多波长直线回归法同时测定芦荟苷和芦荟大黄素的含量

多波长直线回归法同时测定芦荟苷和芦荟大黄素的含量 多波长直线回归法同时测定芦荟苷和芦荟 大黄素的含量 第22卷,第5期 2005年9月 光谱实验室 ChbzeseJournalofSpectroscopyLaboratory Vo1.22,No.5 September,2005 多波长直线回归法同时测定 芦荟苷和芦荟大黄素的含量 李光文?陈伟黄丽英罗红斌 (福建医科大学药学院福州市交通路88号350004) 摘要 依据芦荟苷与芦荟大黄素的光谱特征,选择350-’450nm为测定波长范围,用多波长直线回归分光光 度法同时测定芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素含量.在测定波长范围内间隔lnm测定样品溶液的吸光度值, 建立回归方程Ale;?i蠢=c;苷?,蕃苷/,?t蠢+c;?t,芦荟苷和芦荟大黄素的测定回收率分别为 97.4%--102.5,97.5--100.7%,RSD分别为0.22一O.890.35一O.82,测定时二者无相互 干扰.本方法简便可靠,重现性好,为芦荟资源的进一步开发利用及质量控制等提供新的方法和重要依 据. 关键词多波长直线回归法,芦荟苷.芦荟大黄素. 中图分类号:0657.32文献标识码:B文章编号:1004—8138(2005)05—1021—04 l前言 芦荟(Aloe)是百合科多年生长绿草本植物.研究发现,芦荟具有愈伤,泻下,调节免疫功能,抑 杀细菌,消炎,抗辐射,抗肿瘤,抗病毒,降血糖血H旨,调节血压,抗衰老和预防艾滋病等功效卜.芦 荟苷(Aloin)和芦荟大黄素(Aloe—Emodin)是芦荟的主要药用活性成分,具有抗菌,消炎,泻下,抗 癌,抗衰老等功效I-引.芦荟苷和芦荟大黄素的结构式分别如下: 芦荟苷 芦荟大黄素 ?联系人,电话l(0591)83569070,传真I(0591)83574658~E-maillIgw6301@tom.conl’ 作者简介:李光文(1963一).男,福建省连江县人.高级工程师,现从事实验室教学和科研工作. 收稿日期l2005—05—16 光谱实验室第22卷 关于芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素的含量测定方法有高效液相色谱法,极谱法,荧光分光光度 法,毛细管电泳法等叫].本文采用多波长直线回归分光光度法不经分离同时测定芦荟苷和芦荟大 黄素的含量,结果表明:该方法样品前处理简便,回收率高,重现性好. 2实验部分 2.1仪器与试剂 752PC型紫外分光光度计(上海光谱仪器公司).芦荟苷对照品,芦荟大黄素对照品(中国药品 生物制品检定所).其他试剂均为 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 纯,实验用水为二次蒸馏水. 1.0×10mol/L芦荟苷对照品储备液:准确称取10.5mg芦荟苷对照品,用少量无水乙醇溶 解,并定容于25mL容量瓶中. 1.0×10mol/L芦荟大黄素对照品储备液:准确称取芦荟大黄素对照品6.8mg,用乙醇溶解 并定容至25mL. 2.2实验方法 精确量取芦荟苷储备液2.5mL,芦荟大黄素贮备液2.5mL,分别置于25mL容量瓶中,加入无 水乙醇定容.以无水乙醇为空白,在波长330---~550nm间扫描,每间隔Into测定吸收值. 3结果和讨论 3.1吸收光谱的绘制及测定波长的选择 根据实验方法,得到芦荟苷和芦荟大黄素的吸收光 谱,见图1. 对有两个吸收光谱相互重叠的组分1和2有: A—e1C1+e2C2(1) 将上式改写成:A/e----C+C2e2/e(2) (2)式为直线方程,在吸收范围内,任意波长处所测量 的A,e,e值均满足此方程.因此,根据个波长处所测得 的数据,建立回归方程,则此回归方程中的斜率为c,截距 为c.即可测定重叠组分的含量. 泉 波长Mnm 图1芦荟苷和芦荟大黄紊的吸收光谱 卜一芦荟苷;2_芦荟大黄素. 讨论一元线性回归分析中回归方程稳定性时,已知自变量(e/e)的离散程度越大,回归系数 (C)和常数项(C)的估计就越精确,所以选择测定波长范围为350--450nm. 3.2芦荟苷和芦荟大黄素的吸光系数 在测定波长范围内间隔Inm分别测定不同浓度芦荟苷和芦荟大黄素 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 溶液的吸光度值,输 人微机,进行线性回归,可得到二者在各波长下的吸光系数值. 3.3稳定性试验 分别配制适宜浓度的芦荟苷和芦荟大黄素混合液3份,以无水乙醇为空白,在配制后0,1,4, 24h测定.结果表明,在测定波长下的吸光度值无明显变化. 3.4干扰试验 分别精确量取0.1,0.5,1,2,4mL芦荟大黄素储备液,置于50mL容量瓶中,再分别精确加人 1mL芦荟苷储备液.另精确量取1mL芦荟苷储备液,置于50mL容量瓶中.上述溶液均用无水乙 醇稀释至刻度.所配制的5份混合液和1份芦荟苷溶液,分别在选定波长下测定吸光度,建立回归 第5期李光文等t多波长直线回归法同时测定芦荟苷和芦荟大黄素的含量 方程/.芦荟大黄素一C芦荟苷?.芦荟苷/t芦荟大黄素+C芦荟大黄素.结果表明,6份溶液的回归直线斜率相同,即芦 荟大黄素的含量对芦荟苷的测定无影响. 按上述同样方法,配制5份含等量芦荟大黄素,不同量芦荟苷的混合液和1份芦荟大黄素溶 液,分别进行测定,建立回归方程/芦荟大黄素=c芦荟苷?.芦荟苷/.芦善大黄素+c芦荟大黄素.结果表明,6份溶 液的回归直线常数项相同,即芦荟苷的含量对芦荟大黄素的测定无影响. 3.5回收率试验 在样品溶液中加入一定量的芦荟苷和芦荟大黄素标准溶液,按实验方法测定并计算回收率,从 表1中可以看出芦荟苷和芦荟大黄素的测定回收率分别在97.4%--102.5,97.59,6--100.79,6t 结果令人满意. 表1回收率试验结果 3.6芦荟不同部位芦荟苷和芦荟大黄素含量的测定 切割已成熟的库拉索芦荟叶片6片,清洗干净,其中取3片芦荟叶迅速把皮和凝胶分离开,并 精确称取凝胶,皮,全叶的质量.粉碎后残渣用无水乙醇提取4次,每次用量10ml,过滤并定容于 100mI容量瓶中.按实验方法测定芦荟苷和芦荟大黄素的含量,测定结果见表2. 表2芦荟不同部位芦荟苷和芦荟大黄素含量 4.结论 芦荟苷和芦荟大黄素属于蒽醌类化合物,是芦荟的主要药用活性成分,因此两者的含量是中药 芦荟和芦荟制品质量控制的重要指标.紫外可见分光光度法(UV法)是测定中草药有效成分的常 用易行方法,但应用单波长紫外可见分光光度法(UV法)不能直接分别测定芦荟苷和芦荟大黄素, 测定时互相干扰,因为两组分的吸收光谱互相重叠【8].本文通过多波长直线回归分光光度法,可同 时对芦荟苷和芦荟大黄素进行测定,试验结果表明该方法可消除二者之间的相互干扰. 通过对库拉索芦荟叶片不同部位芦荟苷和芦荟大黄素含量的测定,说明芦荟苷和芦荟大黄素 主要存在于叶片表皮,为芦荟药用成分的提取利用提供了依据. 1O24光谱实验室第22卷 参考文献 I-1]熊佑清,姚利着.芦荟[M].北京,中国农业大学出版社,1998.13—14. [2]LeeHz,HsuSL,LiuMCet.EffectsandMechanismsofAloe—EmodinonCellDeathinHumanLungS quamousCellCarcinoma [J].Eur..,.Pharmaco1.,2001,23:287—295. [3]王勇,王军伟,黄兆胜等.芦荟多糖对肿瘤化疗的增效和减毒作用研究[J].中药新药和临床 药理,2002,13(2):89,91? [4]邓军文.芦荟化学成分及其药理作用[J].佛山科学技术学院学报,2000?18(2),76—8O. [53VisuthikosolV.ChowchuellB.Sukwanaratxet02.EffectofAloeVeratoHealingofBurnWoundaCli nicalandHistologicStudy [J].jlf.以.Thai.,1995,78(8)t4O3—4O9. [63陈丹,包国荣,曾云瑾等.高效液相色谱法测定斑纹芦荟中芦荟苷含量口].中田现代应用药学杂志,1999?16(3);43. [7]李启隆,任莉,胡劲波等.芦荟苷的伏安行为及其应用研究[J].药学学报?1997,’,32(9)t691. [8]赵慧春.方雷琴.邓小光等.芦荟苷一硼砂荧光体系及芦荟苷的测定[J].北京师范大学学报(自然科学版),1997,33(2):231— 233. [9]王德先,杨更亮,王琳颖等.毛细管区带电泳测定芦荟中的有效成分[J].色谱,2000,18(5)z423. DeterminationoftheAloinandAloe—Emodin byMulti-WavelengthLinearRegressionMethod I.1Guang?-WenCHENWeiHUANGLi?-YingLuoHong’?Bin (CollegeofPhannaceutk’al.FujianMedicalUniversity,Fuzhou350004,P.R.China) Abstract Amethodforthedeterminationofaloinandaloe—emodiminaloeverawasestablishedbasedOn multi—wavelengthlinearregressionspectrophotometryinwavelengthrangeof350--450nmwithfl regressionequation.Therecoveriesofaloinandaloe—emodinare97.4--102.5and97.5一 100.7%withtherelativestandarddeviationsof0.22--0,89and0.35一O.82,respectively. Thismethodissimple,accurateandwellreproduciblewithouttheinteractionofaloinandaloe— emodin,andprovidesflscientificbasisforqualityevaluation,qualitycontrol,resourcesdevelopmentan d utilizationofaloe. KeywordsMulti—WavelengthLinearRegressionMethod,Aloin,Aloe—Emodin. 廉价光谱分析资料讯息 1.《光电光谱分析》,周开亿主编,4册,16开,1236页,《光谱实验室》编辑部 增刊,每套55元. 2.《光谱实验室}2004年1—6期,16开,1248页,每套75元. 3.《数理统计在化学,光谱分析中的应用》,纳利莫夫着,余生等译,《光谱实验 室》编辑部编,16开,396页.每册10元. 4.《邮票上的光谱学和化学史》,周开亿等编,《科学出版社》出版,16开,158 页.每册10元. 5.《空心阴极放电及其应用》,周开亿主编,《真空科学与技术》杂志社出版,32 开,798页,上下册,每套10元. 以上各书售价中均含普通印刷品邮费.购款可用邮票支付. 联系地址:北京市81信箱66分箱《光谱实验室》编辑部联络处刘建林, 邮编:100095.