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交叉配血交叉配血(凝聚胺法)操作规程 1. 原理 凝聚胺(polymatching)法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,促进血清(浆)中的抗体与红细胞相应抗原结合,再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液,中和红细胞表面的负电荷,缩短细胞间距,形成可逆的非特异性聚集,并使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后,仅由凝聚胺引起的非特异性聚集,会因电荷中和而分散,而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。 2. 标本采集: 2.1 标本种类:抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清,将细胞配成5%...

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交叉配血(凝聚胺法)操作规程 1. 原理 凝聚胺(polymatching)法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,促进血清(浆)中的抗体与红细胞相应抗原结合,再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液,中和红细胞表面的负电荷,缩短细胞间距,形成可逆的非特异性聚集,并使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后,仅由凝聚胺引起的非特异性聚集,会因电荷中和而分散,而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。 2. 标本采集: 2.1 标本种类:抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清,将细胞配成5%盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。 2.2 标本要求:抗凝和干燥管均可,如用抗凝血主张用EDTAK2(mg/dz)抗凝标本应无溶血,切标签齐全。 3. 标本储存:急诊标本30分钟内完成操作,标本应至4℃冰箱保存7天。 4. 标本运输:室温运输。 5. 标本拒收 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 :细菌污染。溶血标本,标签不齐全不能作测定。 6. 试剂: 6.1 试剂名称:凝聚胺试剂(polymatching) 6.2 试剂生产厂家:合肥天一生物技术研究所。 6.3 试剂组成: 试剂1. 低离子介质.45ml×2。 试剂2. 重悬液15ml×1。 试剂3. 凝聚胺溶液15ml×1。 阳性对照1.5ml×1。 阴性对照1.5ml×1。 7. 仪器: 7.1离心机:平凡离心机。 7.2电热恒温水箱:长沙平凡实验设备厂 7.3显微镜:OLYMPUS(日本) 8. 操作步骤及结果判断: 8.1 供受者红细胞用生理盐水配成3-5%的细胞悬液。加样量均为:血清2滴,红细胞悬液1滴。主管:受血者血清+供者红细胞悬液;次管:受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)。 8.2 各管分别加低离子介质0.6ml混匀置室温1分钟。加凝聚胺溶液2滴,混匀,置室温15秒。 8.3 1000g(3000rpm),离心18秒,弃上清液,管底保留约2滴液体。轻摇 试管,观察是否形成凝块。如未形成凝块,则重做前面试验。 8.4 加入2滴重悬液,轻轻混合,肉眼或显微镜下观察结果。 8.5 凝块在1分钟内分散,试验结果为阴性,供受者血液配合;反之,如依照为不同强度的凝块,试验结果判为阳性,供受者血液不配合。实验结果必须在3分钟内判读。 9. 操作性能: 快速简便,特异性强,灵敏度较高,重复性好。 10. 超出范围结果处理: 10.1 细胞自凝: 在冬天气温较低时,某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶中轻轻摇动,观察结果。 10.2 若病人血清(血浆)含有肝素,如洗肾患者能影响配血,须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。 10.3 红细胞悬液为5%为宜,过浓或过淡可使抗原抗体比例不适当,反应不明显易误判。 10.4 各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集,部分溶血时,可溶性血型物质中和了相应的抗体。 11. 方法局限性: 11.1 试管,滴管吸头和玻片必须清洁干燥,防止溶血。 11.2 操作方法应按 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 ,先加血清,然后再加红细胞悬液,以便容易核实是否漏加血清。 11.3 离心时间不宜过长或过短,速度不宜过快或过慢,以防假阳性或假阴性结果。 11.4 观察时应注意红细胞呈特异性凝集,继发性凝固及线状排列的区别。
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分类:医药卫生
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