空气细菌测定
将采得的空气样品,通过培养,进行细菌菌落计数,或折算成单位体积空气中所含细菌数,对照
标准
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,作出空气清洁或污染程度的
评价
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。
一、沉降平皿法
将盛有培养基的平皿持平暴露在空气中一定时间,然后置温箱培养,计算所生长的菌落数。
1.制备培养基常用的营养琼脂培养基含以下成分:牛肉浸膏50g;蛋白陈10g;氯分钠5g;琼脂20g;加水至1000ml。调节培养基pH7.2~7.4,经15磅30分钟高压灭菌。
2.空气采样
(1)选择有代表性的采样点,一般在室内四角及室中央,放置含营养琼脂的平皿。
(2)打开皿盖(将皿盖置于平皿底下,不可仰放,以防污染),将有培养基的平皿,暴露于空气10~20分钟(视空气清洁程度而定),采样毕合上皿盖,
记录
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采样时间。
(3)培养皿置于37℃温箱培养24小时。
(4)记录5个平皿的菌落总数。
3.结果计算:100cm2琼脂面积上,5分钟所降落的菌落数,相当于10L空气所含细菌数,计算结果如下:
t——平皿暴露于空气中的时间(分钟)
N——培养后,平皿上的菌落总数
A——所用平皿的面积(cm2)
二、离心式空气微生物采样法
(一)原理:采用LWC-1型离心式空气微生物采样器。当采样器通电后,借助采样器内叶轮的高速旋转,把距离40cm范围内的空气吸进采样器,由于离心力的作用,空气中的粒子冲击到含有琼脂培养基的塑料条上,而空气呈螺旋状离开采样器涡壳流出。
(二)操作步骤
1.根据所采细菌种类,往琼脂培养基条上浇灌不同种类的培养基,每条琼脂培养基的注入量约为6ml。
2.把琼脂培养基条,从无菌塑料套中取出,插入采样器头部的涡壳内。
3.根据需要选定采样时间的采样地点。
4.将电源开关拨至“开”的位置,指示灯亮。
5.按动按钮,即起动开始采样。
6.采样完毕,关断电源开关。将基条从涡壳内抽出,放入无菌塑料套中(将条的凹面对准套的凸面)送恒温箱中进行培养,然后计算菌落数。
7.菌落计算
菌落形成单位CFU/m3=琼脂培养基条上的菌落数/40×采样时间(min)
琼脂培养基的表面积为34×1cm2。
8.注意事项
(1)一条琼脂基条的采样时间最多不超过8分钟。
(2)琼脂培养基条插入涡壳的开口处时,琼脂的表面要面向叶轮,基条插入后,突出部分应为1.5~2cm。
(3)打开开关“1”时,采样时间30秒,采样量20L;依次类推。
开关“全”关,采样时间8分,采样量320L。