生化黄腐酸对免疫系统的影响初探

生化黄腐酸对免疫系统的影响初探 J un. 1998 1998 年 6 月北京联合大学学报 Journal of Beijing U nio n U niversity Vol . 12 No . 2 Sum No . 32 第 12 卷第 2 期总 32 期 生化黄腐酸对免疫系统的影响初探 薄芯李京霞何立千 () 北京联合大学职业技术师范学院 ,北京 100011 [ 摘 要 ] 以免疫器官指数 、迟发性超敏反应 、溶血素量和腹腔巨噬细胞吞噬率为指 标 ,以矿源黄腐酸为对照 ,对生化黄腐酸对动物免疫系统的影响作了初步研究 。结果表 明 :生化黄腐酸在免疫过程中各阶段均有促进作用 ,且剂量适合时作用极显著 ; 而矿源 黄腐酸则随试验条件不同分别表现为促进或抑制作用 ,二者之间有较明显的差异 。 [ 关键词 ] 生化黄腐酸 ;免疫器官指数 ;迟发性超敏反应 ;溶血素 ;巨噬细胞吞噬率 [ 分类号 ] Q 5233 1 ,3( ) 腐植酸 humic acid , HA在医药中主要用于治疗风湿 、胃肠道疾病 、炎症和溃疡等疾病。 4 ,5 () 不同产地的 HA 因煤化程度和提取方法不同而药效各异。黄腐酸 f ulvat um acid , FA是 HA中分子量最小 、溶解度最高 、生物活性最强 、吸收效果最佳的部分 ,故药用中以 FA 为主 。目前我 ( 国主 要 药 用 的 FA 为 巩 义 等 地 出 产 的 从 煤 炭 中 所 提 取 的 矿 源 黄 腐 酸 mineral f ulvat um acid , ) ( ) M FA,有关其药效药理研究已有较多报道 。而生化黄腐酸 biochemical f ulvat um acid ,B FA是 近年来我国河北深州首创的专利技术 ,是人工模拟自然条件利用发酵法形成的 ,因问世时间尚 短 ,有关的研究报道极为少见 。但根据我们在多方面所作的研究 ,认为其有良好的生物活性和药 ( 用价值 。因此我们针对其特点以免疫器官指数 、迟发性超敏反应 delayed2t ype hypersensitivit y , ) ( ) ( ) ( ) D T H、溶血素 hemolysin和腹腔巨噬细胞 M吞 噬 率 percentage of p hagocyto sis为 指 标 就 < M FA 和 B FA 对动物免疫系统的影响进行了初步对比研究 。 1 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 与方法 111 材料 ( B FA 为河 北 省 深 州 特 种 化 工 厂 提 供 。M FA 为 巩 义 制 药 厂 提 供 。环 磷 酰 胺 cyclop ho2 ( ) ) sp hamidum ,CPA针剂为上海第十二制药厂生产 。5 %鸡红细胞 CRBC, 10 %豚鼠血清 。试验 动物为 N IH 雄性小鼠 ,体重 18,22 g ,北京生物制品研究所提供 。 112 方法 ) 1对免疫器官的影响 。取小鼠随机分 8 组 ,具体分组及给药剂量见表 1 。CPA 为腹腔注射 ( ) 给药 , FA 均为灌胃给药 ,阴性对照和阳性对照组相应给生理盐水 N S,每日给药一次 ,连续 7 d 。 第 8 天称重后断颈处死 ,精密称量胸腺和脾 ,计算胸腺指数和脾指数 。 表 1FA 对小鼠免疫器官的影响 ( )( ) 动物FA 剂量剂量胸腺指数 %脾指数 %CPA 组别( )( )?x ?S D ?x ?S D 个数 ( )( )mg/ kg mg/ kg 01246 ?01067 1681 ?01171 010 阴性对照组 阳性对照组 01047 ?01011 01244 ?01086 10 50 B FA 对照组 01224 ?01066 01678 ?01105 25 10 M FA 对照组 01214 ?01033 01661 ?01143 10 25 低 B FA + CPA 组 01068 ?01026 01292 ?01061 315 50 10 中 B FA + CPA 组 01323 ?01085 01071 ?01024 33 3高 B FA + CPA 组 10 25 50 01082 ?01389 ?01024 01084 M FA + CPA 组 0 . 059 ?0 . 022 0 . 299 ?0 . 071 10 50 50 10 25 50 检验为用 FA 各组与阳性对照组之间 。 3 P < 0105 ; 3 3 P < 0101 表 2FA 对小鼠迟发超敏反应的影响()) 2对迟发性超敏反应 D T H 动物FA 剂量肿胀度/ mm的影响 。取小鼠随机分 3 组 , 具体 组别( )?x ?S D 个数 ( )mg/ kg 分组及给药剂量见表 2 , 给药方法 0125 ?01108 8 10 阴性对照组 及时间同上 ,用张世玲方法测小鼠3 3B FA 对照组 0142 ?01114 5 10 25 6 D T H 值。M FA 对照组 3 0137 ?01118 9 10 25 ) 3对溶血素影响 。取小鼠随 3 P < 0105 ; 3 3 P < 0101 机分 7 组 ,分组及给药剂量见表 3 , 7 给药方法及时间同上 ,用张亚利所用比色法测小鼠血清溶血素。 表 3 FA 对小鼠溶血素的影响 ( )( )() ( ) 溶血素 OD?x ?S D 组别动物个数FA 剂量 mg/ kgCPA 剂量 mg/ kg 10 01073 4 ?01025 3 阴性对照组 3阳性对照组 01044 3 ?01017 4 10 50 3 3 3 B FA 对照组 01362 0 ?01120 4 10 25 3 3 3M FA 对照组 01307 9 ?01099 9 10 25 3 3 3高 B FA + CPA 组 01339 0 ?01017 3 3 3 310 25 50 低 B FA + CPA 组 01121 6 ?01040 2 3 3 3M FA + CPA 组 10 15 50 01128 3 ?01052 9 10 25 50 3 P < 0105 ; 3 3 P < 0101 ; 3 3 3 P < 01001 ) 4对 M吞噬率的影响 。小鼠随机分为 7 组 ,各组给药剂量见表 4 。给药方法及时间同上 , < ( ) 于第 5 天至第 7 天腹腔注射 2 %淀粉溶液 015 mL 共 4 次 各间隔 12 h。第 8 天腹腔注射 5 % CRBC 012 mL / 只 ,6 h 后断颈处死 。常规方法推片染色 。光镜下每只小鼠计 200 个 M。根据其 < 8 吞噬 CRBC 情况计吞噬率及吞噬指数。 46 北京联合大学学报1998 年 6 月 表 4 FA 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的影响 - 1 ( ) 动物FA 剂量剂量吞噬率 %() CPA 吞噬指数 个 组别( )个数 ?x ?S D ( )?x ?S D ( )( )mg/ kg mg/ kg 34150 ?121500 1444 ?01163 4 10 0阴性对照组阳性对照组 50 10 16123 ?71377 201235 ?01107 6B FA 对照组 27165 ?61733 001387 ?01080 310 25 M FA 对照组 10 25 23190 ?51164 001340 ?01046 1低 B FA + CPA 组 3 33 3 10 25 50 26133 ?01375 ?71274 2 01109 0 高 B FA + CPA 组 33 10 50 50 23117 ?01358 ?21996 3 01129 2 M FA + CPA 组 50 10 25 20175 ?41675 201292 ?01071 0 P < 0105 ; 3 3 P < 0101 检验为用 FA 各组与阳性对照组之间 。 3 2 结果 211 FA 对免疫器官指数的影响 结果见表 1 。数据表明 :B FA 和 M FA 对正常小鼠的免疫器官无毒副作用 。M FA 不能使受 ( CPA 抑制的免疫器官恢复 。而低剂量 B FA 即可使给 CPA 的小鼠免疫器官指数回升 但不明 ) 显;而中 、高剂量 B FA 分别使给 CPA 的小鼠免疫器官指数回升显著和极显著 ,说明 B FA 对免 疫低下的小鼠有促进免疫器官上升作用 ,且作用效应与用药量有一定正向量效关系 。 212 FA 对 D TH 影响 结果见表 2 。数据表明 :B FA 可极显著增强小鼠 D T H , M FA 可显著增强小鼠 D T H ,二组间 未见显著差异 。表明 B FA 和 M FA 均可增强动物的细胞免疫功能 ,而 B FA 作用可能更强 。 213 FA 对溶血素的影响 结果见表 3 。数据表明 :B FA 和 M FA 均可极显著增加正常小鼠的溶血素量 ,说明二者均可 提高小鼠的体液免疫机能 。给 CPA 同时给 FA 的小鼠溶血素水平均明显回升 ,并超过正常小鼠 溶血素水平 。表明其不仅可缓解 CPA 引起的体液免疫功能下降 ,而且可再度增强小鼠体液免疫 机能 。试验中 B FA 与 M FA 在相同剂量时 ,B FA 作用极显著强于 M FA 。B FA 不同剂量组之间 差异极显著 ,表明 B FA 作用与剂量间在试验的用量范围内有明显的正向量效关系 。 214 FA 对 M吞噬率的影响< 结果见表 4 。数据表明 :B FA 对正常小鼠 M无影响 ,而 M FA 可导致正常小鼠 M功能有一 < < ( ) 定下降 P < 0110。在给 CPA 后 ,低剂量 B FA 即极显著回升 M功能 ,高剂量组可显著回升 M < <功能 。二剂量组之间作用无显著差异 。同剂量 B FA 与 M FA 之间作用无显著差异 ,但 B FA 作用 ( ) 有强于 M FA 的趋势 P < 0110。还可见 50 mg/ kg B FA 组的作用弱于 25 mg/ kg 组 ,可能因 FA 有双向调节作用所致 ,需对 B FA 的最佳用药剂量进一步研究 。M FA 对正常小鼠有抑制 M功 < 能 ,而对免疫低下小鼠则有一定的恢复 M功能作用 ,其机理有待进一步探讨 。 < 3 讨论 般认为分子量较小的 FA 可有一定的免疫增强作用 ,而分子量较大的棕 、黑腐酸则常有免疫抑制 4 ,5 ,9 作用。B FA 系在人工控制条件下生产 ,生成周期短 ,主要经过微生物分解阶段而未进入再 缩合 ,故缩合程度低 ,且因生产中未经高温 、高压和强酸 、强碱处理 ,除产物分子更小 ,水溶性更好 ,所带活性基团更多以外 ,还保留了大量多种氨基酸 、多肽 、多糖 、核酸和微量元素等对生物体 有益的成分 。本文试验结果表明 B FA 生物活性更高 ,对免疫系统影响更明显 。可初步肯定 B FA 为免疫增强剂 ,在免疫过程中各阶段似均有促进作用 。而 M FA 对免疫系统的作用则随试验条件各异在不同免疫途径中分别表现出促进或抑制作用 ,具体作用机理尚有待进一步探讨 。本文 试验数据还说明二种 FA 的作用之间确有较明显的差异 ,在医药上完全将其视为一种物质是不 够妥当的 。作为免疫增强药物 B FA 可能有良好的发展前景 。 参加此试验的还有本校李鸿玉老师和曹小荣 、刘忱益同学 ,特此致谢 。 参 考 文 献 () 易安民 ,彭庆东 ,易春兰 1 腐植酸钠治疗消化性溃疡的疗效观察 1 江西腐植酸 ,1984 , 2:49,50 1 () 苏秉文 1 黄腐酸钠治疗溃疡性结肠炎疗效及对免疫系统的影响 1 腐植酸 ,1994 , 3:43,45 2 () 姚发业 ,王寿桐 ,贺苏红等 1 新疆黄腐酸钠抗炎作用研究 1 腐植酸 ,1988 , 2:37,38 3 () 曾达之 ,孟昭光 ,刘泳泉 1 泥炭腐植酸钠对巨噬细胞功能的影响及其毒性 1 江西腐植酸 ,1983 , 3:43,444 () 吴铁 ,郭澄泓 1 北京腐植酸对小鼠免疫功能的影响 1 江西腐植酸 ,1984 , 3:43,45 5 () 张世玲 1 噪声和咖啡因配合作用对小鼠免疫功能的影响 1 山东医药工业 ,1993 ,12 1:18,19 6 () 张亚利 ,彭松峰 1 眼镜蛇毒对实验动物免疫功能的影响 1 广州医药 ,1994 , 4:52,537 陈奇 1 中药药理研究方法学 1 北京 :人民卫生出版社 ,1993 . 315,317 () 丁桂凤 ,邓玉兰 ,尚红生 1 黄腐酸对免疫细胞功能的影响 1 腐植酸 ,1988 , 4:28,30 8 9 A Study on Immun ity Eff ected By Biochemical Fulvatum Ac id Bo Xin Li J ingxia He Liqian ( )Normal College of Vocatio nal and Technical Training of BU U ,Beijing 100011 Abstract The p urpo se to t his st udy was to co mpare t he effect s of biochemical f ulvat um acid () ( ) B FAand mineral f ulvat um acid M FAo n immunit y. It was measured innume o rgan index , de2 () layed2t ype hypersensitivit y D T H,serum hemolysin and abdo minal cavit y macrop hage p hagocyto sis in mice . The result s showed t hat B FA and M FA displayed different actio ns o n immunity. B FA was immunoenhancement in every immune p hases and it s actio n was remar kable in right amo unt . Where2 as M FA showed immuno dep ressio n o r immunoenhancement in t he same experiment s. t hey can’t be used as t he same substance in medicine . () biochemical f ulvat um acid B FA;innume o rgan index ; delayed2t ype hypersensitivit y Ke y words () D T H; hemolysin ;abdo minal cavit y macrop hage p hagocyto sis