同源四倍体水稻花粉的发育特征

同源四倍体水稻花粉的发育特征 ,同源四倍体水稻花粉的发育特征,代西梅 黄群策,,, 李国平 秦广雍,(郑州大学离子束生物工程省重点实验室，河南郑州,,,,,,;,,,通讯联系人，,,,,,,:？?酰睿悖澹瑁酰幔睿纾溃酰澹洌酰悖睿罚模澹觯澹欤铮穑恚澹睿簦幔欤茫瑁幔颍幔悖簦澹颍螅铮妫粒酰簦铮簦澹簦颍幔穑欤铮椋洌遥椋悖澹校铮欤欤澹睿罚模罚粒桑罚兀椋恚澹椋龋罚眨粒危牵罚眩酰睿悖澹罚罚蹋罚桑罚牵酰铮穑椋睿纾眩罚桑危罚牵酰幔睿纾铮睿纾罚ǎ龋澹睿幔睿校颍铮觯椋睿悖椋幔欤耍澹蹋幔猓铮颍幔簦铮颍铮妫桑铮睿拢澹幔恚拢椋铮澹睿纾椋睿澹澹颍椋睿纾冢瑁澹睿纾瑁铮酰眨睿椋觯澹颍螅椋簦冢瑁澹睿纾瑁铮酰矗担埃埃担玻茫瑁椋睿幔唬罚罚茫铮颍颍澹螅穑铮睿洌椋睿纾幔酰簦瑁铮颍牛恚幔椋欤海瘢酰睿悖澹瑁酰幔睿纾溃酰澹洌酰悖睿罚粒猓螅簦颍幔悖簦海裕瑁澹洌澹觯澹欤铮穑恚澹睿簦幔欤悖瑁幔颍幔悖簦澹颍螅幔睿洌幔猓铮颍簦椋觯澹螅簦幔纾澹螅铮妫穑铮欤欤澹睿椋睿幔酰簦铮簦澹簦颍幔穑欤铮椋洌颍椋悖澹冢椋辏椋睿纾矗鳎澹颍澹铮猓螅澹颍觯澹洌酰螅椋睿纾罚幔欤幔螅澹颍螅悖幔睿睿椋睿纾悖铮睿妫铮悖幔欤恚椋悖颍铮螅悖铮穑澹裕瑁澹穑澹颍悖澹睿簦幔纾澹铮妫睿铮颍恚幔欤穑铮欤欤澹睿鳎幔螅铮睿欤矗担担ィ幔睿洌簦瑁澹簦铮簦幔欤妫颍澹瘢酰澹睿悖铮妫穑铮欤欤澹睿罚幔猓铮颍簦澹洌洌酰颍椋睿纾洌澹觯澹欤铮穑恚澹睿簦幔欤穑颍铮悖澹螅螅鳎幔螅担矗担ィ樱铮恚澹幔猓睿铮颍恚幔欤洌椋觯椋螅椋铮睿瑁幔洌猓澹澹睿铮猓螅澹颍觯澹洌幔簦恚椋悖颍铮螅穑铮颍澹恚铮簦瑁澹颍悖澹欤欤罚恚澹椋铮螅椋螅螅簦幔纾澹澹纾悖瑁颍铮恚铮螅铮恚澹穑幔椋颍椋睿纾幔猓睿铮颍恚幔欤欤幔猓澹颍颍幔睿簦洌幔洌妫铮颍恚幔簦椋铮睿幔睿洌幔螅睿悖瑁颍铮睿铮酰螅洌幔洌洌椋觯椋螅椋铮睿停铮螅簦穑铮欤欤澹睿罚幔猓铮颍簦椋铮睿铮悖悖酰颍颍澹洌幔簦恚铮睿铮睿酰悖欤澹幔颍穑铮欤欤澹睿螅簦幔纾澹幔睿洌欤幔簦澹猓椋睿酰悖欤澹幔颍穑铮欤欤澹睿螅簦幔纾澹裕穑椋悖幔欤螅穑瑁澹颍椋悖幔欤幔睿洌螅簦幔椋睿澹洌幔猓铮颍簦椋觯澹颍幔簦澹螅鳎澹颍澹玻保矗ィ担埃ィ幔睿洌玻福保ィ颍澹螅穑澹悖簦椋觯澹欤裕瑁澹穑铮欤欤澹睿幔猓铮颍簦椋铮睿恚椋纾瑁簦猓澹幔簦簦颍椋猓酰簦澹洌簦铮幔猓睿铮颍恚幔欤洌椋觯椋螅椋铮睿鳎瑁椋悖瑁颍澹螅酰欤簦澹洌妫颍铮恚簦瑁澹幔猓睿铮颍恚幔欤穑幔椋颍椋睿纾铮妫洌铮酰猓欤澹洌悖瑁颍铮恚铮螅铮恚澹螅罚耍澹鳎铮颍洌螅海幔酰簦铮簦澹簦颍幔穑欤铮椋洌颍椋悖澹唬洌澹觯澹欤铮穑恚澹睿簦幔欤猓椋铮欤铮纾唬悖簦铮欤铮纾唬穑铮欤欤澹睿唬幔猓铮颍簦椋铮睿氛豪眉す馍韫簿劢瓜晕?际豕鄄炝送此谋短逅咀暇矗鄣姆?碳捌浒苡逼诤头绞健,诔墒旎ǚ壑姓;ǚ壑徽迹矗担担ィ褂校担矗担サ幕ǚ墼诜?讨蟹?苡,谛?咦幽赶赴跏至压讨谐鱿至艘恍?斐,废窒螅缛旧宀荒苷,涠浴?纬梢斐,痔寮岸痔宸至巡煌降认窒蟆,蟛糠只ǚ郯苡?name=baidusnap0>单核小孢子期和二胞花粉晚期。在败育花粉中典败花粉粒占,,(,,，圆败花粉粒占,(,,，染败花粉粒占,,(,,。导致紫粳,,,花粉败育的原因可能是由于其染色体数目加倍，在减数分裂过程中有些染色体不能正常配对，从而进行异常分裂造成的。,关键词:同源四倍体水稻;发育生物学;细胞学;花粉;败育,中图分类号:,,,,(,;,,,,;,,,,(,,,文献标识码:,,文章编号:,,,,,,,,,(,,,,),,,,,,,,, ,,,, 从物种进化和新物种形成及禾本科植物的演化历程来看，染色体组多倍化有助于增强新物种的适应性和提高产量潜力。由于同源四倍体水稻增大了水稻基因组，提高了倍性水平，不仅可大大提高它的基因容量，而且将大大丰富它的遗传变异范围，增加优良基因组合的几率，增加对不良环境影响的适应性,〔,〕,。同时，它将有可能兼具多倍体的优势和基因组间相互作用的优势，从而大幅度提高(即增产,,,)甚至成倍增长水稻产量，获得集优质、高产、多抗于一体的水稻新品种,〔,,,〕,。由于同源四倍体水稻的生殖特性比较特殊，它在水稻远缘杂交中具有一定的意义。以同源四倍体水稻为桥梁，通过远缘杂交有可能将野生物种中的强再生性和强宿根能力引入栽培稻中，进而可望创造出再生能力和宿根能力特强的新种质,〔,〕,。,,世纪,,年代建立的激光扫描共聚焦显微技术在研究生物体的微观结构组成和发育方面具有特殊的生物学意义,〔,,,〕,。激光扫描共聚焦显微镜的应用将为花粉结构、形成及发育过程等方面的研究提供全新的视野。目前，尚未见到对同源四倍体水稻花粉形成发育过程的研究报道。本研究利用激光扫描共聚焦显微镜对紫粳四倍体水稻花粉的形成发育过程及其败育的时期和方式作了较为系统的观察，为在育种上正确利用同源四倍体水稻新种质提供理论依据。,, 材料与方法,,(, 试验材料,试验中所采用的材料是同源四倍体水稻品系紫粳,,,和相应的二倍体水稻品系紫粳,,,。紫粳,,,是以紫粳,,,为材料，用秋水仙素对其种芽进行诱导，在诱导后代中筛选到的主要农艺性状稳定的同源四倍体品系。,,(, 试验方法,,,,,年将试验材料紫粳,,,和紫粳,,,种植于河南省新乡市农业科学研究院水稻研究所的试验田,收稿日期:,,,,,,,,,,;修改稿收到日期:,,,,,,,,,,。,基金项目:国家,,, 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 资助项目(,,,,,,,,,,,);国家十五科技攻关项目(,,,,,,,,,,)。,第一作者简介:代西梅(,,,,,)，女，讲师，博士研究生。,,,,,中国水稻科学(,,,,,,,,,,;,,;,)，,,,,，,,(,):,,,,,,,,,,,,:,,,,,(,,;,,;,,,;,(,,,,,,,内，采用常规管理。在水稻花粉发育的各个时期取穗中部小穗固定于,,,固定液(,,,酒精、冰醋酸、甲醛的体积比为,,?,?,，另外，加入,,的甘油以防止蒸发及材料变硬，增进保存性能)中，每个时期约取小穗,,,个。观察前用,,,的酒精冲洗，然后在解剖镜下挑出花药，保存于,,,酒精中备用。,染色前，捣碎花药，挤出花粉，然后经,,,、,,,、,,,乙醇至蒸馏水处理，每次,,,,,。,,曙,红,衬染,,左右，加入蒸馏水冲洗，换液数次至无,浮色。柠檬酸,磷酸氢二钠缓冲液(,(,,,,,,，,,,(,)预处理,,左右，,,μ,,,,,,,,,,(,,,;,,,,,,,,,)染色,,,(,,?，黑暗)。用水洗,,,次，乙醇梯度(,,,、,,,、,,,、,,,、,,,、,,,)脱水，每级,,,,,，随后将花粉放入无水乙醇中脱水两次，每次的脱水时间为,,，接着，再转入无水乙醇中过夜。第,天将已经脱水的花粉放入由无水乙醇和水杨酸甲酯(体积比为,?,)组成的混合液中过渡,,，再用水杨酸甲酯透明处理,次，在前两次透明处理时，每次,,，最后一次透明的时间为,,,，所有的试验材料经过水杨酸甲酯透明处理后可以在水杨酸甲酯中保存备用。吸出一定量的处理好的花粉，加盖玻片。将制备好的载玻片倒置于,,,;,,,,激光共聚焦扫描显微镜上，用,,,,,波长的激 光激发，扫描获得清晰的花粉各个时期的图片。,, 结果与分析,,(, 紫粳,,,花粉粒的形成发育过程,紫粳,,,花粉粒形成过程与紫粳,,,花粉粒形成过程基本相似，紫粳,,,花粉发育基本正常，很少见败育花粉。紫粳,,,在花粉形成发育过程中，有一部分不能形成正常花粉粒而发生败育现象。为便于描述，对紫粳,,,正常花粉粒的发育过程按冯九焕等,〔,〕,提出的水稻花粉发育过程分期进行描述。,,(,(, 小孢子母细胞形成期,紫粳,,,小孢子母细胞(如图,,,所示)为类圆形，其体积比花药中其余细胞都大，尤其细胞核特大，细胞质浓厚。小孢子母细胞的细胞壁为薄薄的一层，染色也很浅，这与单核期以后的较厚且染色较深的细胞壁差别较大。紫粳,,,小孢子母细胞及细胞核的体积要比紫粳,,,的大，此后在发育的各个时期紫粳,,,的花粉粒均比紫粳,,,要大，紫粳,,,成熟花粉粒平均要比紫粳,,,的成熟花粉粒大约,(,,×,,,,,μ,,,,。,,(,(, 小孢子母细胞减数分裂期,小孢子母细胞刚形成时，体积较小，形状为类圆形，随着小孢子母细胞体积的增大，其形状也由圆形慢慢变成椭圆形。当小孢子母细胞中营养物质积累达到一定程度时，就开始进行减数分裂。在实验过程中观察到了减数分裂中两次分裂的各个时期，下面主要对其细胞形态及染色体的状态进行描述。,前期，:细线期小孢子母细胞核和核仁体积明显增大，染色较深，在透明的核液中出现细长的染色质丝，染色体开始显现丝状，互相交错布满于整个核中，胞质较浓(图,,,)。偶线期小孢子母细胞两条同源染色体配对，呈极化状态，即在染色体靠核膜的一端集中成束，另一端散成花朵状(图,,,)。在粗线期，小孢子母细胞染色体逐渐缩短变粗，每个同源染色体纵裂为,个单体，由于着丝点联系未分开，此时每一个同源染色体有,个染色单体，又称为双价染色体(图,,,)。双线期小孢子母细胞的染色体进一步缩短变粗，配对的同源染色体在部分区域分开，部分区域联合交错互换，整个双价染色体呈现多种交错形状(图,,,)。在终变期，小孢子母细胞的染色体极端缩短，在水稻中缩短成颗粒状，并且常常成对排列在核的内膜周围，此时计算染色体的数目最为清晰(图,,,)。终变期末期，纺锤丝出现，核仁、核膜消失，减数分裂前期，结束。,中期，:纺锤体出现，双价染色体排列在赤道板上，每对同源染色体中两个成员的着丝点向着相对的两极。在激光扫描共聚焦显微镜下能清晰地看到染色较浅的纺锤体及染色较深整齐排列在赤道板位置上的染色体(图,,,)。,后期，:每对同源染色体在着丝点分开，向两极移动，但每个染色体仍包含已经纵列而未分开的,个染色单体(图,,,)。,末期，:染色体到达纺锤体的两极，浓缩成团，核膜、核仁重新出现并形成,个子核，染色体的数目比原来花粉母细胞减半，其后纺锤体的赤道板上产生成膜体并形成新壁。将细胞分成,个子细胞，暂不分离，形成二分体(图,,,，,,)。在此期，紫粳,,,二分体中，每个细胞仍有,,条染色体，而紫粳,,,二分体中，每个细胞内只有,,条染色体。,减数分裂?变化过程和一般有丝分裂相似，正常情况下，两个细胞分裂同步。在减数分裂中期?(图,,,)，紫粳,,,分裂出现不同步现象。末期?结束时，由原来,个小孢子母细胞经过两次分裂形成,个子细胞，暂时连在一起形成四分体(图,,,,)。,,,,,中国水稻科学(,,,,,,,,,,;,,;,) 第,,卷第,期(,,,,年,月),,,,四分体的出现，减数分裂过程就此告终。,,(,(, 小孢子时期,四分体中的子细胞进一步发育充实成为圆形的花粉，花粉壁周围的胼 胝质溶解后，每个细胞彼此分开，即进入小孢子早期(图,,,,)。早期小孢子呈现圆球形，细胞较小，小孢子壁仍然很薄，无液泡，细胞核较大，位于细胞中央。在小孢子中期，小孢子增大，壁显著加厚，并出现萌发孔。液泡增多，但尚未形成中央大液泡(图,,,,)。经固定的小孢子外形多不规则。至小孢子晚期，中央大液泡形成，小孢子核大多移至萌发孔对侧，核的体积增大，小孢子壁增厚(图,,,,，,,)。也即单核靠边期。,,(,(, 二胞花粉期,二胞花粉早期，小孢子核第一次有丝分裂，形成两个细胞核，即较大的营养核和梭形的生殖细胞核。此期在细胞内还没有淀粉粒的积累(图,,,,)。二胞花粉晚期，花粉内开始出现淀粉粒，淀粉粒在细胞质中不断积累，液泡体积逐渐缩小，并被推至萌发孔对侧。生殖细胞逐渐与花粉壁脱离，移至营养核附近(图,,,,)。,,(,(, 成熟花粉期,当细胞内完全充满淀粉等贮藏物质时，花粉粒为圆球形，生殖细胞进行第二次分裂，形成两个精细胞(图,,,,)。由于花粉内充满了淀粉粒，其内的,个核不容易被观察到，至此，紫粳,,,花粉的发育过程完成。,,(, 紫粳,,,花粉的败育过程,紫粳,,,在小孢子母细胞减数分裂时，出现了各种不正常分裂的情况，这可能是导致后期花粉败育的主要原因。在成熟花粉中，约有,,(,,的花粉在发育过程中发生败育，败育主要发生在单核花粉期、二胞花粉晚期或三胞花粉早期。,,(,(, 花粉母细胞减数分裂异常情况,在小孢子母细胞减数分裂期，出现了以下几种不正常分裂现象:染色体不能正常配对，在分裂中期形成了三极纺缍体(图,,,);形成异常的二分体(图,,,);在第二次减数分裂中期出现了分裂不同步现象，在二分体中，,个子细胞处于分裂中期，而另一个子细胞此时已进入分裂后期(图,,,);形成异常的四分体，即形成的四个子细胞不能正常分开，而是连在一起，中间有不完全细胞板将它们分隔开来(图,,,)。这些在减数分裂中出现的异常分裂现象，可能是最终导致紫粳,,,花粉在后期发生败育的主要原因。,,(,(, 单核小孢子期败育(典败),紫粳,,,花粉大量败育是从单核小孢子期开始的，其败育的情况也是多样的:有的败育花粉的细胞质浓缩，花粉壁出现皱折变形，隐约可见细胞核(图,,,上);有的细胞质破碎为块状;有的花粉内含物完全消失成空泡状(图,,,下);有的细胞变形呈弯月型，细胞核仍清晰可见(图,,,下)。此期败育花粉占观察总花粉数的,,(,,。,,(,(, 二胞花粉早期败育(圆败),二胞花粉的败育是从生殖核的解体开始的，出现很多的染色质团块，接着营养核也开始解体，也出现染色质团块，由生殖核和营养核所产生的染色质团块聚集在一起，在花粉中形成巨大的染色质团块，核物质染料,,,,,,染色较深(图,,,)。随后花粉中的这些染色质团块逐渐消失，伴随着细胞核和细胞质也发生解体，最后在花粉粒中变成无内含物或仅余下残迹的空壳花粉(图,,,，,)。此期败育花粉占观察总花粉数的,(,,。,,(,(, 二胞花粉晚期或三胞花粉早期败育(染败),一般认为染败型花粉主要在花粉的三胞期败育,〔,,〕,。但冯九焕等,〔,〕,认为染败发生在二胞花粉晚期而不是三胞期。此时花粉内有淀粉积累但尚未完全充满，生殖细胞还未分裂，反而逐渐解体和消失。此时隐约可见营养核(图,,,,)，内含物未见明显浓集。但作者在观察成熟花粉中发现了一个处于三核期的败育花粉，三个核明显可辨，只是细胞内含物较少，细胞外形皱缩(图,,,,)。因此，作者根据对染败花粉的描述及镜检观察，认为染败是二胞花粉晚期或三胞花粉早期败 育的花粉。此时的花粉粒内有淀粉粒的积累但未完全充满，生殖细胞核还未分裂或刚刚分裂。花粉“完熟”将要开花时，细胞内有一定的淀粉粒积累，细胞内含物浓集，但细胞染色不均一，一般都有一个区域不能染色，而成为空洞(图,,,,)。此期败育花粉占观察总花粉数的,,(,,。,, 讨论,同源四倍体水稻比二倍体水稻营养价值更高，蛋白质与氨基酸含量显著增加,〔,,,,,〕,，直链淀粉含量减少，适口性更好,〔,,〕,。一般其抗逆性也比二倍体水,稻强，增产潜力较大。同源四倍体水稻从,,世纪,,年代就开始研究，也积累了不少的多倍体水稻材料，但同源四倍体材料目前还很少在生产中应用，一个重要的原因就是其有性生殖能力下降，结实率急剧下降。这与其花粉在发育过程中的败育程度密切,,,,,中国水稻科学(,,,,,,,,,,;,,;,) 第,,卷第,期(,,,,年,月),,,,相关。黄群策等,〔,,〕,研究发现同源四倍体水稻,,，,,(,),、，,,,,(,),的正常花粉粒只有,,(,,,,,,(,,,，其余均为败育花粉。本研究对同源四倍体水稻紫粳,,,花粉发育过程的败育现象作了较为系统的研究，发现紫粳,,,大部分败育发生在单胞花粉期、二胞花粉晚期及三胞花粉早期。单胞花粉期败育(典败)的花粉因细胞壁不太发达而大多为不规则型，甚至解体为碎片。二胞花粉晚期及三胞花粉早期败育(染败)的花粉粒内有一定的淀粉粒积累但未完全充满，生殖细胞还未分裂或刚刚分裂，细胞内含物浓集，但细胞染色不均一，一般都有一个区域不能染色。以这两种败育方式败育的花粉占败育总花粉的,,(,,。由此可见，对于同源四倍体水稻紫粳,,,来说，花粉发育过程中的败育现象是导致其结实率低下(不到,,,)的主要原因。,在研究水稻花粉败育的机制中，不少学者在研究中发现花粉败育过程与绒毡层的异常现象有关,〔,,,,,〕,。绒毡层细胞的异常变化，可使小孢子在发育过程中所需要的大量营养物质供应过程遭到破坏，从而导致花粉的败育。也有研究表明，水稻花粉的败育与其内微管异常分布有关,〔,,,,,〕,。王恒明等,〔,,〕,研究认为水稻花粉败育与膜脂过氧化的荧光产物类脂褐素的积累有关。李桂兰等,〔,,〕,对川谷×薏苡,,,,减数分裂异常及花粉败育的研究中发现川谷和薏苡杂交,,,,花粉母细胞减数分裂中存在多种异常现象，使形成的小孢子含有不正常的染色体数，导致杂种,,,,花粉的高度败育。康向阳等,〔,,〕,对毛白杨花粉败育机制的研究中也发现在减数分裂中有数目不等的联合程度较差的单价体以及落后染色体出现，这种与异质性相关的染色体行为异常，导致同源染色体向子细胞的不均衡分配，造成具功能染色体的缺失，从而引起毛白杨一定比率的败育花粉的产生。作者在观察紫粳,,,花粉的发育过程中，观察到小孢子母细胞在减数分裂期出现了一些异常分裂情况(染色体不能正常配对，形成异常二分体及四分体，二分体分裂不同步)，由此认为，导致紫粳,,,花粉败育的原因可能是由于其染色体数目加倍，在减数分裂过程中有些染色体不能正常配对，从而导致异常分裂。同源四倍体水稻花粉的败育是一个相?备丛拥墓蹋墼诟鞲鍪逼诎苡南赴砘褂写诮徊窖芯俊,贰 ?淮牵褐,荽笱Ю胱邮锕こ讨氐闶笛槭业幕粼,皆菏慷员狙芯刻峁?舜罅χС郑畋砀行唬。凡慰嘉南祝海贰玻薄沉悍锷剑抟洌啾短寮捌湓谂?瞪械挠τ茫馀?В罚恿缸魑铮保梗梗梗梗ǎ玻海玻埃玻常贰玻病郴迫翰撸毓阌海胱邮锛际醺牧纪此谋短逅镜纳柘耄,荽笱аПǎ豪硌О妫玻埃埃常常担ǎ矗海常保常叮 贰玻场郴迫翰撸蛎桑飧,郑此谋短逅镜挠盏技际跹芯浚吓?悼蒲 保梗梗罚ǎ常海保罚保福贰玻础郴迫翰撸锩吩似粼疲啾短逅炯捌淝痹诩壑担咏凰荆玻埃埃保保叮ǎ保海保常贰玻怠常樱瑁铮簦簦铮睿模祝瑁椋簦澹危茫铮睿妫铮悖幔欤螅悖幔睿睿椋睿纾恚椋悖颍铮螅悖铮穑海簦瑁颍澹澹罚洌椋恚澹睿螅椋铮睿幔欤猓椋铮欤铮纾椋悖幔欤椋恚幔纾椋睿纾罚裕颍澹睿洌螅拢椋铮悖瑁澹恚樱悖椋罚保梗福梗保矗罚ǎ保保海矗常担贰玻丁常拢欤幔睿悖幔妫欤铮颍牛拢牵椋欤颍铮樱校欤幔睿簦悖澹欤欤猓椋铮欤铮纾椋睿簦瑁澹睿澹鳎恚椋欤欤澹睿睿椋酰恚海睿澹鳎簦铮铮欤螅幔睿洌睿澹鳎椋睿螅椋纾瑁簦螅罚粒恚剩拢铮簦罚玻埃埃埃福罚ǎ保保海保担矗罚保担叮埃贰玻贰常牛穑欤澹颍校耍牵酰睿睿椋睿纾拢牛樱茫铮睿妫铮悖幔欤妫欤酰铮颍澹螅悖澹睿悖澹恚椋悖颍铮螅悖铮穑铮妫穑欤幔睿簦悖澹欤欤螅罚校颍铮簦铮穑欤幔螅恚幔罚保梗梗福玻埃保海保玻保保担罚贰玻浮常祝恚澹颍茫蹋,,,,,,，,,,,,,;,,，,,,,(,,,,,;,,,,;,,,,;,,,,,,,,,,;,,,,(,,,,,,,,,,,,，,,,,,，,,,:,,,,,,,(,〔,〕冯九焕，卢永根，刘向东，等(水稻花粉发育过程及其分期(中国水稻科学，,,,,，,,(,):,,,,,(,〔,,〕朱英国(水稻雄性不育生物学(武汉:武汉大学出版社，,,,,(,〔,,〕宋文昌，张玉华(水稻四倍化及其对农艺性状和营养成分的影响(作物学报，,,,,，,,(,):,,,,,,,(,〔,,〕秦瑞珍，宋文昌，郭秀平，等(同源四倍体水稻花药培养在育种中的应用(中国农业科学，,,,,，,,(,):,,,,(,〔,,〕黄春梅，黄群策，李志真(同源四倍体水稻雌雄配子体的多态,性(福建农业大学学报，,,,,，,,(,):,,,,,(,〔,,〕孙 俊，朱英国(湖北光敏感核不育水稻发育过程中花粉及花药壁超微结构的研究(作物学报，,,,,，,,(,):,,,,,,,(,〔,,〕关和新，朱英国(光敏核不育水稻花药,,,,,,定位研究(中国农业科学，,,,,，,,(,):,,,,,,,,,(,〔,,〕彭海峰，陆燕鹏，陈雄辉，等(短光低温不育水稻宜,,花粉败育的细胞学观察(杂交水稻，,,,,，,,(,):,,,,,(,〔,,〕徐是雄，刘向东，冯九焕，等(水稻，,,,及光温敏核雄性不育系培矮,,,小孢子母细胞减数分裂期间微管骨架的变化(植物学报，,,,,，,,(,):,,,,,,,(,〔,,〕叶秀麟，杨子德，徐是雄，等(水稻雄性不育系珍汕,,,小孢,子发育过程中的微管骨架(植物学报，,,,,，,,(,):,,,,,,,(,〔,,〕王恒明，梁承邺，林植芳，等(水稻雄性不育与花药中类脂褐素的积累(热带亚热带植物学报，,,,,，,(,):,,,,,(,〔,,〕李桂兰，乔亚科，孟宪东，等(川谷×薏苡,,,,减数分裂异常及,花粉败育的研究(河北农业技术师范学院学报，,,,,，,(,):,,,,,(,〔,,〕康向阳(毛白杨花粉败育机制的研究(林业科学，,,,,，,,(,):,,,,,(,,,,,中国水稻科学(,,,,,,,,,,;,,;,) 第,,卷第,期(,,,,年,月).