蛋白质脂肪测定
奈氏试剂的配制:
将10g碘化汞和7g碘化钾溶于10ml水中,另将24.4g氢氧化钾溶于内有70ml水的100ml容量瓶中,并冷却至室温。将上述碘化汞和碘化钾溶液慢慢注入容量瓶中,边加边摇动。加水至刻度,摇匀,放置2天后使用。试剂应保存在棕色玻璃瓶中,置暗处。
[7]蛋白质含量测定
?、消化
2.0g~小心移入干燥洁净的500ml凯氏烧瓶中~然后加入研细的硫准确称取样品0.2,
酸铜0.5g~硫酸钾10g和浓硫酸20ml~轻轻摇匀后~按消化装置~将凯氏烧瓶以45?角斜支于有小孔的石棉网上。小火加热~待内容物全部炭化~泡沫停止产生后~加大火力~保持瓶内液体微沸~至液体变蓝绿色透明后~再继续加热30分钟。冷却~小心加入200ml蒸馏水~再放冷~加入玻璃珠数粒以防暴沸。
?、蒸馏
将凯氏烧瓶连接在已准备好的蒸馏装置上~塞紧瓶口~冷凝管下端插入接受瓶液面下~接受瓶内盛50ml2%硼酸溶液及混合指示剂,5份0.2%溴甲酚绿乙醇溶液与1份0.2%甲基红乙醇溶液混合,2,3滴~放松夹子~通过漏斗倒入70,80ml 40%氢氧化钠溶液~并摇动凯氏烧瓶~至瓶内溶液变为深蓝色~或产生黑色沉淀~再加入100ml水~夹紧夹子~加热蒸馏~至氨全部蒸出,蒸馏液约250ml即可,~将冷凝管下端取出液面~用蒸馏水冲洗管口~继续蒸馏1分钟~用
表
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面皿接几滴馏液~以奈氏试剂检查~如无红棕色物产生~表示蒸馏完毕~即可停止加热。
?、滴定
-1用0.1000 mol〃l盐酸
标准
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溶液滴定上述吸收液~至溶液由蓝色变为微红色即为终点~记录盐酸的用量Vml~同时做空白实验~测得空白实验消耗盐酸标准溶液的体积Vml。 1 2
?、结果处理
方法
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脂肪的测定
?、精确称取在100,105?烘干2,3h的粉末样品5,10g~放滤纸上~小心折叠成滤纸包~将滤纸包放在索氏提取器的提取筒内~把提取筒与已知重量的干燥脂肪烧瓶连接。
?、由提取器冷凝管上端加入乙醚~至接受器内的乙醚量为瓶的2/3体积。于水浴上加热~使乙醚不断的回流提取~一般抽提6,12h,如果乙醚挥发太多~不够回流时~可以自冷凝管上端补充乙醚,。
?、控制每半小时虹吸5,6次。提取结束后取下接受器~回收乙醚~至接受器内乙醚仅乘1,2ml时~在水浴上蒸干~再于100,105?干燥2h~取出放干燥器内冷却30分钟称重。
?、结果处理方法
mm,10,100m脂肪,%,=