—MS m/z:623[M—H].元素分析计算值%:C53.84, H5.17;理论值%:C53.85,H5.16.IR(KBr) un2:3415,1656,1602,1500,1360,1288.1062, 1014,819.u鉴m:254(4.24),357(4.03). HNMR和"CNMR谱数据见表1. 参考文赫 [1JBarsPLL,KatzMM,BermanN.atAplacebo- contrailed..doI1ble-blind.randomizedtriatofanextfa肚of G/nkgobitobafordementia[J].JAmMedAssoc(C}fin Ed),1997,278:1327 [2JValesiAG,RodriguezE,VeldeGV,a/.Methylated flavonolsinLarmacun~i[otia[J]Phytc~hemistry, 1972,11:2821. [3]VicmireC,Berruri~MH,GuthAL,a1.I~olationof flavonMglycosides|tornG/nkgob//obaleaves[J]ptanta Med.1988.54:245 [4jMarkharilKR,TernaiB,StanleyR.etatCarbon-13 NMRsttldiesofflavonoidIIlnaturallyoccurringflavonoid glyoasidesandtheiracylatedderivatives【j]Tetrahedron. 1978.34:1389 [5MarkhamKR,GeigerH,JaggyHKaecnpferol-3?O? glucosyl(1-2)rhamxaos~defromG/~gobildo~anda reappraisalofothergluco(1-2.1—3and1-4)rharanoside struetur~【JJphytochemi~try,1992,3l:1009. [6]HaslerA,GrossGA,MeierB,etat.ComplexflavonoI glycoside~|tomthe]eavesofnkgobiloba[J]Phyto— chemmtry.1992.3l:1391. FLAV0N0LGLYCOSIDESFROMTHELEAVESOFGINKG0BILOBA TANGYu—Ping,WANDYing,LOUFeng—Chang,LIYan-Fang,WANGJing-Hua (ChinaPharmaceuticalUniversity,Nanjing210038,China) ABSTRACT:AIMIs0lationandstructuralelucidatlonoftheconstituentsfrom1eavesofnkg obiloba. METHODS,r0isolatechemic~constituents.solventextractiontogetherwithcolumnchrom atographywas used.IR,UV,MSandNMRspectrawereemployedforstructuralidentification.RESULI'SEi ghtflavonol glycosideswereisolated.Theywereelucidatedasquercetin-3.O-口?D—glucoside(1),kaempfeml一3.O一口一D— glucoside(2),rutin(3),kaempferoI一3一O—D—rutinoside(4),isorhamnetin-3—0-D—rutino~ide(5),quercetin一 3-0一D—glucosyI(1-2)-a-L—rhamnoside(6),kaempfero1.3-O.D—giucosyI(1-2)-a-L-rhamnoside(7)and isorhamnetin-3一O-D—glucosyI(1-2)一L-rhamno~ide(8).CONCLUSIONCompound8wasshowntobea newcompound. KEYWORDS:Ginkgobiloba;ftavonoIglycosides;i'sorhamnetin-3一O-B—D-glucosyl(1-2)L—rhamno~ids