氨基酸在纸层析中的分离

氨基酸在纸层析中的分离氨基酸在纸层析中的分离 Seperation of a mino acids by pa per chromatogra phy ( )Fu Liming , Zhang Aiping , Wen Baozhen Chem ical depert ment , S han x i medical U ni versi t y , T ai y u an 030001 Abstract The ratio of unfold solvent was extensively selected . The co n...

氨基酸在纸层析中的分离 Seperation of a mino acids by pa per chromatogra phy ( )Fu Liming , Zhang Aiping , Wen Baozhen Chem ical depert ment , S han x i medical U ni versi t y , T ai y u an 030001 Abstract The ratio of unfold solvent was extensively selected . The co nclusio n is 4?1 ?5 . The mixt ure of lysine ,p henglalanice andp roline has been separated and identified in t his co nditio n ,A good result has been obtained. Key words chormatograp hy ,paper ; unfold solvent ; amino acids ; shif t value 纸层析是一种微量混合物的快速分离技术 ,是2 操作以层析纸上吸附的的水为固定相 ,沿纸条上行的有 1998 - 04 - 05,1998 - 04 - 15 进行实验操作 () 机溶剂叫做展开剂为流动相 ,当流动相沿纸条上如下。行时 ,纸条上的试样斑点也逐渐向上移动 ,于是试样 2 . 1 点样 , 取一条用展开剂蒸气饱和过的层析纸() ( ) 与固定相水和流动相有机溶剂不断接触 ,由于 () 约 16 cm ×3 cm置于一张洁净的白纸上 ,在纸条试样中各组分在两相间的分配系数不同 ,因此各组下端约 2,3 cm 处 , 用铅笔画一横线 , 并在横线上分随展开剂移动的速度也不同。作出两个点样位置记号 1 、2 ,如图然后分别将 1 号、溶质在层析纸上移动的速度或用比移值R f () 2 号样品点在 1 、2 处。点样中心到图谱重心的距离 AR = f () B展开剂移动的距离点样时 ,用吸有少量样品的毛细管轻轻地和层 R 值与化合物结构、纸的质量、温度、展开剂等 f 析纸接触一下 , 使样品的斑点直径在 2 ,3 cm 之因素有关 , 若滤纸、温度、展开剂等实验条件相同 , 间 ,待样点风干后 ,再复点一次。 R 值应是化合物的特性常数。但由于影响 R 值f f 2 . 2 展开待样品斑点风干后 ,用铅笔在纸条上方的因素较多难以准确测定 ,故一般采取在相同实验捅一小孔 ,挂在层析桶盖的钩上 ,然后把它垂直地放条件下用标准试样作对比实验来进行化合物的鉴入盛有展开剂的层析桶内 ,并使层析纸下端边缘浸定 ,即把未知混合物试样和已知的标准试样点加到入展开剂液面下约 1 cm 处 , 注意样品斑点必须在同一条层析纸上 ,苯丙氨酸和脯氨酸的混合物 ,同时展开 ,对混合物中各组分进行鉴定。要分离的氨基展开剂液面之上 ,切勿浸入展开剂中。将层析桶盖酸是赖氨酸、苯丙氨酸和脯氨酸的混合物。盖好 ,观察展开剂借层析纸的毛细作用 ,而向上移动 1 ,2 的情况 ,当展开剂从点样中心起上升 6 ,7 cm 时 , 1 展开剂的配比选择取出层析纸 ,用铅笔画出溶剂前沿位置。我们进行了大量的实验 ,结果如表 1 所示。最佳选择为 4?1?5 。 2 . 3 显示图谱用喷雾器在滤纸上均匀地喷上水合茚三酮试剂 ,再将层析纸置 105,110 ?的烘箱中 () 展开剂的配比选择体积比表 1 烘干 ,直至出现有色图谱为止 ,并用铅笔色画出图谱( ) () 溶剂/ 溶剂上升高度体积 ml/ 高度 cm 形状 ,并记下斑点颜色及颜色深浅 ,颜色愈深 ,说明正丁醇3 4 4 4 4 4 5 该组分浓度愈大。冰醋酸 2 1 2 1 1 2 2 水 3 2 3 4 5 4 4 用米尺依次测出点样中心到图谱重2 . 4 计算 R 30 min 溶剂前 f5 . 8 6 . 2 6 . 3 6 . 8 7 6 . 7 6 . 5 ()沿上升高度 cm () () 心的距离 A,点样中心到溶剂前沿的距离 B。 ( ) 上接第 384 页合。显色剂 011 % 水合茚三酮的丙酮溶液。 ()样品在图谱显示后颜色的 R8 次测定结果表 2f () 2三种氨基酸与水合茚三酮反应呈现的颜色赖氨酸呈蓝紫实验数据色 ,脯氨酸显黄色 ,苯丙氨酸紫蓝色。样品号点颜色样品组分() 3采用的是悬挂式纸层析法 ,展开方式为上行法。 A B R f 3 结果 2 . 83 6 . 10 0 . 46 紫蓝色苯丙氨酸号1 紫蓝色苯丙氨酸根据我们选择的展开剂的配比 ,使三种氨基酸2 . 83 6 . 10 0 . 46 黄色脯氨酸 1 . 50 6 . 10 0 . 25 在纸层析中得到了很好的分离 ,为实验奠定了基础。2 号蓝紫色赖氨酸 0 . 55 6 . 10 0 . 09 参考文献 ( ) 林文样. 岩矿测试纸色谱. 中国无机分析化学文摘 ,1986 , 5 2: 1 94,97 附注( ) 龙海燕 ,袁承业. 有机磷化合物的研究 ; ??,酸性磷膦酸脂的硅 () 1试剂的配制方法 2 ?号样品 : 2 %苯丙氨酸水溶液 ; ?号胶纸色谱分离. 有机化学 , 1985 , 4 : 322,325 样品 :氨基酸混合物溶液 , 将赖氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸各 012 g 溶于 100 ml 蒸馏水中。展开剂用正丁醇、冰醋酸和水按体积比为 4 ?1 ?5 混 1998 - 05 - 20 收稿]

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