丹红注射液细菌内毒素检查方法的研究

丹红注射液细菌内毒素检查方法的研究 ? 808?安徽医药AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2006Nov;10(11) 丹红注射液细菌内毒素检查方法的研究 华剑,武超 (安徽省蚌埠医学院附属医院药剂科,安徽蚌埠233004) 摘要:目的考察丹红注射液细菌内毒素检查方法的可行性.方法依据《中华人民共 和国药典(二部)))2005年版细菌内毒素 检查法,确定丹红注射液的有效稀释浓度和细菌内毒素限值.结果丹红注射液在最 大有效稀释浓度下对鲎试剂无干扰作用, 其内毒素限值符合规定.结论可用细菌内毒素检查法来取代《中国药典))2005年 版(二部)规定的热原检查法. 关键词:丹红注射液;细菌内毒素;干扰试验;鲎试剂 Thestudy0fbacterialendotoxintestmethodofdanhonginjection HUAJian.WUChao (DepartmentofPharmacyHospitalAffiliatedofBengbuMedicalCollege,Bengbu233004) Abstract:AimToinvestigatefeasibilityofbacterialendotoxinsondanhonginjection.MethodsThevalidconcentrationofDanhong injectionandit? bacterialendotoxinlimitwerederminedbythebacterialendotoxintestmethodinChinesePharmcopoeia(Edition2005). ResultsTheexperimentshowedthattheinterferencelementscanbeexcludedbydilutingDanhonginjection2times,anditiseffective thatendotoxincanbetestedbyamebocytelysalywithaccualyof0.5Eu?ml,.ConclusionBa cterialendotoxintestcanbeusedtore. placethepyrogentestwhichissetdepsrtmentalstandard. Keywords:danhonginjection;bacterialendotoxins;interferencetest;tachyleusamebocytel ysate 丹红注射液是植物丹参,红花提取物,其主要成分是丹参 素.丹红注射液治疗前后红细胞的变形能力明显改善,其血 液流变学各项指标均显着下降(P<0.05—0.01),TCD频谱 提示VBI,VM明显增快,提示丹红注射液具有扩张脑血管,增 加脑血流量,增强脑部供氧量,减轻因缺血,缺氧所造成的脑 功能损伤,对防止缺血性脑血管发生具有较好的疗效.其热 原检查方法为家兔法…,因该法操作繁琐.为此,参照《中华 人民共和国药典(二部))2005年版细菌内毒素检查法试验基 本原理及细菌内毒素干扰试验的实验 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 ,本文 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 了丹红 注射液的热原检查用凝胶限量法细菌内毒素检查取代家兔法 的可行性研究结果. 1材料与方法 1.1材料丹红注射液(湖南步长制药有限公司,s1批号: 051004,s2批号:051106,s3批号:051209均系家兔法热原检 查合格品).鲎试剂(批号:050312,0.5Eu?ml,,0.1ml? 支,;批号:041122,0.5Eu?ml一,0.1ml?支由湛江海洋 生物制品厂生产).无热原试管,无热原吸头(湛江海洋生物 制品厂提供).细菌内毒素工作标准品(批号:2004—2,100 Eu?支,,中国药品生物制品检定所生产).细菌内毒素检 查用水(批号:050402,5ml?支..,中国药品生物制品检定所 生产).电热恒温水浴锅(上海跃进医疗器械厂),旋涡混合 器(上海医科大学仪器厂),隔水式恒温培养箱(上海医用恒 增加其SOD的活性,显示较强的抗氧化作用,这进一步提示 AMG镇痛与其抗炎,抗氧化作用有关,其详细的机制有待进 一 步研究. 参考文献: [1]CoruzziG,BertacciniG.Gastriceffectsofthenovelnon.steroidalanti. inflmmatorydrugamtolmetinguacy1.Nutrition,1999;15(4):325-6. 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(收稿日期:2006—04—13) 安徽医药AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2006Nov;10(11)-809? 温设备厂),试验所用的玻璃器具均经250?干烤2h. 1.2细菌内毒素理论限值L计算采用公式L=K/M计算 出丹红注射液内毒素的理论限值,其中K按我国细菌内毒素 标准的致热阈为5Eu?kg,?h..,丹红注射液热原注射 剂量M=1ml?kg,?h,,计算出供试品的细菌内毒素理论 值为:L=K/M=5Eu?kg,?h/lm1,?kg,-h,=5Eu ?ml,.当鲎试剂敏度为0.5Eu?ml时,其MVD(最大有 效稀释倍数)=L/h=10. 1.3鲎试剂灵敏度复核试验按文献'细菌内毒素检查 法"将细菌内毒素工作标准品用检查用水溶解后置漩涡混合 器上混合15min,然后制成1.0,0.5,0.25.0.125Eu?ml溶 液,取含有复溶后的0.1ml/支规格的鲎试剂原安瓿l8支,其 中l6管分别加入0.1ml不同浓度的内毒素标准溶液,及每 一 个浓度平行做4管;另外2?管加入0.1ml细菌内毒素检查 用水作为阴性对照.将试管中溶液轻轻混匀后,封闭管口,垂 直放人37??1?适宜恒温器中,保温60?2min.结果如 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1示hc=0.5Eu-ml,,在0.5h一2h内,可用于细菌内毒素 检查. 1.4供试品干扰试验按《中华人民共和国药典(二部)》 2005年版细菌内毒素检查法中的供试品干扰试验方法进行 试验.取上述2个批号的丹红注射液和灵敏度为0.5Eu? ml不同批号的鲎试剂以及细菌内毒素检查用水做干扰试 验,按照表2制备溶液A,B,C,D,每一浓度平行做四管,按鲎 试剂灵敏度复核试验项下操作.结果如表2所示,溶液A和 阴性对照溶液D的所有平行管都为阴性,并且系列溶液C的 结果在鲎试剂灵敏度复核范围内,干扰实验有效. 1.5供试品细菌内毒素检查试验按《中华人民共和国药 典(二部)))2005年版细菌内毒素检查法中的供试品细菌内毒 素俭查法进行试验.取上述3个批号的丹红注射液为原液, 再对原液进行2倍稀释.以此2倍稀释液为供试品,分别用 灵敏度为0.5Eu?ml的鲎试剂作细菌内毒素试验. 2结果 2.1鲎试剂灵敏度复核试验结果见表1.从表1可知:两 批鲎试剂灵敏度均在0.5h,2.Oh之间,可用于细菌内毒素的 检查. 表1鲎试剂灵敏度复核 2.2丹红注射液的干扰试验结果见表2.从表2可看出: 两种不同灵敏度的鲎试剂B1,B5,B13的E值均大于1.0,说 明丹红注射液原液对鲎试剂试验有干扰.而两种不同灵敏度 的鲎试剂稀释后的E值均在0.5h,2.Oh之间,说明丹红注 射液的稀释液对鲎试剂试验无干扰. 2.3样品细菌内毒素检查试验结果见表3.从表3可以 看出,不同批号的鲎试剂对三批样品进行细菌内毒素检查,结 果均符合规定,说明三批样品的细菌内毒素均符合规定. 3讨论 以上结果表明,2倍稀释液的Es在0.5h,2.Oh之间,Et 表2丹红注射液的干扰试验 表3三种样品的细菌内毒素检查 鲎试剂 批号 样品 编号 S1 S2 S3 S1 S2 S3 供试管供试管阴性 12对照 样品 阳性对照 041122 050312 均在0.2Es,2.0Es之间,证实无干扰作用.由于细菌内毒 素检查法具有操作简单,灵敏度高,重现性好,实用性强等优 点,故可以用细菌内毒素检查法来控制丹红注射液的细菌内 毒素含量,以达到安全用药目的. 本文先根据公式计算出丹红注射液的有效稀释浓度,再 由干扰试验进一步验证,从而减少试验的盲目性,避免浪费试 剂并且节省时间.鲎试剂测定所要求的pH范围为6.25,7. 25,而丹红注射液原液的pH范围为4.50,6.50,对细菌内毒 素检查法存在干扰,试验结果证实此干扰作用可通过稀释而 消除. 参考文献: [1]国家药品监督管理局.国家中成药标准汇编(内科心系分册) [S],2002:356. [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典.二部.附录XIE,北京: 化学工业出版社,2005:85. (收稿日期:2006—06—08)